2.4.1. Khái niệm chung
Kỹ thuật nuôi cấy mô tế bào (nuôi cấy in vitro) đang thực sự đ−ợc ứng dụng một cách có hiệu quả trong nhiều lĩnh vực nh− nhân giống vô tính cây trồng, tạo cây sạch bệnh, tạo dòng thuần, lai tế bào, chọn dòng tế bào...và một lĩnh vực rất quan trọng và có ý nghĩa lớn đó là nuôi cấy bảo quản in vitro nguồn tài nguyên di truyền thực vật quý hiếm và sạch bệnh (Lê Trần Bình, Hồ Hữu Nhị, Lê Thị Muội, 1997) [2].
Mục đích cơ bản của bảo quản nguồn tài nguyên di truyền thực vật là duy trì sự phong phú, đa dạng di truyền trong loài, giữa các loài và trong hệ sinh thái nói chung, đồng thời có sự hiểu biết về chúng để làm cơ sở cho việc khai thác, sử dụng chúng trong hiện tại và trong t−ơng lai (Khanna và ctv, 1991) [2]
Nguồn gene cây trồng th−ờng đ−ợc bảo quản theo hai ph−ơng thức : + Ph−ơng thức in-situ (bảo quản tại chỗ): loại bảo quản này cho phép cây trồng sinh tr−ởng trong điều kiện sinh thái tự nhiên. Ph−ơng thức bảo quản
xxix
này th−ờng áp dụng cho những cây sinh sản vô tính, các cây hoang dại (Hawkes, 1982) [44].
+ Ph−ơng thức ex-situ: các cơ quan của cây trồng đ−ợc bảo quản trong điều kiện nhân tạo, tối −u. Nó có thể tái sinh thành cây con hoàn chỉnh khi cần thiết. Bảo quản ex-situ đóng một vai trò quan trọng trong việc xây dựng ngân hàng gene. Ph−ơng thức này đ−ợc áp dụng cho nhiều đối t−ợng cây trồng khác nhau.
Trong bảo quản ex-situ nguồn gene bất kỳ của loại cây trồng nào cũng có thể đ−ợc duy trì, l−u giữ. Có những hình thức bảo quản ex-situ khác nhau (Khanna và cs, 1991) [2]:
- Trên v−ờn −ơm, tạo thành Field genebank.
- Bảo quản hạt trong kho lạnh tạo thành seed genebank. - Bảo quản in vitro tạo thành in vitro genebank.
- Bảo quản DNA, acid nucleic, chất mang thông tin di truyền.
Vấn đề lựa chọn hình thức bảo quản nào thì tuỳ thuộc vào bản chất cây trồng, điều kiện kinh tế và sự phát triển khoa học công nghệ của từng quốc gia.
Hawkes (1982) [44] đã tổng kết về các hình thức bảo quản phụ thuộc vào bản chất cây trồng nh− sau:
Bản chất cây trồng quyết dịnh các giải pháp bảo quản Yếu tố sinh học Ph−ơng pháp bảo quản
Cây lâu năm (cây gỗ) Insitu, ngân hành gene đồng ruộng, in vitro (hạt và hạt phấn)
Cây hàng năm Ngân hàng gene đồng ruộng, in vitro Cây nhân vô tính với hạt vô sinh Ngân hàng gene đồng ruộng, in vitro, bảo
quản đông khô Cây nhân giống vô tính với hạt
có phôi
Ngân hàng gene đồng ruộng, bảo quản hạt phấn, hạt, in vitro, đông khô
Cây thích hợp nuôi cấy mô Tìm các ph−ơng pháp bảo quản thích hợp, bảo quản in vitro
Cây có hạt phấn với sự sống cao Bảo quản hạt phấn
xxx