Chương 2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.3. Phương pháp nghiên cứu
2.3.1. Đánh giá nguyên liệu đầu vào
2.3.1.1. Khảo sát hàm lượng tro
Nung một chén nung bằng sứ tới khối lượng không đổi, để nguội trong bình hút ẩm và cân khối lượng của chén. Cân chính xác khoảng 1-3 gam nguyên liệu cho vào chén nung. Trải đều nguyên liệu ở đáy chén và đốt thật cẩn thận trên bếp điện cho đến khi nguyên liệu cháy hoàn toàn và chén không còn bốc khói. Đặt chén vào lò nung ở 500 - 600 cho đến khi vô cơ hóa hoàn toàn ( tro không còn màu đen). Dùng cặp sắt lấy lò nung ra, để nguội 30 phút trong bình hút ẩm. Cân và ghi lại lượng cân. Đặt chén đựng tro vào lò nung và tiếp tục nung ở nhiệt độ trên trong 1 giờ nữa. Lấy chén ra, để nguội trong bình hút ẩm khoảng 30 phút và cân.Tiếp tục
làm như vậy đến khi kết quả 2 lần cân liên tiếp giống nhau hoặc chênh nhau không quá 5mg. Hàm lượng tro toàn phần theo phần trăm (X1) tính bằng công thức:
Trong đó:
G (gam): khối lượng chén nung
G1 (gam): Khối lượng chén và mẫu trước khi sấy
G2 (gam): khối lượng chén và mẫu sau khi sấy đến khối lượng không đổi
2.3.1.2. Khảo sát độ ẩm
Cân khoảng 5 g mẫu thử cho vào tủ sấy ở nhiệt độ 103oC. Lấy cốc có chứa nguyên liệu đã sấy để vào bình hút ẩm, mở khóa hoặc hé mở nắp bình hút ẩm cho thông không khí với bên ngoài trong khoảng 1 phút rồi đóng kín bình hút ẩm. Để nguội bình hút ẩm 15 phút. Cân và ghi kết quả. Tiếp tục sấy trong 1giờ, để nguội và cân mẫu như trên cho đến khi kết quả 2 lần cân liên tiếp chênh lệch nhau không quá 1mg. Độ ẩm (W) tính theo phần trăm khối lượng xác định theo công thức:
Trong đó:
mo (gam): khối lượng ban đầu của phần mẫu thử; m1 (gam): khối lượng của phần mẫu thử đã sấy khô
2.3.1.3. Khảo sát hàm lượng đường tổng
Cân 5g mẫu vào bình tam giác cho 100ml nước đun cách thủy 80 trong 15 phút. Lấy ra để nguội.
Thêm 10ml Zn(CH3COOH)2 20%, lắc kỹ để kết tủa protein có trong mẫu, để
lắng. Thêm 10ml dung dịch Na2HPO4 bão hòa, lắc kỹ để loại bỏ 20%
dư. Định mức đến 250ml bằng nước cất. Sau đó mang đi lọc lấy dịch trong. Lấy 5ml dịch lọc cho vào bình tam giác 250ml, thêm 5ml acid HCl (1:1), đun trên bếp cách thủy 15 phút. Sau đó để nguội và cho vài giọt phenolphtalein vào bình tam giác vừa đun, thêm vài giọt NaOH 20% đến màu hồng, cho tiếp HCl (1:1) đến khi về lại màu ban đầu. Tiếp đó cho vào bình 25ml Felling A và 25ml Felling B, lắc nhẹ. Đặt trên bếp điện và đun sôi trong 3 phút, để nguội và thu kết tủa đồng (I) oxit.
Mang đi chuẩn độ lượng Fe (II) hình thành trong bình tam giác bằng dung dịch KMnO4 0.1N cho đến khi dung dịch có màu hồng nhạt bền. Kết quả được tính bằng công thức:
Trong đó:
mg: Lượng glucose tương ứng, g với thể tích KMnO4 tiêu tốn. Vdm: Thể tích bình định mức mẫu (ml).
Vpt: Thể tích lấy mẫu (ml). m: Lượng mẫu cân (g).
2.3.1.4. Khảo sát hàm lượng cafein
Hàm lượng cafein được khảo sát bằng phương pháp HPLC