STT Địa Điểm Đợt thu
mẫu (lần) Số cá (con) TLN (%) 1 Từ Sơn – Bắc Ninh 2 60 0 2 Đình Bảng – Bắc Ninh 2 60 0
3 Gia Lâm – Hà Nội 2 80 0
4 Phú Tảo – Hải Dương 2 100 0
Trong quá trình tiến hành thí nghiệm chúng tơi đã thu 8 đợt (300 mẫu) và ở 4 địa điểm khác nhau. Qua kiểm tra, xét nghiệm chưa tìm thấy ký sinh trùng nói chung và Thích bào tử trùng Myxobolus sp. nói riêng, do sản xuất giống nhân tạo, trong quá trình ấp trứng nguồn nước đã được xử lý đảm bảo vệ sinh tốt nên cá bột khơng bị nhiễm Thích bào tử trùng.
Tác giả Trần Hải Thanh, 2014 đã nghiên cứu trên cá bột tại Hà Nội và vùng phụ cận cũng khơng thấy lồi Bào tử sợi nào trên cá bột. Báo cáo kết quả nghiên cứu của tác giả Nguyễn Thị Hồng Chiên, 2011 đã nghiên cứu tại Yên Thường , Gia Lâm , Hà Nội và trại nuôi cá của trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội cũng cho kết quả giai đoạn cá này chưa nhiễm Thích bào tử trùng
Myxobolus sp..
4.1.2 Kết quả kiểm tra trên cá chép hƣơng
Sau 8 lần kiểm tra trên cá chép bột khơng phát hiện có thích bào tử trùng ký sinh, chúng tôi tiếp tục chuyển sang kiểm tra ở các giai đoạn khác trong vòng đời. Cá chép hương từ 2 tuần tuổi kích thước vẫn cịn nhỏ, phương pháp ép mô vẫn là phù hợp nhất để kiểm tra ký sinh trùng. Cịn đối với cá 3-4 tuần tuổi, kích thước lớn hơn cần phải chia cơ thể ra làm nhiều phần để kiểm tra. 450 mẫu cá được thu thập trên 16 ao tại các trại cá ở trên địa bàn tỉnh thành phố Hà Nội, Bắc Ninh, Hải Dương. Sau đây là kết quả thu được.
Bảng 4.2: Kết quả kiểm tra trên cá chép hƣơng
Stt Giai đoạn (tuần tuổi) Số ao kiểm tra Số cá kiểm tra Số ao nhiễm Số cá nhiễm Tỷ lệ ao nhiễm (%) Tỷ lệ cá nhiễm TB (%) 1 1-2 8 250 0 0 0 0 2 3-4 8 200 2 38 25 19 Tổng 16 450 2 38 12,5 4,2
Cá chép hương từ dưới 2 tuần tuổi vẫn còn khá nhỏ, vậy nên chúng tôi không tiến hành đo kích thước. Ở giai đoạn này, các trại giống mới đưa cá ra ao, mật độ cá dày nên tiến hành thu mẫu bằng vợt. Các ao ương cá chép hương đều sử dụng ao đất, nguồn nước lấy vào ao ương chủ yếu lấy từ các nguồn nước thủy nơng và đều có nhiễm nguồn nước thải chăn ni. Thậm chí chất thải chăn ni cịn được
đưa trực tiếp vào ao ương thơng qua lượng phân bón để gây màu nước ao. Kết quả kiểm tra cho thấy, khơng tìm thấy thích bào tử trùng trên cá hương giai đoạn từ 1-2 tuần tuổi, tỷ lệ nhiễm 0%. Nguyên nhân có thể do cơng tác chuẩn bị ao tốt, con giống khỏe mạnh, sạch bệnh, quản lý đươc môi trường nước giúp cho con vật được cách ly với mầm bệnh. Tuy nhiên việc nước quá sạch, nguồn thức ăn tự nhiên còn nghèo dẫn đến tốc độ tăng trưởng của cá con rất chậm.
Cá chép hương giai đoạn từ 3-4 tuần tuổi bắt đầu thấy sự xuất hiện của Thích bào tử trùng (Myxobolus sp.). Trong số 16 ao lấy mẫu cá kiểm tra có 2 ao ở Bắc Ninh và Hải Dương thấy sự xuất hiện Myxobolus sp., tỷ lệ cá nhiễm là
38 con trong tổng số 200 con kiểm tra chiếm tỷ lệ 19%, khơng tìm thấy cá chép nhiễm Thích bào tử trùng Myxobolus sp. ở những ao ương cá hương tại Hà Nội. Điều này cũng trùng với kết quả của tác giả Nguyễn Thị Hồng Chiên, 2011 đã nghiên cứu tại Yên Thường, Gia Lâm, Hà Nội và trại nuôi cá của trường Đại học Nông nghiệp Hà Nội; và tác giả Trần Hải Thanh 2014 nghiên cứu ký sinh trùng bào tử sợi (Myxosporea). trên cá chép (Cyprinus carpio) ở Hà nội và vùng phụ cận cho kết quả các ao ương cá hương tại Hà Nội khơng nhiễm Thích bào tử trùng.
4.1.3. Kết quả kiểm tra trên cá chép giống
Sau khi ương cá chép hương khoảng 1 tháng cũng là thời điểm giao mùa, khi đó cá hương đạt kích cỡ 0,5-1g/con (1000-2000 con/kg) cá được các hộ dân chuyển từ các ao ương lên cá giống cấp 1 (cá giống nhỏ) rồi ương lên cá giống cấp 2,3 (cá giống lớn). Chúng tôi tiến hành thu thập và kiểm tra cá chép giống, và đây cũng là đối tượng chính của nghiên cứu. Kích cỡ của cá giống là lớn hơn nhiều so với cá hương và cá bột nên kiểm tra theo từng bộ phận của cơ thể cá.
Bảng 4.3: TLN thích bào tử trùng Myxobolus sp. trên cá giống
Loại cá giống Số ao kiểm tra (ao) Số ao nhiễm (ao) Tỷ lệ ao nhiễm (%) Số cá kiểm tra Số cá nhiễm (con) Tỷ lệ cá nhiễm (%) Cấp 1 6 2 33.3 180 40 22,2 Cấp 2 5 2 40 150 55 36,7 Cấp 3 4 0 0 124 0 0 Tổng 15 4 26,7 454 95 20,9±5,3
Nhìn vào bảng trên có thể thấy cá giống cấp 1 và cá giống cấp 2 tỷ lệ nhiễm thích bào tử trùng Myxobolus sp. khá cao. Đối với cá giống cấp 1, trên 6
ao kiểm tra, có 2 ao nhiễm, chiếm tỷ lệ 33,3%. Tỷ lệ cá giống cấp 1 nhiễm ký sinh trùng khá cao 40 con nhiễm trên tổng số 180 con kiểm tra chiếm 22,2%. Đối với cá giống cấp 2, trên 5 ao kiểm tra, có 2 ao nhiễm, chiếm tỷ lệ 40%. Tỷ lệ cá giống cấp 2 nhiễm ký sinh trùng là 55 con nhiễm trên tổng số 150 con kiểm tra chiếm 36,7%. Với những con số nêu trên cho thấy cá giống cấp 1 và cấp 2 là đối tượng rất dễ mắc bệnh Myxobolosis sau khi bị phơi nhiễm.
Triệu chứng cá nhiễm Thích bào tử trùng Myxobolus sp.: Cá kém ăn, bơi lội khơng bình thường, hay quẫy mạnh, cong đuôi, nổi lờ đờ trên mặt nước, ngáp nhiều. Cùng là một loại KST ký sinh trên cá giống nhưng lại có nhiều dạng biểu hiện khác nhau, các cơ quan đích khác nhau. Tiến hành kiểm tra trên cá xác định nhiễm Thích bào tử trùng về cơ quan kí sinh của Thích bào tử trùng
Bảng 4.4: Thích bào tử trùng ký sinh trên các cơ quan khác nhau của cá giống khác nhau của cá giống
Loại cá giống Số cá nhiễm (con) Cơ quan đích Da (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Mang (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Vây (con) Tỷ lệ nhiễm (%) Ruột (%) Cấp 1 40 15 37,5 24 60 38 95 0 Cấp 2 55 16 29,09 55 100 0 0 0 Tổng 95 31 32,63±2,5 3 79 83,15±4,3 1 38 40±3,1
Đối với cá hương và cá giống khơng phát hiện thấy Thích bào tử trùng kí sinh trong ruột, chủ yếu kí sinh trên da, mang, vây cá. Qua quan sát cá nhiễm thích bào tử trùng trên vây thấy xuất hiện bọc màu vàng nhỏ như trứng cá, cá bị nhiễm bơi lội chậm.
Có thể dễ dàng nhận thấy mang là cơ quan đích yêu thích nhất của KST đơn bào 2 cực nang Myxobolus sp. Kiểm tra 95 cá nhiễm Myxobolus sp., có 79 cá thể nhiễm trên mang chiếm tỷ lệ 83,15±4,31. Thích bào tử trùng gây bệnh trên cá ký sinh ở mang có triệu chứng điển hình nhất là kênh mang, xương nắp mang không khép lại được do các bào nang trắng sữa bám dày đặc trên cung mang. thường xuất hiện trên cá giống cỡ từ 10-30 con/kg. Một dạng khác cũng rất hay gặp là bào nang của bào tử sợi được hình thành và ký sinh trên vây, đi của cá giống, có khi là trên da làm kênh vảy cá, dạng này cá nhỏ cỡ 50-200con/kg thường mắc phải nhất.
Riêng cá giống cấp 1 thì vây lại là cơ quan các bào nang ký sinh nhiều nhất trong 95 cá kiểm tra có 38 cá thể nhiễm chiếm tỷ lệ 40±3,1%. Thích bào tử trùng ký sinh hình thành lên bào nang hình bầu dục màu trắng sữa hoặc xám đen, kích thước từ 1-5 mm, khi nghiền các bào nang này ra làm tiêu bản nhuộm tím Violet soi trên vật kinh 4x10 thấy mật độ thích bào tử trùng là rất dày, 1 vi trường như vậy có thể đếm được gần 3000 bào tử bắt màu thuốc nhuộm.
Trong quá trình kiểm tra cơ quan nhiễm Thích bào tử trùng chúng tơi thấy, trên một cá thể kiểm tra cịn có thể nhiễm trên da và vây cùng một lúc.
Ngoài ra trên mang cá cũng có phát hiện KST nhóm này và một số loài sán, trùng bánh xe,… Dạng ký sinh trên da là phức tạp nhất, khó phát hiện nhất, khi cá đang bơi lội bình thường có thể thấy một số vảy bị kênh lên do các bào nang bào tử ký sinh trên da gây ra, như vậy khi ra khỏi nước thì rất khó phát hiện
trường hợp này.
Đối với cá giống cấp 2, các thích bào tử trùng tập trung ở mang, một số trường hợp ở da. Khi ký sinh trên mang, chúng hình thành bào nang màu trắng sữa bám trên các cung mang khiến nắp mang không khép lại được, cá hô hấp kém dần gây tử ương. Đây là một dạng đặc biệt nguy hiểm gây chết hàng loạt cá giống nhỡ mà việc chữa trị rất khó khăn, ảnh hưởng đến cả q trình ni.
Hình 4.2: Hình ảnh cá chép giống bị bệnh do Thích bào tử trùng ký sinh trên da, vây, mang
A, B: Thích bào tử ký sinh trùng trên da
C,D,E,F: Thích bào tử ký sinh trùng trên mang
A B
C D
A B
Hình 4.3: Bào nang thích bào tử trùng Myxobolus sp. ký sinh trên cá chép
A- Bào nang màu đen bám trên đi cá
B- Hình dạng bào nang soi trên kính hiển vi độ phóng đại 40
4.1.4 Kết quả kiểm tra trên cá chép thƣơng phẩm
Trên các ao nuôi cá thương phẩm trong mùa hè, khi kiểm tra chúng tôi phát hiện thấy cá chép chết rải rác có hiện tượng trướng bụng. Tiến hành thu mẫu trên 12 ao nghi nhiễm thích bào tử trùng với 120 mẫu cá để kiểm tra, kết quả cho thấy thích bào tử trùng trên ruột tỷ lệ nhiễm trong các ao này rất cao, lên đến 60% số cá kiểm tra từ nhiễm nhẹ đến nhiễm nặng.
Như vậy đối với cá lớn, thường nhiễm ở ruột, gây trướng bụng và nổi u hạt trắng như đậu phụ. Bệnh thường xảy ra về mùa hè làm cá chết rải rác.
4.1.5. Kết quả kiểm tra tổng quát Thích bào tử trùng (Myxobolus sp.) trên cá
Mơi trường là 1 trong những yếu tố hình thành dịch bệnh. Trong suốt quá trình thực hiện đề tài, chúng tơi luôn đánh giá môi trường là nhân tố quyết định sự bùng phát dịch bệnh trên ĐVTS. Từ giai đoạn cá giống, các hộ dân có thể ni ghép cá chép giống với các loài cá khác (ghép với cá mè trắng, cá mè hoa, cá trắm cỏ, cá trôi, cá rô phi...) hoặc nuôi đơn cá chép trong ao . Ở giai đoạn cá giống các ao ni có thể kết hợp với thả vịt trên mặt nước, hoặc nuôi cạnh chuồng lợn hoặc dùng nước xả bể biogas chảy vào các ao ni với mục đích kích thích sự phát triển của sinh vật phù du làm tăng nguồn thức ăn tự nhiên cho cá chép giống. Với các mơ hình ni khác nhau, yếu tố mơi trường trong đó chắc chắn sẽ có những sự sai khác trong q trình hình thành dịch bệnh. Bảng 4.5 dưới đây sẽ thể hiện khả năng nhiễm bệnh ở các mơ hình khác nhau.
Bảng 4.5: Kết quả kiểm tra Thích bào tử trùng trên cá chép trong các hệ thống nuôi Hệ thống nuôi Số cá nhiễm TBTT/Tổng số cá kiểm tra (con) Tỉ lệ nhiễm TBTT (%) Tổng số bào nang kí sinh CĐN TB
(bào nang/cá) Ghi chú
Cá - lúa 0/160 0 0 Cá - vịt 142/353 40,23 3124 22,34 ± 2,63 TBX Cá - lợn 52/240 21,67 988 19,21 ± 2,58 Sán Nuôi ao công nghiệp 64/350 18,28 696 10,96 ± 2,43 KST Nuôi cá lồng 0/121 0 - Tổng 243/1.324
Qua kết quả kiểm tra trên 1.324 mẫu cá chép, có 243 con cá có nhiễm Thích bào tử trùng chiếm tỷ lệ 18,35%. Trong đó, tỷ lệ nhiễm Thích bào tử trùng cao ở hệ thống nuôi cá - vịt; cá - lợn với tỷ lệ lần lượt là 40,23% và 21,76%; CĐN Thích bào tử trùng cao nhất ở mơ hình cá-vịt là 22,34±2,63, tiếp đến là CĐN Thích bào tử trùng ở mơ hình cá ni kết hợp với ni lợn có thải phân trực
tiếp xuống các ao cá để gây màu tạo thức ăn tự nhiên (19,21±2,58). Thực sự các mơ hình cá-vịt, cá-lợn đang là những yếu tố nguy cơ hàng đầu dẫn đến hình thành bệnh do KST gây ra, không chỉ nhiễm các giống Myxobolus sp. mà còn các loại sán, trùng bánh xe gây ảnh hưởng đến suốt q trình ni. Mơ hình cá lúa dù khơng tạo diều kiện thích hợp cho các giống vi bào tử sợi ký sinh nhưng cũng thấy sự xuất hiện của sán. Các ao ni cơng nghiệp đang là mơ hình khá phổ biến hiện nay, cũng là đối tượng chính của đề tài có TLN lên đến 18,28%. Mật độ nuôi dày, môi trường nước không được quản lý chặt chẽ, chất lượng con giống đầu vào kém là nguyên nhân dẫn đến nguy cơ bùng phát dịch bệnh trong ao ni cơng nghiệp.
Cùng với mơ hình ni, thời tiết thay đổi cũng là yếu tố ảnh hưởng đến môi trường gây ra dịch bệnh trên ĐVTS.
Bảng 4.6: Kết quả kiểm tra Thích bào tử trùng trên cá chép theo mùa vụ
Hệ thống nuôi
Số cá nhiễm TBTT/ số cá
kiểm tra (con) Tỷ lệ cá nhiễm TBTT (%) Xuân – hè Thu - Đông Xuân – hè Thu - Đông
Cá - lúa 0/80 0/80 0 0
Cá - vịt 102/197 30/156 51,78 19,23
Cá - lợn 46/132 6/108 34,85 5,56
Nuôi ao công nghiệp 44/102 20/108 43,14 18,52
Nuôi cá lồng 0/105 0/116 0 0
Tổng số & TLN (%) 192/676 56/618 28,04±3,52 9,06±2,04
Kết quả kiểm tra Thích bào tử trùng Myxobolus sp. ở cá chép theo mùa
chúng tôi nhận thấy TLN Myxobolus sp. giữa 2 mùa (TLN Myxobolus sp. trong
vụ xuân hè là 28,04±3,52% và vụ Thu đơng là 9,06±2,04%) là có sự sai khác lớn và có ý nghĩa (p<0,05). Trong vụ Xn hè mơ hình ni Cá-vịt cao nhất lên đến 51,78%, đến cá nuôi ao cơng nghiệp 43,14%; mơ hình cá-lợn là 34,85% ; các hệ thống khác khơng kiểm tra thấy Thích bào tử trùng.
Tỷ lệ nhiễm Thích bào tử trùng trong vụ xn hè và vụ thu đơng có tỷ lệ chênh lệch rất lớn, cao nhất là cá- vịt 51,78 -19,23. Thời tiết giao mùa xuân hè
với mưa đầu mùa là cơ hội cho các loại bệnh KST và nấm phát triển. 28,04±3,52% số cá kiểm tra nhiễm Myxobolus sp. cho thấy khả năng bùng phát dịch bệnh là rất cao, cá nhiễm KST và nấm, có khi là bội nhiễm nhiều loại gây ảnh hưởng đến con giống và cả q trình ni.
Những cá thể nhiễm bệnh với mức độ nặng nhẹ có thể phụ thuộc vào nhiều yếu tố, CĐN là một trong những yếu tố thể hiện mức độ của bệnh dịch.
Bảng 4.7: Cƣờng độ nhiễm theo cỡ cá. STT Loại cá Tổng số mẫu KT (con) Số bào nang ký sinh CĐN (bào nang/con) Cá hương 3-4 tuần tuổi 38 426 11,34 ± 2,45 3 Giống cấp 1 40 768 19.37 ± 2.63 4 Giống cấp 2 55 456 8,46 ± 1,58 6 Thương phẩm 72 432 6.44 ± 2.56 Tổng 205
CĐN trên cá giống cấp 1 cao nhất, gần 20 bào nang (19.37 ± 2.63) trên 1 cá thể cá chỉ nặng gần 5g, chúng không gây chết cá nhưng sống bám ký sinh gây ngứa ngáy, bơi lội mất thăng bằng, hút chất dinh dưỡng của cá làm giảm tốc độ tăng trưởng, tăng nguy cơ bội nhiễm các loại bệnh khác.
Với cá lớn, CĐN chỉ hơn 6 bào nang/ cá thể (6.44 ± 2.56)nhưng lại vô cùng nguy hiểm, dạng ký sinh này có thể gây chết hàng loạt khi làm hỏng các nội quan bên trong cơ thể, tăng khả năng bội nhiễm các tác nhân gây bệnh khác
4.2. KẾT QUẢ THỬ NGHIỆM THUỐC
Bào tử sợi không chỉ ký sinh ở các cơ quan bên ngoài mà còn ký sinh nhiều cơ quan bên trong; mặt khác trùng bào tử sợi có vỏ kitin bảo vệ nên rất khó