Phương pháp nhuộm miễn dịch huỳnh quang: Miễn dịch huỳnh quang

Một phần của tài liệu Nghiên cứu nồng độ iga, igg, igm huyết tương ở bệnh nhân hội chứng thận hư nguyên phát (Trang 47 - 48)

(ImmunoFluorescense) là phương pháp nhuộm hóa mô giúp phát hiện ra kháng thể ở trong mô hay trong dịch cơ thể. Nguyên lý chung: Dựa trên phản ứng kháng nguyên kết hợp với kháng thể đặc hiệu. Kháng thể sẽ được gắn với chất màu - Fluorochrome. Sau đó tạo thành phức hợp Kháng nguyên - Kháng thể - Chất màu sẽ phát ra ánh sáng màu (tùy thuộc vào chất màu được gắn) khi được chiếu tia tử ngoại. Màu xanh táo với FITC (Flourescine isothiocyanate), màu đỏ với TRITC (Tetramethylrhodamin isothiocyanate). Nhuộm miễn dịch huỳnh quang phát hiện được sự có mặt của IgA, IgG và IgM trong các vị trí của cầu thận, là phương pháp được sử dụng phổ biến trên thế giới, có giá trị chẩn đoán, và chẩn đoán chính xác cao.

- Nhuộm hóa mô miễn dịch: Hoá mô miễn dịch (immunohistochemistry) là phương pháp được áp dụng phổ biến để xác định các dấu ấn ung thư trên mô. Phương pháp này sử dụng kết hợp hóa chất với phản ứng miễn dịch. Qua đó quan sát sự tồn tại của kháng nguyên (bản chất protein) trong một mô bệnh

phẩm. Thông thường, các kháng nguyên này không được thể hiện dưới dạng một hình thái sinh học có thể quan sát. Hóa mô miễn dịch là phương pháp xác định những kháng nguyên đặc hiệu có trong mô hoặc tế bào, dựa trên sự kết hợp kháng nguyên - kháng thể. Cách làm hóa mô miễn dịch là từ mẫu mô đã được đúc trong khối nến của phương pháp giải phẫu bệnh thường quy, được cắt mỏng và nhuộm theo quy trình như sau: Bộc lộ kháng nguyên - ủ với kháng thể thứ 1 - ủ với kháng thể thứ 2 - nhuộm với chất chỉ thị màu (DAB hoặc AEC) - nhuộm Hematoxylin và đọc trên kính hiển vi thông thường. Với mô thận, nếu không có miễn dịch huỳnh quang có thể sử dụng phương pháp này để xác định sự có mặt của IgA, IgG và IgM tại cầu thận. Tuy nhiên, vì đọc kết quả trên kính hiển vi quang học, nên khó phát hiện trường hợp bệnh nhân có các Ig này với số lượng ít trên thận.

Một phần của tài liệu Nghiên cứu nồng độ iga, igg, igm huyết tương ở bệnh nhân hội chứng thận hư nguyên phát (Trang 47 - 48)

Tải bản đầy đủ (DOC)

(165 trang)
w