KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN
3.2. Thu thập và tuyển chọn các chủng nấm có hoạt tính sinh học cao trong phòng chống rệp sáp hại cà phê
3.2.1. Thu thập, phân lập và giám định các chủng nấm ký sinh trên sâu hại - Nghiên cứu diễn biến về tỷ lệ nấm ký sinh tự nhiên trên đồng ruộng:
Trong năm 2010, cùng với điều tra diễn biến tỷ lệ cành cà phê bị rệp sáp hại, chúng tôi tiến hành điều tra về tỷ lệ rệp sáp bị nấm ký sinh trên đồng ruộng,
kết quả điều tra trên đồng ruộng chúng tôi nhóm chung các loài nấm và tính tỷ lệ chung, vì trên đồng ruộng không thể phân biệt được các loài nấm ký sinh ngay. Kết quả điều tra chúng tôi trình bày trong bảng 3.4.
Bảng 3.4. Tỷ lệ cành cà phê bị nhiễm rệp sáp và tỷ lệ rệp sáp xanh mềm bị nấm ký sinh trên trên đồng ruộng tại Buôn Ma Thuột năm 2010
Ngày điều tra
Vườn kiết thiết cơ bản Vườn kinh doanh Tỷ lệ cành cà
phê nhiễm rệp mềm xanh
(%)
Tỷ lệ rệp sáp xanh mềm bị nấm ký sinh tự
nhiên (%)
Tỷ lệ cành cà phê nhiễm rệp
mềm xanh (%)
Tỷ lệ rệp sáp xanh mềm bị nấm ký sinh tự
nhiên (%)
19/1/2010 42,22 16,47 0,13 6,07
2/2/2010 63,33 15,56 3,33 17,21
3/3/2010 62,22 13,7 6,66 14,33
16/3/2010 78,89 26,47 13,3 24,53
30/3/2010 64,44 22,89 13,3 21,67
13/4/2010 50,07 36,53 6,66 38,56
27/4/2010 42,22 53,68 3,33 55,70
11/5/2010 32,22 55,12 0,17 44,27
25/5/2010 22,22 45,13 1,11 43,47
8/6/2010 17,78 47,34 1,11 48,22
22/6/2010 21,11 41,94 3,33 44,13
6/7/2010 34,44 36,33 6,66 35,37
20/7/2010 47,78 40,31 1,11 41,47
3/8/2010 68,89 52,43 3,33 50,91
17/8/2010 67,78 50,34 6,66 48,94
31/8/2010 57,78 67,22 13,3 64,72
14/9/2010 51,11 57,32 20,3 55,47
28/9/2010 63,33 44,65 13,3 47,12
12/10/2010 55,56 48,93 6,66 49,96
26/10/2010 51,11 25,68 3,33 26,24
9/11/2010 48,89 23,67 1,11 24,17
Kết quả điều tra cho thấy: Nhìn chung tỷ lệ nấm ký sinh trên rệp sáp mềm xanh ngoài đồng ruộng rất cao, có những quần thể rệp bị nhiễm nấm 100%. Diễn biến của nấm ký sinh trong năm trên đồng ruộng cũng khác nhau, chỳng phụ thuộc nhiều vào ẩm độ, đặc biệt qua điều tra theo dừi sau những cơn mưa kéo dài ngày thì tỷ lệ nấm tăng đột biến. Trong điều kiên thời tiết từ tháng 1 đến tháng 3, tỷ lệ nấm ký sinh trên đồng ruộng có thấp hơn, sau đó từ tháng 4 tỷ lệ này tăng lên, tuy nhiên có những đợt giảm xuống do thời tiết nhiều ngày không mưa. Tỷ lệ rệp bị nấm ký sinh đạt cao nhất ngoài tự nhiên là 67,22 vào cuối tháng 8. Điều này cho thấy nấm ký sinh đóng vai trò rất lớn trong việc hạn chế số lượng trong quần thể rệp sáp.
Hình 3.7. Rệp sáp mềm xanh bị nấm ký sinh trên đồng ruộng tại Đắk Lắk, năm 2009
- Điều tra thu thập nguồn rệp sáp bị nấm ký sinh tại các vùng trồng nhiều cà phê bao gồm các huyện: Krông Păk, CưKuin, CưMga, Buôn Hồ và TP. Buôn Ma Thuột – Đắk Lắk, huyện Đắk Mil – Đắk Nông, huyện Chư Sê – Gia Lai. Ngoài ra chúng tôi có điều tra thu thập bổ sung nguồn từ các vùng trồng cà phê khác như huyện Nghĩa Đàn và thị xã Thái Hòa – Nghệ An,
huyện Thuận Châu và TP. Sơn La – Sơn La và một số nguồn trên các ký chủ khác ở các vùng khác nhau. Kết quả thu thập được với số lượng mẫu rất phong phú, sau khi lựa chọn các mẫu điển hình để đem về phòng thí nghiệm tiến hành phân lập, và giám định loài bằng phương pháp hình thái học kết hợp với phân tích DNA. Kết quả phân lập và giám định như sau:
+ Giám định bằng hình thái: Sau khi nuôi cấy các chủng nấm trên môi trường N1 sau 5 ngày, tiến hành lấy các mẫu cành bào tử để soi trên kính hiển vi để giám định loài. Kết quả mô tả hình thái một số chủng như sau:
Chủng MR1:
- Khuẩn lạc:
Màu sắc mặt phải: Xanh rêu kèm ánh vàng, gần giống màu mai cua, dạng bông xốp, khi già màu trở nên đậm hơn. Trên bề mặt xuất hiện những đám sợi khí sinh màu trắng.
Mặt trái khuẩn lạc: Trắng ngà, khi già ngả sang màu nâu nhạt.
Tốc độ mọc: Mọc nhanh, đạt kích thước 4-5cm sau 4-5 ngày nuôi cấy, sau đó lan kín hộp Peptri. Tạo những rãnh đồng tâm với sự hình thành các đám bào tử và các sợi khí sinh xen kẽ.
- Cơ quan sinh bào tử: Cuống sinh bào tử: không màu, phân nhánh dị thường, tạo thành các cụm cuống sinh bào tử dày đặc. Kích thước đạt tới 200 x 3,5-4 àm, cỏc tế bào sinh bào tử dạng chai, kớch thước 2-2,5 x 8-12 àm.
Bào tử dạng phialo, tạo thành lên thành lớp dày đặc, hình , kích thước 3-3,5àm.
Đây là hình dạng điển hình của loài nấm Metarhizium anisopliae Chủng MR2 – MR9:
- Khuẩn lạc:
Màu sắc mặt phải: Xanh rêu đậm, khi già màu trở nên đậm hơn. Trên bề mặt xuất hiện những đám sợi khí sinh màu trắng.
Mặt trái khuẩn lạc: Trắng ngà, khi già ngả sang màu đậm hơn.
Tốc độ mọc: Mọc nhanh, đạt kích thước 3-3,5 cm sau 4-5 ngày nuôi cấy. Tạo những rãnh đồng tâm với sự hình thành các đám bào tử và các sợi khí sinh xen kẽ.
- Cơ quan sinh bào tử: Cuống sinh bào tử: không màu, phân nhánh dị thường, tạo thành các cụm cuống sinh bào tử dày đặc. Kích thước đạt tới 200 x 3,5-4 àm, cỏc tế bào sinh bào tử dạng chai, kớch thước 2-2,5 x 8-12àm.
Bào tử dạng phialo, tạo thành lên thành lớp dày đặc, hình , kích thước 3-3,5àm.
Đây là hình dạng điển hình của loài Metarhizium anisopliae Chủng BR1, BR2:
Mô tả: Về hình dạng khuẩn lạc và cơ quan sinh bào tử hai chủng BR1 và BR2 có những đặc điểm phân loại giống nhau hoàn toàn như sau:
- Khuẩn lạc:
Màu sắc mặt phải: Khuẩn lạc màu trắng hoàn toàn, dạng bông xốp.
Mặt trái khuẩn lạc: Trắng ngà, khi già ngả sang màu đậm hơn.
Tốc độ mọc: Mọc nhanh, đạt kích thước 3-3,5 cm sau 4-5 ngày nuôi cấy. Tạo những rãnh đồng tâm.
- Cơ quan sinh bào tử: Cuống sinh bào tử sinh ra từ sợi khí sinh với các đặc điểm: ngắn, phần cuống phình to, phần ngọn thót lại, từ đó sinh ra các bào tử nhỏ hỡnh cầu đến hỡnh elip, kớch thước 2,5-3,5àm.
Đây là hình dạng điển hình của loài Beauveria bassiana Chủng BR3-BR6, BR8 – BR11, BR13 – BR14:
- Khuẩn lạc:
Màu sắc mặt phải: Khuẩn lạc màu trắng hoàn toàn, dạng bông xốp.
Mặt trái khuẩn lạc: Trắng ngà, khi già ngả sang màu đậm hơn.
Tốc độ mọc: Mọc nhanh, đạt kích thước 3-3,5 cm sau 4-5 ngày nuôi cấy. Tạo những rãnh đồng tâm.
- Cơ quan sinh bào tử: Trên môi trường nuôi cấy, các đám bào tử hình quả bóng được sinh ra dày đặc, trên đó hình thành các cụm cuống sinh bào tử ngắn, phần cuống phình to, phần ngọn thót lại, từ đó sinh ra các bào tử nhỏ hỡnh cầu đến hỡnh elip, kớch thước 2,5-3,5àm.
Đây là hình dạng điển hình của loài Beauveria bassiana Một số hình ảnh về rệp sáp bị nhiễm nấm ký sinh
Hình 3.8. Rệp sáp bột tua ngắn bị nấm Metarhizium ký sinh
Hình 3.9. Rệp sáp bột tua ngắn bị nấm Beauveria ký sinh
Hình 3.10. Rệp sáp mềm xanh bị nấm ký sinh
Hình 3.11. Rệp sáp bột 2 tua dài bị nấm Metarhizium ký sinh
Một số hình ảnh về khuẩn lạc và cành bào tử các chủng nấm
Hình 3.12. Khuẩn lạc chủng MR1 Hình 3.13. Cuống sinh bào tử chủng MR1
Hình 3.14. Khuẩn lạc chủng MR4 Hình 3.15. Bào tử chủng MR4
Hình 3.16. Khuẩn lạc chủng BR5 Hình 3.17. Cành bào tử của chủng BR5 Nguồn ảnh: Phạm Văn Nhạ, 2010
Trong số 25 chủng nấm ký sinh trên rệp sáp cà phê đã phân lập, chúng tôi nhận thấy có 8 chủng với đặc điểm hình thái về khuẩn lạc, cành bào tử và bào tử khó giám định được đến loài, nên chúng tôi sử dụng công nghệ đọc trình tự DNA và so sánh với ngân hàng gene. Các chủng và mồi sử dụng trong nghiên cứu và kết quả nghiên cứu sau khi giải mã trình tự gene từng chủng, so sánh độ tương đồng với các trình tự tham chiếu được trình bày trong bảng 3.5.
Bảng 3.5. Kết quả định tên các mẫu nấm ký sinh bằng phương pháp giải trình tự gene (giám định tại ĐH Missouri – USA, 2011)
TT Mẫu Trình tự Mồi Loài gần nhất Trình tự tham
chiếu Độ tương đồng 1 BR2 VT589 ITS1 Beauveria bassiana GQ249879 527/527
(100%) 2 BR5 VT590 ITS4 Beauveria bassiana GQ249879 512/513
(99,8%) 3 BR12 VT591 ITS1 Cephalosporium
lanoso-niveum AJ292396 518/519 (99,8%) 4 BR7 VT592 ITS4 Cordyceps nutans AF224274 541/541
(100%) 5 BR15 VT629-
VT630 ITS1 Toxicocladosporium sp. EU040243 243/255 (95,3%) 6 MR4 VT631-
VT632 ITS4 Metarhizium anisopliae FJ545308 552/552 (100%) 7 MR7 VT633-
VT634 ITS1 Metarhizium anisopliae AF134150 474/475 (99,8%) 8 BR16 VT635-
VT636 ITS4 Paecilomyces cicadae AB085888 543/543 (100%)
Thông qua kết quả giải trình tự gen, mẫu BR2 sau khi giải trình tự và so sánh với ngân hàng genbank có độ tương đồng 527/527 cặp nucleotide (đạt 100%) với loài Beauveria bassiana; mẫu BR5 có độ tương đồng 512/513 cặp nucleotide (đạt 99.8%) là loài Beauveria bassiana; mẫu BR12 là loài Cephalosporium lanoso-niverum, độ tương đồng 518/519 cặp nucleotide (đạt 99.8%); mẫu BR7 có độ tương đồng 541/541 cặp nucleotide với loài Cordyceps nutans (đạt 100%); Toxicocladosporium sp. là loài gần nhất với mẫu BR15 (độ tương đồng đạt 95.3%, 243/255 cặp nucleotide); mẫu MR4, MR7 tương đồng
100% và 99.8 % với loài Metarhizium anisopliae; mẫu BR16 tương đồng 100%
với loài Paecilomyces cicadae (đạt 543/543 cặp nucleotide).
Qua kết quả giám định các chủng nấm, chúng tôi thu được thành phần các loài nấm ký sinh trên rệp sáp hại cà phê được trình bày trong bảng 3.6.
Bảng 3.6. Thành phần các loài nấm ký sinh trên rệp sáp hại cà phê (Viện BVTV, 2009 – 2011)
TT Loài nấm Ký hiệu
chủng Ký chủ (họ ký chủ) Địa điểm thu
1 Metarhizium anisopliae
MR1 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk MR2 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk MR3 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Sơn La MR4 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk MR6 Rệp sáp mềm (Coccidae) Nghệ An MR7 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk MR8 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Gia Lai MR9 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Gia Lai
2
Beauveria bassiana
BR1 Rệp sáp mềm (Coccidae) Sơn La BR2 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk BR3 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Nghệ An BR4 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Nghệ An BR5 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk BR6 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Nghệ An BR8 Rệp sáp mềm (Coccidae) Đắk Lắk BR9 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk BR11 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Hà Nội BR14 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Sơn La 3 Cephalosporium
lanoso-niveum BR12 Rệp sáp mềm (Coccidae) Đắk Lắk 4 Cordyceps nutans BR7 Rệp sáp bột (Pseudococcidae) Đắk Lắk
Kết quả đã thu thập được 4 loài nấm ký sinh trên rệp sáp hại cà phê, trong đó loài Metarhizium anisopliae thu được 8 chủng, loài Beauveria bassiana thu được 10 chủng, loài Cephalosporium lanoso-niveum thu được 1
chủng và loài Cordyceps nutans thu được 1 chủng. Như vậy, 2 loài nấm M. anisopliae và B. bassiana là những loài có tần suất ký sinh gây bệnh trên rệp sáp cao. Đây là kết quả lần đầu tiên xác định về thành phần các loài nấm ký sinh trên rệp sáp hại cà phê tại Việt Nam.
Cùng với kết kết quả thu thập, phân lập và giám định các mẫu vật thuộc các loài sâu hại khác được thu thập bổ sung ở các vùng khác nhau đến năm 2011 được trình bày trong bảng 3.7.
Bảng 3.7. Danh sách các chủng nấm ký sinh trên sâu hại đã phân lập được ở Việt Nam 2009 - 2011
TT Ký hiệu
chủng Loài nấm Ký chủ
(họ ký chủ) Địa điểm 1 MR1 Metarhizium anisopliae Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk 2 MR2 Metarhizium anisopliae Rệp sáp
(Pseudococcidae) Đắk Lắk 3 MR3 Metarhizium anisopliae Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Sơn La 4 MR4 Metarhizium anisopliae Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk 5 MR5 Metarhizium anisopliae Rầy nâu
(Delphasidae) Hà Nội 6 MR6 Metarhizium anisopliae Rệp sáp mềm xanh
(Coccidae) Nghệ An 7 MR7 Metarhizium anisopliae Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk 8 MR8 Metarhizium anisopliae Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Gia Lai 9 MR9 Metarhizium anisopliae Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Gia Lai 10 BR1 Beauveria bassiana Rệp sáp mềm xanh
(Coccidae) Sơn La
11 BR2 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk
12 BR3 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Nghệ An
13 BR4 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
Nghệ An
TT Ký hiệu
chủng Loài nấm Ký chủ
(họ ký chủ) Địa điểm
14 BR5 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk
15 BR6 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Nghệ An
16 BR7 Cordyceps nutans Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk 17 BR8 Beauveria bassiana Rệp sáp mềm xanh
(Coccidae) Đắk Lắk
18 BR9 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Đắk Lắk 19 BR10 Beauveria bassiana Sâu róm thông
(Lymatridae) Nghệ An 20 BR11 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Hà Nội 21 BR12 Cephalosporium lanoso-
niveum
Rệp sáp mềm xanh
(Coccidae) Đắk Lắk 22 BR13 Beauveria bassiana Sâu đo vải
(Geometridae)
Bắc Giang 23 BR14 Beauveria bassiana Rệp sáp bột
(Pseudococcidae) Sơn La 24 BR15 Toxicocladosporium sp. Rầy nâu
(Delphasidae) Hà Nội 25 BR16 Paecilomyces cicadae Ve sầu (Cicadidae) Đắk Lắk
Kết quả đã thu thập được 25 chủng thuộc 6 loài nấm ký sinh, bao gồm 9 chủng thuộc loài nấm Metarhizium anisopliae trong đó 4 chủng thu được ở Đắk Lắk, 2 chủng ở Gia Lai, 1 chủng ở Sơn La, 1 chủng ở Nghệ An và 1 chủng ở Hà Nội; 12 chủng thuộc loài Beauveria bassiana trong đó 4 chủng thu được ở Đắk Lắk, 4 chủng ở Nghệ An, 2 chủng ở Sơn La, 1 chủng ở Hà Nội và 1 chủng ở Bắc Giang. 1 chủng thuộc loài Cordyceps nutans thu được ở Đắk Lắk, 1 chủng thuộc loài Cephalosporium lanosoniveum thu được ở Đắk Lắk , 1 chủng thuộc loài Toxicocladosporium sp. thu được ở Đắk Lắk và 1 chủng thuộc loài Paecilomyces cicadae thu được ở Đắk Lắk.
Tóm lại: Thành phần thu thập được 20 chủng thuộc 4 loài nấm ký sinh
trên rệp sáp cà phê ở Việt Nam bao gồm: 8 chủng thuộc loài Metarhizium anisopliae, 10 chủng thuộc loài Beauveria bassiana, 1 chủng thuộc loài Cordyceps nutans và 1 chủng thuộc loài Cephalosporium lanoso-niveum. Riêng ở các tỉnh Tây Nguyên đã thu được 12 chủng thuộc 4 loài nấm ký sinh rệp sáp hại cà phê, trong đó 6 chủng thuộc loài Metarhizium anisopliae, 4 chủng thuộc loài Beauveria bassiana, 1 chủng thuộc loài Cordyceps nutans và 1 chủng thuộc loài Cephalosporium lanoso-niveum. Với thành phần các chủng đã thu thập rất phong phú sẽ là nguồn vật liệu phục vụ cho các thí nghiệm đánh giá độc lực và lựa chọn để sản xuất chế phẩm.
3.2.2. Kết quả lựa chọn môi trường nuôi cấy nấm
Để xác định môi trường nuôi cấy nấm và nhân giống cấp 1 vừa đạt hiệu quả kỹ thuật về khả năng phát triển và sinh lượng enzyme ngoại bào lớn nhất, vừa đảm bảo hiệu quả kinh tế, chúng tôi tiến hành thí nghiệm đánh giá môi trường thông qua khả năng sinh enzyme ngoại bào của chủng MR4 như sau:
Bảng 3.8. Khả năng sinh enzyme ngoại bào của chủng nấm MR4 trên các môi trường khác nhau (Viện BVTV, 2009)
Môi trường
Đường kính vòng phân giải của enzyme (cm) Trọng lượng khô Chitine - T Chitine - C CMC Glucose Lipid
MT1 1,90b 2,00b 2,00a 2,06a 2,06a 2,45b MT2 1,53c 1,53c 1,55c 1,55b 1,56c 2,68a MT3 1,43d 1,45d 1,41e 1,43c 1,50d 1,92c CZ 1,41d 1,46cd 1,50d 1,46c 1,50d 0,66e N1 2,10a 2,16a 1,90b 2,03a 1,96b 1,18d
CV % 2,9 2,6 1,1 2,5 2,1 1,7
Ghi chú: Trong phạm vi cột, các chữ a, b, c... chỉ sự sai khác ở độ tin cậy P<0,05
Qua kết quả thí nghiệm bảng 3.8 cho thấy, môi trường N1 là môi trường khả thi nhất dùng để sản xuất giống cấp 1 vì hàm lượng enzyme ngoại bào phân giải Chitine-T và Chitine-C đạt giá trị cao nhất, mặt khác môi trường N1 có giá thành bằng 25% so với các loại môi trường còn lại. Vì vậy
các nghiên cứu về sau cũng như áp dụng trong sản xuất chế phẩm chúng tôi sử dụng môi trường N1 trong tất cả các nghiên cứu.
3.3.3. Nghiên cứu khả năng phát triển của các chủng nấm ở các mức nhiệt độ khác nhau
Để lựa chọn các chủng thích nghi với các ngưỡng nhiệt độ khác nhau, chúng tôi tiến hành các thí nghiệm nuôi cấy trong tủ định ôn ở ngưỡng nhiệt độ 150C; 200C; 250C; 300C và 350C trong 15 ngày, tiến hành đo đường kính khuẩn lạc sau 3; 5; 7; 10; 15 ngày nuôi cấy để đánh giá tốc độ phát triển của các chủng ở các mức nhiệt độ khác nhau. Kết quả thu được trình bày trong các bảng sau:
Bảng 3.9. Khả năng phát triển của các chủng nấm BR trên môi trường N1 ở 15oC (Viện BVTV, 2009 – 2011) Chủng
nấm
Đường kính khuẩn lạc sau các ngày nuôi cấy (mm)
3 ngày 5 ngày 7 ngày 10 ngày 15 ngày
BR1 4,1cb 10,0b 15,0cb 25,6b 37,3b
BR2* 3,3cb 6,6defg 12,0def 18,5de 26,8efg
BR3 2,0d 4,6g 8,5g 16,8e 19,5h
BR4 1,0d 5,0g 10,5fg 18,8ed 33,1cd
BR5* 1,0a 5,0g 11,8def 20,3cde 30,1de BR6 3,1c 7,1def 13,0cde 21,1cd 33,5cd BR7* 4,0cb 9,5cb 14,1bcd 24,3cb 37,1b BR8* 4,0cb 9,6cb 15,1cb 22,3bcd 37,5b BR9* 3,8cb 8,1bcd 12,0def 19,0ed 23,6g BR10 3,5cb 10,0b 14,8cb 19,1ed 30,3cde BR11 1,0d 5,1fg 12,0def 22,1cd 34,0cb BR12* 1,6d 5,8efg 11,3ef 17,0e 27,8ef BR13 3,3cb 9,8cb 15,3cb 24,1cb 33,5cd BR14 1,0d 7,8cde 13,6bcde 16,6e 25,6fg
BR15 4,5b 10,1b 15,6b 21,3cd 31,5cd
BR16* 6,6a 14,1a 21,0a 30,0a 44,8a
CV % 3,4 5,2 10,4 11,0 7,0
Ghi chú: - Trong phạm vi cột, các chữ a, b, c... chỉ sự sai khác ở độ tin cậy P<0,05 - * Các chủng thu được ở Tây Nguyên
Kết quả thí nghiệm khả năng phát triển của các chủng nấm BR cho thấy, các chủng nấm BR đều có khả năng phát triển ở nhiệt độ 15oC, trong đó các chủng có khả năng phát triển tốt là BR16, BR8, BR7, BR1 có đường kính khuẩn lạc sau 15 ngày nuôi cấy tương ứng là 44,8; 37,5; 37,1 và 37,3mm.
Điều này cho thấy các chủng nấm BR có khả năng phát triển ở mức nhiệt độ tương đối thấp.
Bảng 3.10. Khả năng phát triển của các chủng nấm BR trên môi trường N1 ở 20oC (Viện BVTV, 2009 – 2011) Chủng
nấm
Đường kính khuẩn lạc sau các ngày nuôi cấy (mm) 3 ngày 5 ngày 7 ngày 10 ngày 15 ngày
BR1 4,5fg 13,2defghi 20,8fg 30,0def 45,6de
BR2* 5,1ef 11,1i 17,0i 24,3h 33,0f
BR3 3,5g 11,5hi 20,3gh 28,1gf 41,5e
BR4 5,5def 13,6cdefgh 22,5def 32,1cde 57,6b
BR5* 5,6cdef 14,0cdefg 21,3efg 31,6cde 50,8c
BR6 4,1fg 11,8ghi 19,8gh 27,8fg 43,1de
BR7* 6,3bcde 15,3bc 24,6b 35,3b 58,3b
BR8* 6,1bcde 13,1defghi 20,6g 29,8ef 44,1de
BR9* 6,1bcde 12,3fghi 18,6h 25,5gh 42,5e
BR10 7,5b 17,5ab 24,3cb 31,5cde 47,5cd BR11 7,5b 15,8bc 24,3cb 31,5cde 47,5cd
BR12* 7,1bc 15,3bcd 23,0bcde 29,8ef 43,6de
BR13 6,6bcde 15,0cde 22,8cde 33,6cb 56,3b BR14 2,0h 12,8efghi 15,1j 19,5i 28,3g BR15 7,0bcd 14,6cdef 23,8bcd 32,8bcd 77,0a
BR16* 9,1a 19,0a 32,1a 48,3a 76,3a
CV % 6,0 9,9 4,7 5,5 5,7
Ghi chú: - Trong phạm vi cột, các chữ a, b, c... chỉ sự sai khác ở độ tin cậy P<0,05 - * Các chủng thu được ở Tây Nguyên
Ở nhiệt độ 20oC, các chủng BR đều phát triển tốt, đạt kích thước lớn.
Chủng BR15, BR16 đạt lớn nhất 77mm, 76,3mm, chủng BR14 phát triển kém
nhất, đường kính chỉ đạt 28,3mm sau 15 ngày nuôi cấy trên môi trường N1.
Bảng 3.11. Khả năng phát triển của các chủng nấm BR | trên môi trường N1 ở 25oC (Viện BVTV, 2009 – 2011) Chủng
nấm
Đường kính khuẩn lạc sau các ngày nuôi cấy (mm) 3 ngày 5 ngày 7 ngày 10 ngày 15 ngày
BR1 7,8b 17,6a 25,1ab 33,6a 50,5c
BR2* 7,6b 17,8a 25,0b 34,1a 50,5c BR3 7,8b 18,6a 25,5ab 34,5a 51,6bc BR4 7,6b 18,6a 25,1ab 35,0a 54,0abc BR5* 8,5ab 20,6a 29,3ab 38,8a 56,1abc BR6 8,0ab 20,8a 29,5ab 39,3a 59,5abc BR7* 10,0ab 22,8a 30,5ab 41,6a 58,8abc BR8* 10,5a 22,3a 30,5ab 41,6a 62,1ab BR9* 9,5ab 21,6a 29,6ab 42,3a 59,8abc BR10 9,6ab 21,5a 28,6ab 40,8a 59,1abc BR11 10,0ab 23,3a 32,8ab 45,0a 58,8abc BR12* 10,0ab 23,3a 33,0ab 47,0a 59,6abc BR13 9,0ab 21,8a 32,8ab 47,8a 62,5a BR14 10,0ab 23,5a 33,6ab 47,8a 61,1ab BR15 9,0ab 22,1a 31,0ab 45,0a 59,3abc BR16* 9,3ab 21,1a 31,8ab 45,8a 59,5abc
CV % 5,7 7,3 16,0 19,0 10,2
Ghi chú: - Trong phạm vi cột, các chữ a, b, c... chỉ sự sai khác ở độ tin cậy P<0,05 - * Các chủng thu được ở Tây Nguyên
Chủng BR14 phát triển kém ở nhiệt độ 20oC tuy nhiên ở nhiệt độ 25oC chủng này lại phát triển khá tốt, đường kính khuẩn lạc sau 15 ngày nuôi cấy đạt 61,1mm. Các chủng BR khác cũng cho kích thước đường kính khuẩn lạc lớn ở ngưỡng nhiệt độ này, hầu hết các chủng đều có đường kính khuẩn lạc đạt xoay quanh 60mm. Kết quả nghiên cứu này tương đồng với các kết quả nghiên cứu đã được công bố trên thế giới về ngưỡng nhiệt độ tối thích cho nấm côn trùng phát triển tốt nhất từ 25 – 280C (Inglis, 1993).