Hình 3.18. Kết quả DLS hệ nano liposome chứa cao rong nâu với tỉ lệ
Liposome:cao rong nâu 6:1. Công
thức
Tỉ lệ
Liposome:cao rong nâu
Kích thước hạt trung bình (nm) PDI Thế Zeta (mV) CT1 6:1 101,7 0,293 -29,1 CT3 5:1 121,9 0,374 -22,2 CT2 4:1 163,9 0,275 -13,7 CT4 3:1 969,1 1,032 -10,3
Nhận xét: Với kết quả đo DLS cho thấy tỉ lệ liposome:cao rong nâu 6:1 cho kích
thước hạt là 101,7 nm với PDI 0,293 và thế Zeta -29,1 mV phù hợp với điều kiện sử dụng như một chất mang thuốc kháng ung thư với kích thước nano.
Kết luận: Nghiên cứu sử dụng tỷ lệ giữa hệ liposome và cao rong nâu là 6:1 để
tiến hành bào chế hệ nano liposome chứa cao rong nâu
▪ Quy trình tổng hợp hệ nano liposome chứa cao rong nâu quy mơ phịng thí nghiệm
Hình 3.19. Quy trình tổng hợp hệ nano liposome chứa cao rong nâu quy mơ
phịng thí nghiệm.
Cơ quay áp suất loại dung môi hữu cơ 45oC trong 4 giờ
Hòa tan trong CHCl3:MeOH
(2:1, v/v) Lecithin:vitamin E
Cơ quay tạo màng lipid Hydrat hóa tạo
liposome Siêu âm Đồng hóa Đơng khơ Nước cất chứa Tween 80 Cao rong nâu
Maltodextrin Khuấy 400 rpm ở 60oC trong 2 giờ Thời gian 30 phút Tần số 37 kHz Số chu kỳ: 10 Áp suất 800 bar Khuấy 400 rpm trong 10 phút Bảo quản 2- 8 oC Loại thuốc tự do Ly tâm (5000 rpm, 15 phút, 25 oC)
▪ Mơ tả quy trình:
- Cân chính xác 540 mg lecithin; 60 mg vitamin E cho vào bình cầu 100 mL; hịa tan các thành phần vào 5 mL dung mơi CHCl3:MeOH (2:1, v/v).
- Khuấy 400 vòng/ phút trong 10 phút cho hỗn hợp đồng nhất.
- Tiến hành cô quay ở nhiệt độ 45 oC trong 4 giờ, áp suất chân không được điều chỉnh để loại dung môi bằng cách cho dung môi bay hơi từ từ, không quá nhanh tạo màng lipid mỏng và trong suốt bám xung quanh thành bình.
- Khi đã tạo được màng lipid khơ hồn tồn, hỗn hợp được hydrat hóa với 10 mL nước cất chứa 50 mg Tween 80 và 100 mg cao rong nâu ở nhiệt độ 60
oC trong 2 giờ cho đến khi lớp màng lipid mỏng bong ra hết khỏi thành bình.
- Hệ phân tán liposome được làm giảm kích thước hạt bằng phương pháp siêu âm trong 30 phút và đồng hóa 10 chu kỳ dưới áp suất 800 bar.
- Hệ phân tán liposome được ly tâm với tốc độ 5000 vòng/ phút trong 15 phút ở 25 °C. Fucoidan tự do sẽ bị loại ra khỏi hệ chất mang và kết tủa dưới đáy.
- Cân chính xác 1,2 g maltodextrin hịa tan trong 10 mL nước cất và bổ sung vào hệ liposome.
- Sản phẩm được đông khô trong máy đông khô EYELA FDU-1200.
- Sản phẩm được bảo quản ở nhiệt độ 2-8 oC.
▪ Kết quả đánh giá khả năng nang hóa thuốc của liposome
Hiệu suất nang hóa thuốc của liposome được xác định thơng qua việc định lượng thuốc tự do bằng HPLC. Kết quả định lượng thuốc tự do được trình bảy trong Bảng
3.18.