Cá chạch lấu là loài sống tầng đáy, chúng có thể sống và phát triển tốt trong điều kiện pH từ 6 – 8 phát triển tốt nhất là pH = 7, độ cứng từ 6 – 25 (tốt nhất là 10), nhiệt độ từ 23 –270C (tốt nhất là 260C). Trong môi trường nuôi nhốt việc chuẩn bị nền đáy cát và tạo ra những nơi cư trú như hang, hốc, khe, rãnh,… hay ít nhất là khúc gỗ có đục lỗđể chúng có nơi ẩn nấp. Môi trường nuôi thêm một ít muối pha vào nền đáy cát điều này giúp chúng phát triển tốt. Cần có mái che phía trên để che bớt ánh sáng tránh để cá trốn ra khỏi bểđồng thời giúp chúng có thể tìm thức ăn vào ban ngày (Mongabay, 2007).
2.5 Đặc điểm dinh dưỡng
Cá chạch lấu là loài cá ăn tạp thích bắt mồi về đêm, trong tự nhiên chúng ăn các loại côn trùng sống đáy, các loài giun, ấu trùng giáp xác và cả mùn bã hữu cơ (Rainboth, 1996). Trong môi trường nhân tạo chúng có thểăn các loại thức ăn tươi sống hay đông lạnh như: các loài tôm, cá nhỏ, ấu trùng muỗi, động vật phù du đặc biệt rất thích ăn các loài giun đất. Trong môi trường nuôi nhốt
chúng vẫn có thể bắt mồi vào ban ngày nếu như bể nuôi được che bớt ánh sáng (PetEducation, 2007).
2.6 Đặc điểm sinh trưởng
Đây là loài cá có tốc độ tăng trưởng tương đối chậm. Ngoài tự nhiên, cá chạch lấu có chiều dài tối đa 90cm và khối lượng 500g (Huang, H. et. al, 1987; Sokheng, C. et al, 1999).
2.7 Đặc điểm sinh sản
Cá tham gia sinh sản sau một năm tuổi, là loài đẻ trứng dính, trứng cá màu vàng, nơi cá đẻ là hang hốc, khe đá, bụi thực vật ven bờ. Số lượng trứng không nhiều, cá có chiều dài 35 – 40 cm thì sức sinh sản tuyệt đối dao động khoảng 4.500 – 7.500 trứng (Sở Thuỷ Sản Bình Thuận, 2007). Tuy nhiên, theo Nguyễn Văn Triều (2009), sức sinh sản tuyệt đối của cá chạch lấu dao động trong khoảng từ 11.209 – 45.631 trứng/cá và không có sự tương quan giữa kích thước và khối lượng càng lớn thì sức sinh sản càng lớn.
Theo Rainboth (1996); Riede, K. (2004), mùa sinh sản của cá ở sông Mêkông từ tháng 4 đến tháng 6. Cá thường tập trung sinh sản vào tháng 6 và 7 hàng năm (Nguyễn Văn Triều, 2009).
Chương III. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
3.1 Thời gian và địa điểm nghiên cứu
Thời gian: Từ tháng 11/2007 đến tháng 02/2010
Địa điểm: - Xã Mỹ Khánh, thành phố Long Xuyên: bố trí nuôi vỗ, kích thích sinh sản, thí nghiệm ương giống.
- Khoa Nông Nghiệp & TNTN, Trường Đại Học An Giang: phân tích các chỉ tiêu môi trường, chỉ tiêu dinh dưỡng,…
- Trung tâm giống Thủy sản An Giang: chuyển giao qui trình nuôi vỗ, kích thích sinh sản nhân tạo và ương cá giống.
3.2 Vật liệu nghiên cứu
Một số dụng cụ và vật liệu được sử dụng trong quá trình thực hiện đề tài bao gồm:
- Bể nuôi vỗ làm bằng khung sắt, lót bạt nhựa bên trong: 9 bể, mỗi bể có thể tích 4m3 (2x2x1m).
- Bể composite 0,5m3: dùng kích thích cá đẻ và ương cá giống.
- Thức ăn nuôi vỗ cá bố mẹ thành thục sinh dục: trùn quế, tép, thức ăn công nghiệp.
- Thức ăn ương cá giống: trứng nước, trùn chỉ, cá tạp, thức ăn công nghiệp. - Kích thích tố:
+ HCG (Human Chorionic Gonadotropin): xuất xứ Việt Nam
+ LHRHa + DOM (Luteinizing Releasing Hormone analog + Domperidom): xuất xứ Trung Quốc
+ Não thùy cá: não thùy cá có khối lượng trung bình 0,5mg/não, xuất xứ Việt Nam (Mua từ Trung tâm Quốc gia Giống Thủy sản Nước ngọt Nam Bộ).
- Các dụng cụ và trang thiết bị khác: Kính hiển vi, cân điện tử 4 số lẻ do Đức sản xuất, cân đồng hồ, que thăm trứng, kim tiêm, thau, lưới, vợt, nhiệt kế, bộ test các chỉ môi trường nước,…
3.3 Phương pháp nghiên cứu
3.3.1 Nghiên cứu kỹ thuật nuôi vỗ thành thục sinh dục cá chạch lấu
- Cá chạch lấu đưa vào nuôi vỗ thành thục sinh dục là những cá trưởng thành có kích cỡ trung bình từ 100 – 300g/con được thu từ tự nhiên từ các đống chà, đặt lù, đặt dớn,…
- Tỷ lệđực cái là 1:1
- Mật độ nuôi vỗ: 1kg/m3/bể.
- Thời gian thí nghiệm nuôi vỗ là 4 tháng (từ tháng 02/2008 đến tháng 5/2008) (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.3.1.1 Bố trí thí nghiệm
Thí nghiệm nuôi vỗđược bố trí trên bể làm bằng khung sắt, xung quanh lót bạt nhựa, theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên với 3 nghiệm thức và 3 lần lặp lại. Mỗi bể có thể tích 4m3 (2x2x1m), mức nước sâu 0,8m. Trong mỗi bể nuôi đặt vào 4 ống nhựa có đường kính 11cm, chiều dài 40cm/ống để làm nơi trú ẩn cho cá. EW SH CP SH CP EW CP EW SH Hình 3. Sơđồ bố trí thí nghiệm nuôi vỗ EW: Nghiệm thức sử dụng thức ăn trùn quế. SH: Nghiệm thức sử dụng thức ăn tép
Bảng 1. Số lượng và cỡ cá trong thí nghiệm nuôi vỗ
NT WTB♀ (gam) SL ♀ (Con) WTB♂ (gam) SL ♂ (Con)
SH 163 ± 37,02 30 262 ± 45,59 30
CP 156 ± 34,13 30 269 ± 36,45 30
EW 156 ± 39,88 30 268 ± 33,83 30
3.3.1.2 Thức ăn và cách cho ăn trong khi nuôi vỗ
Nguồn gốc thức ăn
Tép sử dụng trong thí nghiệm là tép sông được mua từ người dân đặt lợp, kéo lưới, dớn.
Trùn quế sử dụng là dạng trùn tươi được mua từ Ô môn – Cần Thơ.
Thức ăn công nghiệp sử dụng là thức ăn dùng cho tôm (dạng chìm) đường kính 2mm, hàm lượng đạm 33% của công ty Uni-President Việt Nam.
Bảng 2. Thành phần (%) hóa học các loại thức ăn nuôi vỗ cá chạch lấu Thành phần Tép TACN Trùn Đạm 54,32 33,00 64,00 Lipid 14,49 4,00 9,70 Ẩm độ 83,10 11,00 83,20 Khoáng 16,49 16 6,37 Phương thức cho ăn
Thức ăn được đặt trong sàn ăn, mỗi bểđặt 1 sàn ăn. Ngày cho ăn 1 lần vào buổi chiều mát. Giai đoạn nuôi vỗ tích cực cho ăn 5-7% khối lượng thân/ngày, giai đoạn nuôi vỗ thành thục cho ăn 3% khối lượng đàn/ngày (Đối với thức ăn là trùn quế và tép). Thức ăn công nghiệp cho ăn 1-3% khối lượng thân/ngày. Thức ăn tươi sống trước khi cho ăn được rửa bằng NaCl 3% để loại bớt ký sinh trùng.
3.3.1.3 Chăm sóc và quản lý
- Cá thu vềđược đưa vào các bể thí nghiệm (hình 3), để ổn định 1 tuần cho cá quen dần trong điều kiện nước đứng. Sau đó tập cho cá ăn từ từđến khi cá bắt mồi mạnh thì tiến hành thu thập các chỉ tiêu trong thí nghiệm nuôi vỗ.
- Trên mặt bể thả lục bình khoảng 1/3 diện tích mặt thoáng của bể để che bớt ánh sáng.
- Các bể nuôi được bố trí sục khí vào ban đêm (bắt đầu từ 19h).
- Chế độ thay nước: định kỳ 2-3 ngày thay nước 1 lần, mỗi lần thay 30-40% khi cá chuẩn bị thành thục mỗi ngày thay nước vào buổi sáng để kích thích cá sớm thành thục.
- Định kỳ 15-20 ngày/lần trộn Hadaclean A (sản phẩm của công ty Bayer) với liều lượng 2-3g/1kg thức ăn để tẩy nội, ngoại ký sinh cho cá.
3.3.1.4 Các chỉ tiêu khảo sát trong quá trình nuôi vỗ
- Các chỉ tiêu môi trường: nhiệt độ (đo bằng nhiệt kế thủy ngân), oxy, pH (đo bằng test) được đo định kỳ 3 ngày/lần, buổi sáng đo lúc 6-7h và buổi chiều đo lúc 14-15h.
- Tiêu hao oxy hóa học (COD - Chemical Oxygen Demand): 2 tháng thu mẫu 1 lần, sau đó đem phân tích theo phương pháp oxy hóa KMnO4 trong môi trường kiềm
- Thức ăn tự nhiên trong môi trường nuôi: Định kỳ 2 tháng lấy mẫu 1 lần để phân tích phiêu sinh động vật và phiêu sinh thực vật (định tính và định lượng) theo tiêu chuẩn Nhà nước Việt Nam về môi trường – tập I, chất lượng nước + Động vật nổi: Về định tính so sánh hình thái theo Đặng Ngọc Thanh & ctv (1998); Đặng Ngọc Thanh & Hồ Thanh Hải (2002). Về định lượng đếm dưới kính hiển vi trong buồng đếm hồng cầu (Sedwick rafter)
+ Thực vật nổi: So sánh hình thái theo Dương Đức Tiến và Võ Hành (1999); Takaaki Ymagiashi (2000). Đếm dưới kính hiển vi trong buồng đếm hồng cầu (Sedwick rafter)
- Các chỉ tiêu sinh sản: Sau 2 tháng nuôi vỗđịnh kỳ kiểm tra mức độ thành thục của buồng trứng 30 ngày/lần. Quan sát hình dáng bên ngoài, thăm trứng kết hợp mỗi nghiệm thức thu 3 cá cái đem mổđể đánh giá mức độ thành thục của cá thí nghiệm thông qua các chỉ số khối lượng thân, khối lượng buồng trứng, tỷ lệ thành thục, đường kính trứng.
+ Xác định sự thành thục của cá theo thời gian: xác định các giai đoạn thành thục của cá theo thang 6 bậc của Sakun và Buskaia (1982) để đánh giá sự phát triển của tuyến sinh dục cá chạch lấu trong quá trình nuôi vỗ.
+ Tỷ lệ thành thục = Số cá thành thục/số cá nuôi vỗ*100
+ Đường kính trứng của cá thành thục sinh dục: đo đường kính của 30 trứng/cá cái bằng kính hiển vi có gắn trắc vi thị kính.
3.3.2 Nghiên cứu kích thích sinh sản nhân tạo cá chạch lấu (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
3.3.2.1 Cá thí nghiệm
Cá dùng trong thí nghiệm này là những cá thành thục lấy từ thí nghiệm nuôi vỗ (nghiệm thức sử dụng trùn và tép). Mỗi cá thể có khối lượng từ 100 – 300g. 3.3.2.2 Kích thích sinh sản nhân tạo cá chạch lấu
Ứng dụng phép tiêm nhiều lần (2 lần) để kích thích sự chín và rụng trứng của cá chạch lấu, khoảng cách giữa 2 lần tiêm dao động trong khoảng 8-10h. Ở tất cả các nghiệm thức đều sử dụng 0,5mg não thùy (1 cái) cho 1 kg cá cái ở liều sơ bộ. Ở cá đực chỉ tiêm 1 lần bằng 1/3 liều so với cá cái cùng thời điểm khi tiêm liều quyết định cho cá cái.
3.3.2.3 Bố trí thí nghiệm
Khi cá đạt giai đoạn sẵn sàng sinh sản thì tiến hành kích thích. Quá trình kích thích sinh sản sẽđược bố trí thành nhiều nghiệm thức thí nghiệm theo kiểu khối hoàn toàn ngẫu nhiên dựa trên liều lượng và loại hormone sử dụng như HCG, LH-RHa + DOM, não thùy kết hợp với kích thích sinh thái (kích thích nước – sục khí). Sử dụng các loại hormon với các mức liều lượng (tính trên liều quyết định) như sau:
Bảng 3. Liều lượng các loại thuốc kích thích Liều lượng Hormone Thí nghiệm Loại chất kích thích NT.1 NT.2 NT.3 TN.I HCG (UI/kg) 1.500 2.000 2.500 TN.II LH-RHa(µg/kg) + 10mg DOM 100 150 200
TN.III Não thuỳ (mg/kg) 3 5 7
Mỗi mức nồng độ chất kích thích được thực hiện trên 1 cá cái và lặp lại 3 lần để khẳng định kết quả.
Phương pháp gieo tinh: sử dụng phương pháp gieo tinh nửa khô. Ấp trứng:
- Nước ấp trứng là nước máy trữ lại 48h nhằm loại bỏ hết Chlorin.
- Trứng cá chạch lấu sau khi gieo tinh được rải đều lên giá thể (khung lưới, gạch tàu) và đưa vào bểấp. Đặt giá thể trong bểấp có sục khí liên tục cách mặt nước 20-30cm. Định kỳ 12h thay nước 1 lần, mỗi lần thay 20% lượng nước.
3.3.2.4 Các chỉ tiêu theo dõi khi kích thích sinh sản Các chỉ tiêu so sánh khi kích thích sinh sản bao gồm: Các chỉ tiêu so sánh khi kích thích sinh sản bao gồm: Các chỉ tiêu so sánh khi kích thích sinh sản bao gồm: Các chỉ tiêu so sánh khi kích thích sinh sản bao gồm:
• Thời gian hiệu ứng: là khoảng thời gian từ khi tiêm kích dục tố ở liều quyết định đến khi cá đẻ.
• Thời gian nở: thời gian từ lúc trứng thụ tinh đến lúc trứng nở.
• Kích cỡ cá bột: Đo chiều dài 30 cá bột sau khi mới nở để tính chiều dài và khối lượng của cá bột.
Số lượng cá rụng trứng
• Tỷ lệ cá đẻ (%) = --- x 100 Tổng số cá cho đẻ
Số lượng trứng đẻ ra
• SSS thực tế (trứng/gam cá cái) = --- Khối lượng cá cái tham gia sinh sản Số lượng trứng thụ tinh • Tỷ lệ thụ tinh (%) = --- x 100 Số lượng trứng quan sát Số lượng cá bột • Tỷ lệ nở (%) = --- x 100 Số lượng trứng thụ tinh
Số lượng cá bột sau khi hết noãn hoàng
• Tỷ lệ sống cá bột (%) = --- x 100 Số lượng cá bột mới nở
3.3.3 Nghiên cứu ương cá chạch lấu từ bột lên giống
3.3.3.1 Bố trí thí nghiệm
- Trong 10 ngày đầu sau khi nở, cá bột được cho ăn hoàn toàn bằng trứng nước. Sau đó được chuyển sang ương trong bể composite có thể tích 500lít.
- Thí nghiệm được bố trí theo kiểu hoàn toàn ngẫu nhiên với 4 nghiệm thức và 3 lần lặp lại với các loại thức ăn khác nhau.
- Mật độương 500 con/bể.
- Thời gian thí nghiệm là 45 ngày
3.3.3.2. Cho ăn và chăm sóc
- Nghiệm thức 1: cho ăn hoàn toàn bằng trứng nước. - Nghiệm thức 2: Cho ăn hoàn toàn bằng trùn chỉ. - Nghiệm thức 3: Cho ăn thịt cá tạp xay nhuyễn.
- Nghiệm thức 4: Cho ăn thức ăn công nghiệp (UP-T501) có hàm lượng protein 40%. (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});
Khẩu phần ăn: cho ăn theo nhu cầu của cá ngày 2 lần (sáng 8-9h, chiều 16- 17h). Sau khi cho ăn khoảng 2h, tiến hành siphone thức ăn thừa ra khỏi bể. - Định kỳ 2-3 ngày thay nước 1 lần, mỗi lần thay 30-40% lượng nước trong bể và thay đều cho tất cả các nghiệm thức.
- Các bểương được bố trí sục khí liên tục, đặt giá thể là những sợi nilon cho cá có chổ bám vào.
- Các bểương được bố trí sục khí liên tục 24/24h.
3.3.3.3 Các chỉ tiêu khảo sát trong thí nghiệm ương cá
Các chỉ tiêu môi trường
- Các chỉ tiêu pH, oxy hòa tan định kỳ 3 ngày đo 1 lần bằng test.
- Nhiệt độđịnh kỳ 3 ngày đo 1 lần bằng nhiệt kế thủy ngân vào buổi sáng (6- 7h) và chiều (14-15h).
- Tiêu hao oxy hóa học (COD - Chemical Oxygen Demand): 2 tuần thu mẫu 1 lần, sau đó đem phân tích theo phương pháp oxy hóa KMnO4 trong môi trường kiềm
- Thức ăn tự nhiên trong môi trường ương: Định kỳ 2 tuần lấy mẫu 1 lần để phân tích phiêu sinh động vật và phiêu sinh thực vật (định tính và định lượng) theo tiêu chuẩn Nhà nước Việt Nam về môi trường – tập I, chất lượng nước. + Động vật nổi: Về định tính so sánh hình thái theo Đặng Ngọc Thanh & ctv (1998); Đặng Ngọc Thanh & Hồ Thanh Hải (2002). Về định lượng đếm dưới kính hiển vi trong buồng đếm hồng cầu (Sedwick rafter).
+ Thực vật nổi: So sánh hình thái theo Dương Đức Tiến, Võ Hành (1999); Takaaki Ymagiashi (2000). Đếm dưới kính hiển vi trong buồng đếm hồng cầu (Sedwick rafter).
Các chỉ tiêu tăng trưởng
- Trong quá trình ương, định kỳ thu mẫu cá 15 ngày/lần để đánh giá tốc độ tăng trưởng thông qua cân khối lượng và đo chiều dài của cá (30con/lần/bể). Sau 45 ngày thì thu toàn bộ cá để tính tỷ lệ sống.
- Tính toán kết quả
Chiều dài tổng: được xác định bằng cách đo từng cá thể
Khối lượng: được xác định bằng cách cân từng cá thể bằng cân điện tử Tốc độ tăng trưởng đặc biệt (Specific Growth Rate)
SGR (%/ngày) = 100* (LnW2 – LnW1)/t Tốc độ tăng trưởng tuyệt đối (Daily Weight Gain)
DWG (g/ngày) = (W2 – W1)/t
Trong đó: W2: khối lượng cuối (g) W1: khối lượng đầu (g) t: thời gian nuôi (ngày)
- Tỷ lệ sống (%) = Số cá thu hoạch/số cá thả nuôi ban đầu*100.