Chương III : KẾT QUẢ VÀ BIỆN LUẬN
3.3. NGHIÊN CỨU TỔNG HỢP HỆ NANO VỚI CÁC CAO DƯỢC LIỆ U
3.3.4. Tổng hợp hệ nano liposome chứa cao cần tây với hoạt chất apigenin quy
phịng thí nghiệm
a) Kết quả khảo sát tỷ lệ liposome:cao cần tây
Bảng 3.19. Kết quả khảo sát tỷ lệ liposome:cao cần tây
Công thức Tỉ lệ Liposome:cao cần tây Kích thước trung bình (nm) PDI Thế Zeta (mV) CT1 6:1 72,6 1,091 -14,0 CT2 5:1 73,1 0,616 -16,6 CT3 4:1 123,3 0,347 -23,7 CT4 3:1 946,2 1,036 -18,2
Hình 3.20. Kết quả DLS hệ nano liposome chứa cao cần tây
Nhận xét: Kết quả DLS cho thấy công thức 3 cho kích thước hạt là 123,3 nm với
PDI 0,347 và thế Zeta -23,7 mV phù hợp với điều kiện sử dụng như một chất mang thuốc kháng ung thư với kích thước nano.
Kết luận: Sử dụng tỷ lệ liposome:cao cần tây là 4:1 để tiến hành bào chế hệ nano
liposome chứa cao cần tây.
▪ Quy trình tổng hợp hệ nano liposome chứa cao cần tây quy mơ phịng thí nghiệm
Hình 3.21. Quy trình tổng hợp hệ nano liposome chứa cao cần tây mơ phịng thí
nghiệm.
Cơ quay áp suất loại dung mơi hữu cơ 45oC trong 4 giờ
Hòa tan trong CHCl3:MeOH
(2:1, v/v) Lecithin:vitamin E
Cô quay tạo màng lipid Hydrat hóa tạo
liposome Siêu âm Đồng hóa Đơng khơ Nước cất chứa Tween 80 Maltodextrin Cao cần tây Khuấy 400 rpm ở 60oC trong 2 giờ Thời gian 30 phút Tần số 37 kHz Số chu kỳ: 10 Áp suất 800 bar Khuấy 400 rpm trong 10 phút Bảo quản 2- 8 oC
Loại thuốc tự do Ly tâm (5000 rpm, 15 phút, 25 oC)
▪ Mơ tả quy trình:
- Cân chính xác 540 mg lecithin; 60 mg vitamin E, 150 mg Cao cần tây cho vào bình cầu 100 mL; hòa tan các thành phần vào 5 mL dung môi CHCl3:MeOH (2:1, v/v).
- Khuấy 400 vòng/ phút trong 10 phút cho hỗn hợp đồng nhất.
- Tiến hành cô quay ở nhiệt độ 45 oC trong 4 giờ, áp suất chân không được điều chỉnh để loại dung môi bằng cách cho dung môi bay hơi từ từ, không quá nhanh tạo màng lipid mỏng và trong suốt bám xung quanh thành bình.
- Khi đã tạo được màng lipid khơ hồn tồn, hỗn hợp được hydrat hóa với 10 mL nước cất chứa 50 mg Tween 80 ở nhiệt độ 60 oC trong 2 giờ cho đến khi lớp màng lipid mỏng bong ra hết khỏi thành bình.
- Hệ phân tán liposome được làm giảm kích thước hạt bằng phương pháp siêu âm trong 30 phút và đồng hóa 10 chu kỳ dưới áp suất 800 bar.
- Hệ phân tán liposome tiếp tục được ly tâm với tốc độ 5000 vòng/ phút trong thời gian 15 phút ở 25 °C. Apigenin sẽ bị loại ra khỏi hệ chất mang và kết tủa dưới đáy.
- Cân chính xác 1,2 g maltodextrin hịa tan trong 10 mL nước cất và bổ sung vào hệ liposome.
- Sản phẩm được đông khô trong máy đông khô EYELA FDU-1200.
- Sản phẩm được bảo quản ở nhiệt độ 2-8 oC.
▪ Kết quả đánh giá khả năng nang hóa thuốc của liposome
Hiệu suất nang hóa thuốc của liposome được xác định thơng qua việc định lượng thuốc tự do bằng HPLC. Kết quả định lượng thuốc tự do được trình bảy trong Bảng
3.19.
Bảng 3.20. Khối lượng apigenin toàn phần và khối lượng apigenin tự do Lần đo Khối lượng apigenin toàn phần Lần đo Khối lượng apigenin tồn phần
(µg)
1 23721
2 23648
3 24137
Trung bình 23835
Lần đo Khối lượng apigenin tự do (µg)
1 1629
2 1643
3 1635
Kết quả định lượng apigenin toàn phần là 45,85 mg và apigenin khơng được nang hóa vào liposome là 3,07 mg. Lượng apigenin được nang hóa vào liposome, hiệu suất nang hóa thuốc của liposome như sau:
- Khối lượng apigenin được nang hóa vào liposome = 48,85–3,07 = 42,78 (mg)
- Hiệu suất nang hóa thuốc = 42,78
45,85 × 100 = 93,30 (%).
Kết luận: Kết quả cho thấy khả năng mang thuốc và hiệu suất nang hóa thuốc
của hệ liposome khá cao đạt 93,30%.