Tế bào lai là tế bào đƣợc tạo ra để sản xuất một lƣợng lớn kháng thể đặc hiệu kháng nguyên (kháng thể đơn dòng). Để sản xuất kháng thể đơn dòng, chuột đƣợc gây miễn dịch với kháng nguyên đặc hiệu. Sau một vài tuần, thu máu từ chuột đã gây miễn dịch để định lƣợng kháng thể trong huyết thanh. Khi hiệu giá kháng thể đủ cao, chuột đƣợc giết và thu lấy lách để tách tế bào lympho B. Những tế bào lympho này đƣợc dung hợp với tế bào ung thƣ tủy myeloma thiếu gen HGPRT (hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase) sử dụng PEG (polyethylene glycol) hoặc Sendai virus. Các tế bào dung hợp đƣợc nuôi cấy trong môi trƣờng HAT (hypoxanthyl aminoteptrin thymidine). Tế bào myeloma mất khả năng tổng hợp kháng thể và thiếu enzyme HGPRT là những enzyme cho phép tế bào tổng hợp purine từ hypoxanthine. Ban đầu, sự vắng mặt của HGPRT không phải là vấn đề vì tế bào có thể sử dụng con đƣờng thay thế để tổng hợp purine. Tuy nhiên, khi tế bào nuôi cấy trong môi trƣờng aminoteprin, chúng không thể sử dụng con đƣờng thay thế khác và nó phụ thuộc hoàn toàn vào HGPRT để tồn tại. Tế bào lympho B đƣợc phân lập từ chuột có enzyme
HGPRT và cũng có khả năng sản xuất kháng thể, khi tiếp xúc với kháng nguyên nó sẽ biệt hóa thành tƣơng bào plasma sản xuất kháng thể nhƣng đó lại là giai đoạn cuối cùng của quá trình biệt hóa nên chúng không thể nhân lên trong nuôi cấy. Do vậy, chỉ có tế bào lai mới có khả năng tồn tại trong môi trƣờng HAT. Dịch nuôi cấy tế bào lai đƣợc kiểm tra để tìm những tế bào sản xuất kháng thể mong muốn. Vì có thể có nhiều hơn một tế bào lai trong các giếng ban đầu, các tế bào đơn từ các giếng dƣơng tính kháng thể phải đƣợc tạo dòng và cấy truyền. Sau khi tạo đƣợc dòng tế bào lai đặc hiệu kháng nguyên thì kháng thể đơn dòng đƣợc sản xuất bằng cách tiêm dòng tế bào lai này vào khoang bụng của chuột hoặc sử dụng kỹ thuật nuôi cấy tế bào in – vitro [8, 23, 25].
Hình 1.12. Công nghệ tế bào lai [44]