Phần 4 Kết quả và thảo luận
4.3. Kết quả xác định một số đặc tính sinh học của chủng PEDV phân lập
4.3.3. Đường cong sinh trưởng củ a2 chủng virus PED
Trong nghiên cứu này, ở đời cấy chuyển thứ 5 cả hai chủng PEDV phân lập
cho hiệu giá cao nhất lần lượt là 105.88 TCID50/ml và 106.25 TCID50/ml tương ứng
với PEDV/HY3/2015, PEDV/TN8/2016 được sử dụng để xác định đường cong sinh trưởng (hình 4.6).
Hình 4.6. Đường biểu diễn tốc độ sinh trưởng của hai chủng virus PED phân lập theo thời gian
Kết quả hình 4.6 cho thấy, hiệu giá virus (trong tế bào và ngoài môi trường) tăng dần theo thời gian. Có thể nhận thấy tốc độ sinh trưởng của hai chủng virus phân lập tương đối giống nhau và có thể chia làm 3 giai đoạn: giai đoạn thích nghi (0 - 12 giờ sau gây nhiễm), giai đoạn lũy thừa (12- 48 giờ sau gây nhiễm), giai đoạn suy vong (sau 48 giờ gây nhiễm). Từ kết quả xây dựng đường cong sinh trưởng của hai chủng virus phân lập cho thấy, hiệu giá virus thu được cao nhất trong khoảng 36 - 48 giờ sau gây nhiễm. Cụ thể chủng PEDV/TN8/2016 đạt
106.5 TCID50/ml ở 36 giờ sau gây nhiễm, chủng PEDV/HY3/2015 đạt 106.0
TCID50/ml sau 48 giờ nhiễm virus. Kết quả nghiên cứu quy luật sinh trưởng của
2 chủng PEDV phân lập tương tự như kết quả nghiên cứu của Hofmann and
giờ gây nhiễm tế bào. Nghiên cứu này cũng chỉ ra rằng trong khoảng 36- 48 giờ là thời điểm tốt nhất để thu hoạch virus sau gây nhiễm cho hiệu gía cao.
Ngoài ra, trong quá trình theo dõi thí nghiệm tại mỗi thời điểm trước thu hoạch chai gây nhiễm, bệnh tích tế bào đều được quan sát và ghi nhận đối với từng chủng virus. Kết quả theo dõi diễn biến bệnh tích tế bào (CPE) được tổng hợp như hình 4.7. 6h ĐCTB 72h 36h 48h 60h 24h 12h
Hình 4.7. Bệnh tích tế bào theo thời gian
Từ hình 4.7 cho thấy thấy rằng bệnh tích tế bào tiến triển nhanh, có thể quan sát được ở 12h sau gây nhiễm đối với cả hai chủng virus phân lập. Sau đó bệnh tích tế bào ngày tiến triển nhanh, lan rộng hơn ở các giờ nuôi cấy tiếp theo. Từ 36-48 giờ sau gây nhiễm bệnh tích tế bào đạt khoảng 80-95%, đến 60 giờ 100% tế bào bị phá hủy. Đến 72 giờ các tế bào bong khỏi đáy chai nuôi, không theo dõi ghi nhận được CPE thêm nữa. Trong khi đó, chai đối chứng tế bào phát triển bình thường. Đặc tính gây bệnh nhanh và mạnh của virus PED trên tế bào
có tương quan với độc lực của virus khi gây bệnh trên động vật hay không điều này cần được thử nghiệm trên bản động vật.