PHẦN 4 KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.1. KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU XÂY DỰNG QUY TRÌNH PHÂN LẬP
4.1.3. Kết quả chẩn đoán vi khuẩn bằng phương pháp PCR
89 mẫu Swabs khí quản chúng tôi thu thập được chẩn đoán bằng kỹ thuật PCR. Kết quả thu được thể hiện ở hình 4.7.
Hình 4.7. Kết quả chẩn đoán ORT bằng phương pháp PCR
1. 100bp ADN ladder; 7 là đối chứng âm; 8 là đối chứng dương; 2, 3, 4, 5, 6 là các mẫu cần kiểm tra
Kết quả hình 4.7 cho thấy: đối chứng dương lên vạch, cho sản phẩm PCR nhỏ hơn 800bp (khoảng 784bp như trong thiết kế cặp mồi đặc hiệu); đối chứng âm không lên vạch, không cho sản phẩm PCR như đối chứng dương; chứng tỏ phản ứng đặc hiệu, cho độ tin cậy cao trong quá trình phân tích và đánh giá kết quả.
Trong tổng số 89 mẫu Swabs khí quản được chẩn đoán bằng phương pháp PCR, có 06 mẫu cho sản phẩm PCR có kích thước tương ứng với đối chứng dương như trong thiết kế cặp mồi đặc hiệu (khoảng 784bp), chiếm tỷ lệ 6,74% (6/89). Như vậy, trong 06 mẫu trên có chứa ADN của vi khuẩn ORT. Có 82 mẫu không cho sản phẩn PCR như đối chứng dương, chiếm 92,13% (82/89); chứng tỏ, trong 82 mẫu trên không chứa DNA của vi khuẩn ORT và có 01 mẫu nghi ngờ, chiếm 1,12% (1/89). Kết quả này là tương đối cao so với các nghiên cứu trước đây là 4,7% (Nguyễn Thị Bích Liên và cs, 2014); 2,6% (Ozbey et al., 2005) và 2,3% (Asadpour et al., 2008). Mặt khác, trong tổng số 89 mẫu Swabs khí quản thu thập được từ đàn gà nghi nhiễm ORT tại 06 tỉnh gồm: Thái Nguyên, Hà Nội, Thái Bình, Hưng Yên, Vĩnh Phúc và Hải phòng thì chỉ có duy nhất Thành phố Hải Phòng là địa phương không phát hiện thấy sự có mặt của vi
mặt của ORT. Kết quả này cũng phù hợp so với việc chẩn đoán vi khuẩn bằng phương pháp nuôi cấy và phân lập.
Như vậy, việc chẩn đoán bệnh do vi khuẩn ORT gây bằng phương pháp nuôi cấy và phân lập cho kết quả tương đồng kỹ thuật PCR. Tuy nhiên, chẩn đoán bằng kỹ thuật PCR cho kết quả nhanh hơn (3 - 4 giờ).