5.1. Kêt Luaơn
Đeơ chĩn lĩc các chụng có tieăm naíng probiotics, tuyeơn chĩn khạ naíng kháng vi sinh vaơt đóng vai trò quan trĩng nhât và là hàng rào tuyeơn chĩn đaău tieđn caăn áp dúng.
Trong bôn phương pháp thử nghieơm tređn mođi trường thách là spot on lawn, agar spot test, dics diffusion assay và well diffusion assay thì phương pháp thứ tư là cho kêt quạ trong phòng thí nghieơm cụa chúng tođi. Phương pháp này dùng đeơ đánh giá hốt tính toơng hợp các chât kháng khuaơn do vi khuaơn lactic sinh ra trong quá trình trao đoơi chât.
Đeơ thực hieơn các phương pháp này đã tôi ưu hóa đieău kieơn là:
Sử dúng mođi trường thách dày 3mm tương ứng với 15ml mođi trường. Sử dúng E.coli noăng đoơ 105 tê bào/ml dùng cho tât cạ các phương pháp kieơm tra sự đôi kháng.
Trong các phương pháp sử dúng đeơ kieơm tra hốt tính kháng vi sinh vaơt chư có phương pháp đo đoơ đúc (turbidometric assay method) cho kêt quạ định lượng. Áp dúng phương pháp này có theơ đánh giá ạnh hưởng rieđng rẽ cụa các chât kháng vi sinh vaơt chư thị.
Baỉng phương pháp well diffusion assay chúng tođi xác định được naím chụng có vòng kháng khuaơn tôt nhât là: C1, T8b, T1a, T7b, N3. Trong đó C1 và N3 có nguoăn gôc từ thực phaơm là cà muôi và nem. Còn T8b, T1a, T7b có nguoăn gôc từ dược phaơm, là các chê phaơm Biolactyl, Probio và Ybio.
Baỉng phương pháp đo đoơ đúc chúng tođi xác định được naím chụng có khạ naíng táo chât kháng khuaơn, ức chê sự taíng sinh cụa vi khuaơn chư thị E.coli cho kêt quạ tôt nhât là : T1a, C1, N3, T7b, T8b, tương ứng với thí nghieơm kieơm tra vòng kháng khuaơn.
5.2. Kiên nghị
Kiên nghị tái phòng thí nghieơm Đái Hĩc Kỹ Thuaơt Cođng Ngheơ neđn trieơn khai phương pháp turbidometric assay trong nghieđn cứu chĩn lĩc chụng tieăm naíng probiotic. Đeơ thực hieơn hoàn chưnh phương pháp này caăn phại đieău chưnh, tôi ưu hóa moơt sô đieău kieơn như sau:
• Vieơc chuaơn hóa này được thực hieơn dựa tređn dựng đường chuaơn veă noăng đoơ tê bào vi khuaơn, kieơm soát và cô định noăng đoơ tê bào vi khuaơn leđn men lactic sử dúng trong phương pháp.
• Kieơm soát và cô định noăng đoơ tê bào E.coli sử dúng trong phương pháp
• Trích ly và định lượng bacteriocin và xử lý dịch ly tađm baỉng proteinase K đeơ xác định các hợp chât có hốt tính kháng khuaơn có bạn chât là protein hay khođng.
• Tiêp túc tiên hành các kieơm tra hốt tính Probiotic cụa vi khuaơn lactic với các tieđu chí veă: khạ naíng bám dính cánh tranh với vi khuaơn chư thị, khạ naíng chịu được pH hoaịc dung hòa với acid, khạ naíng chịu được noăng đoơ muôi maơt cao, kieơm tra khạ naíng đôi kháng trực tiêp với vi khuaơn chư thị trong đieău kieơn in vivo.
SVTH: Đoê Queđ Mi Hương