Lần đo Khối lượng Fucoidan tồn phần (µg)
1 48278
2 47829
3 47491
Trung bình 47866
Lần đo Khối lượng Fucoidan tự do (µg)
1 3671
2 3779
3 3591
Trung bình 3680
Kết quả định lượng Fucoidan tồn phần là 47,87 mg và Fucoidan tự do là 3,68 mg. Lượng Fucoidan được nang hóa vào liposome, hiệu suất nang hóa thuốc của liposome như sau:
- Khối lượng Fucoidan được nang hóa vào liposome = 47,87–3,68 = 44,19 (mg)
- Hiệu suất nang hóa thuốc = 44,19
Kết luận: Kết quả cho thấy khả năng mang thuốc và hiệu suất nang hóa thuốc
của hệ liposome khá cao đạt 92,31%.
3.3.7. Tổng hợp hệ nano liposome có gắn tác nhân hướng đích Tween 80-EDA-FA chứa cao cần tây quy mơ phịng thí nghiệm chứa cao cần tây quy mơ phịng thí nghiệm
▪ Kết quả khảo sát lượng tác nhân hướng đích Tween 80-EDA-FA
Bảng 3.25. Kết quả khảo sát lượng tác nhân hướng đích Tween 80-EDA-FA
Cơng thức Tween 80- EDA-FA (%) Kích thước hạt trung bình (nm) PDI Thế Zeta (mV) CT1 10 146,6 0,224 -19,9 CT2 15 314,8 0,577 -13,7 CT3 20 - - -
Hình 3.26. Kết quả DLS hệ nano liposome có gắn 10% tác nhân hướng đích
Tween 80-EDA-FA chứa cao cần tây.
Nhận xét: Kết quả đo DLS cho thấy liposome có gắn 10% tác nhân hướng đích
Tween 80-EDA-FA cho kích thước hạt là 146,6 nm với PDI 0,224 và thế Zeta -19,9 mV phù hợp sử dụng làm chất mang thuốc kháng ung thư kích thước nano.
Kết luận: Nghiên cứu sử dụng lượng tác nhân hướng đích Tween 80-EDA-FA
là 10% để tiến hành bào chế hệ nano liposome có gắn tác nhân hướng đích Tween 80- EDA-FA chứa cao cần tây.
▪ Tổng hợp hệ nano liposome gắn tác nhân hướng đích Tween 80-EDA- FA chứa cao cần tây
Hình 3.27. Quy trình tạo hệ nano liposome gắn tác nhân hướng đích Tween 80-
EDA-FA chứa cao cần tây.
Cơ quay áp suất loại dung môi hữu cơ 45oC trong 4 giờ
Hòa tan trong CHCl3:MeOH
(2:1, v/v) Lecithin:vitamin E
Cơ quay tạo màng lipid
Hydrat hóa tạo liposome Siêu âm Đồng hóa Đơng khơ Nước cất chứa Tween 80, Tween 80-EDA- FA Maltodextrin Cao cần tây Khuấy 400 rpm ở 60oC trong 2 giờ Thời gian 30 phút Tần số 37 kHz Số chu kỳ: 10 Áp suất 800 bar Ly tâm (5000 rpm, 15 phút, 25 oC) Khuấy 400 rpm trong 10 phút Bảo quản 2- 8 oC Ly tâm
▪ Mơ tả quy trình:
- Cân chính xác 540 mg lecithin; 60 mg vitamin E và 150 mg cao cần tây cho vào bình cầu 100 mL; hòa tan các thành phần vào 5 mL dung môi CHCl3:MeOH (2:1, v/v).
- Khuấy 400 vòng/ phút trong 10 phút cho hỗn hợp đồng nhất.
- Tiến hành cô quay ở nhiệt độ 45 oC trong 4 giờ, áp suất chân không được điều chỉnh để loại dung môi bằng cách cho dung môi bay hơi từ từ, không quá nhanh tạo màng lipid mỏng và trong suốt bám xung quanh thành bình.
- Khi đã tạo được màng lipid khơ hồn tồn, hỗn hợp được hydrat hóa với 10 mL nước cất chứa 50 mg Tween 80 và 60 mg Tween 80-EDA-FA ở nhiệt độ 60 oC trong 2 giờ cho đến khi lớp màng lipid mỏng bong ra hết khỏi thành bình.
- Hệ phân tán liposome được làm giảm kích thước hạt bằng phương pháp siêu âm trong 30 phút và đồng hóa 10 chu kỳ dưới áp suất 800 bar.
- Hệ phân tán liposome tiếp tục được ly tâm với tốc độ 5000 vòng/ phút trong thời gian 15 phút ở 25 °C. apigenin tự do sẽ bị loại ra khỏi hệ chất mang và kết tủa dưới đáy.
- Cân chính xác 1,2 g maltodextrin hịa tan trong 10 mL nước cất và bổ sung vào hệ liposome.
- Sản phẩm được đông khô trong máy đông khô EYELA FDU-1200.
- Sản phẩm được bảo quản ở nhiệt độ 2-8 oC.
▪ Kết quả đánh giá khả năng nang hóa thuốc của liposome
Kết quả định lượng thuốc tự do được trình bảy trong Bảng 3.24.