Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.4. Ảnh hưởngcủa chất điều hòa sinh trưởng tới quá trình phát sinh hình thá
thái của mẫu nuôi cấy
Chất điều hòa sinh trưởng có ảnh hưởng rất lớn đến quá trình phát sinh hình thái của mẫu nuôi cấy mô. Người ta có thể tạo phôi vô tính trực tiếp của cây lan Oncidium Gower Ramsey khi nuôi cấy mẫu lá trên môi trường có bổ sung 2,4D; α-NAA; TDZ (J.T. Chen et al., 1999), hoặc nhân nhanh loài lan Hồ điệp thông qua chồi, lá có nguồn gốc từ cuống hoa trên môi trường bổ sung 6-BA, α- NAA (So - Young Park et al., 2001). Thí nghiệm cho thấy khi bổ sung vào môi trường nuôi cấy chất điều hòa sinh trưởng là 6-BA thì thấy có sự phát sinh hình thái dạng tạo protocorm và chồi. Môi trường nền cơ bản sử dụng trong thí nghiệm là: VW bổ sung 30 g/L đường, 10 % nước dừa (ND), 10% chuối xanh, 0,5 g/L AC, 5,5 g/L agar và 6-BA được bổ sung từ 0 mg/l – 3mg/l môi trường, pH=5,8.
Kết quả ảnh hưởng của 6-BA đến khả năng tạo protocorm và chồi được thể hiện trong bảng 4.6.
Bảng 4.6. Ảnh hưởng của nồng độ 6-BA đến khả năng tạo protocorm và chồi của lan hoàng thảo Vôi đỏ
Chất ĐHST Nồng độ (mg/l) Tỉ lệ mẫu PSHT (%) Dạng pro (%) Dạng chồi (%) 6-BA 0,0 3,2 1,7 1,5 0,5 4,7 1,5 3,2 1,0 21,8 17,3 4,5 2,0 30,2 28,8 2,0 2,5 3,0 28,2 24,2 28,2 24,2 0,0 0,0
Hình 4.4. Ảnh hưởng của nồng độ 6-BA đến khả năng tạo protocorm và chồi của lan hoàng thảo Vôi đỏ ở nồng độ 6-BA = 2mg/l
Kết quả nghiên cứu ảnh hưởng của nồng độ 6-BA, cho ta thấy ở các nồng độ khác nhau ảnh hưởng tới khả năng tạo protocorm và chồi của của lan hoàng thảo Vôi đỏ là khác nhau. Ở nồng độ 6-BA 0,5 mg/l tỷ lệ tạo protocorm đạt 1,5%, nhưng khi tăng nồng độ lên thì tỷ lệ phát sinh hình thái cũng tăng lên, tạo protocorm tăng lên rõ rệt và cao nhất ở nồng độ 2mg/l. Như vậy 6-BA ảnh hưởng khá rõ rệt đến tỷ lệ tạo protocorm của mẫu nuôi cấy, tuy nhiên nếu nồng độ quá cao sẽ làm cho mẫu khó phát sinh hình thái hoặc có thì chất lượng rất kém.
Như vậy, nồng độ 6-BA 2mg/l được chọn là nồng độ thích hợp để tạo protocorm và chồi của lan hoàng thảo Vôi đỏ.
4.5. NGHIÊN CỨU PHƯƠNG PHÁP NHÂN NHANH THÔNG QUA PROTOCORM Ở CÁC ĐIỀU KIỆN NUÔI CẤY KHÁC NHAU