Khi chiếu một chùm tia có bước sóng nằm trong vùng hồng ngoại qua chất phân tích, một phần năng lượng bị hấp thụ làm giảm cường độ tia tới. Sự hấp thụ này tuân theo định luật Lambert-Beer [8]:
A = lgIo/I = .l.C (2.3)
Trong đó: A là mật độ quang (Abs); Io, I là cường độ ánh sáng trước và
sau khi ra khỏi chất phân tích; l là chiều dày cuvet (cm); C là nồng độ chất phân tích (mol/L) và là hệ số hấp thụ phân tử.
Phân tử hấp thụ năng lượng sẽ thực hiện dao động (các hạt nhân nguyên tử dao động xung quanh vị trí cân bằng) làm giảm độ dài liên kết giữa các nguyên tử và góc hoá trị tăng giảm tuần hoàn, chỉ có những dao động làm biến đổi momen lưỡng cực điện của liên kết mới xuất hiện tín hiệu hồng ngoại. Người ta phân biệt 2 loại dao động của phân tử là dao động hoá trị và dao động biến dạng. Loại dao động hoá trị chỉ thay đổi độ dài liên kết mà không thay đổi góc liên kết. Loại dao động biến dạng chỉ thay đổi góc liên kết mà không thay đổi độ dài liên kết. Đường cong biểu diễn sự phụ thuộc độ truyền quang vào bước sóng là phổ hấp thụ hồng ngoại. Mỗi nhóm chức hoặc liên kết có một tần số (bước sóng) đặc trưng bằng các pic (đỉnh hấp thụ cực
đại) trên phổ hồng ngoại. Do có độ nhạy cao, cho nên phổ FT-IR được sử dụng rộng rãi để phân tích các nhóm chức, liên kết trong các hợp chất, …
Thực nghiệm: mẫu được đo tại phòng máy quang phổ, Khoa Khoa Học
Tự Nhiên, trường Đại học Quy Nhơn.