Phương pháp thử các đặc tính sinh hố của chủng vi khuẩn phân lập được

Phần 3 Nội dung và phương pháp nghiên cứu

3.5. Phương pháp nghiên cứu

3.5.6. Phương pháp thử các đặc tính sinh hố của chủng vi khuẩn phân lập được

3.5.6. Phương pháp thử các đặc tính sinh hố của chủng vi khuẩn phân lập được được

Phản ứng thử Oxydase: sử dụng thuốc thử của hãng Remel. Tiến hành

trên giấy được tẩm 1% dung dịch Tetrametyl-p Phenylenediamine hydrochloride. Dùng que cấy vô trùng lấy khuẩn lạc từ môi trường thạch máu phết đều lên trên mặt giấy thấm thuốc thử. Trong vòng 10 giây đầu, nếu môi trường chuyển sang màu tím than, phản ứng cho kết quả dương tính. ORT cho hản ứng Oxidase dương tính.

Phản ứng Catalase: dùng que cấy vô trùng lấy khuẩn lạc từ môi trường

thạch đặt lên một điểm trên phiến kính sạch, nhỏ một giọt dung dịch oxy già (H2O2 3%) lên, trộn đều, nếu có hiện tượng sủi bọt là phản ứng dương tính. ORT có phản ứng Catalase âm tính.

Phản ứng Indol: dùng để phát hiện vi khuẩn có enzyme trytophanasa

chuyển hoá trypton thành indol. Cấy vi khuẩn vào nước trypton và ủ ở 37oC/ 24 giờ. Nhỏ vài giọt thuốc thử Kovac’s, phản ứng dương tính có vịng màu hồng cánh sen nổi lên trên (do indol kết hợp với p-dimethylaminnobelzal dehyde có trong thuốc thử Kovac’s), nếu khơng có màu hoặc màu vàng là phản ứng âm tính. ORT có phản ứng indol âm tính.

Phản ứng KOH: dùng que cấy lấy khuẩn lạc trên môi trường thạch máu phết

lên phiến kính sạch đã có sẵn một giọt dung dịch KOH 10% đánh tan rồi nhấc que cấy lên. Nếu khuẩn lạc vón cục là phản ứng dương tính. Nếu khuẩn lạc khơng vón cục, tan ra và khơng tạo nhớt là phản ứng âm tính. ORT có phản ứng KOH âm tính.

Phản ứng phân giải Ure: phát hiện enzyme urease phân giải ure thành

ammonia và cacbodioxide. Amonia sinh ra làm kiềm hóa mơi trường. Cấy vi khuẩn vào canh thang ure, ủ 37OC/ 24 – 48 giờ. Phản ứng dương tính: mơi trường có mầu tím đỏ; phản ứng âm tính: khơng màu. ORT có phản ứng Ure dương tính.