Sản phẩm Teđn sạn phaơm Kí hieơu các chụng phađn laơp Sữa chuaSữa đeơ chua tự nhieđn 1S1a, S1b
3.2.3.4 Thí nghieơm xác định khạ naíng đôi kháng baỉng phương pháp Turbidometricassay (đo đoơ đúc)
Nguyeđn taĩc cụa phương pháp đo đoơ đúc: Baỉng máy quang phoơ đo maơt đoơ tê bào vi sinh vaơt có trong dịch nuođi cây ở bước sóng 600nm.
Thí nghieơm được tiên hành với 2 nghieơm thức:
Nghieơm thức 1: xác định hốt tính dựa tređn sự ức chê vi khuaơn chư thị
E.coli baỉng các chât được sinh ra trong quá trình trao đoơi chât cụa các chụng
LAB.
Nghieơm thức 2: xác định hốt tính tređn sự ức chê vi khuaơn chư thị E.coli baỉng các chât được sinh ra trong quá trình phát trieơn cụa các chụng LAB nhưng đã lối bỏ yêu tô acid lactic baỉng cách trung hòa bằng dung dịch NaOH 1N.
Chuaơn bị: Dịch nuođi cây E.coli (21h, 370C) . Pha loãng 10-2 được noăng đoơ sử dúng là 105 tê bào/ml
Dịch nuođi cây LAB trong MRS lỏng 18- 24h, ở 370C.
Nghieơm thức 1: Đem ly tađm dịch nuođi cây LAB 14000 vòng/ phút, trong 10 phút. Lối bỏ sinh khôi.
SVTH: Đoê Queđ Mi Hương
Nghieơm thức 2: Trung hòa dịch nuođi cây veă pH 6 baỉng NaOH 1N, tiên hành thanh trùng 800C trong 10 phút. Đem ly tađm 14000 vòng/ phút, trong 10 phút. Lối bỏ sinh khôi.
Cođng thức tính như sau: %OD=ODODdc×100
Với: OD: là giá trị đo OD cụa ông có chứa hợp chât kháng khuaơn.
ODdc: là giá trị đo OD cụa ông đôi chứng khođng có chứa hợp chât kháng khuaơn.
Cách thực hieơn:
Dịch nuođi cây E.coli nuođi cây taíng sinh qua 24h, pha loãng 10-2
Lây 1ml 1ml dịch ly tađm LAB
Cho vào 8ml BHI+1ml MRS Broth
Ụ hiêu khí 24h, 370C
Đo OD
Cho vào 8ml BHI
Ụ hiêu khí 24h, 370C
Đo OD
So sánh đoơ đúc, kêt luaơn Có theơ laơp theo bạng sau:
Nghieơm Thức 1 Nghieơm Thức 2
Ông kieơm
tra
1ml dịch nuođi cây E.coli qua 21h, noăng đoơ 105 tê bào/ml.
+
1ml dịch nuođi cây E.coli qua 21h, noăng đoơ 105 tê bào/ml.
hốt tính
1ml dịch ly tađm mođi trường nuođi cây LAB sau 18-24h.
+
8ml mođi trường peptone water.
1ml dịch ly tađm đã trung hòa acid baỉng NaOH 1N.
+
8ml mođi trường peptone water. Ông
đôi chứng
1ml dịch nuođi cây E.coli qua 21h, noăng đoơ 105 tê bào/ml. +
1ml MRS lỏng +
8ml mođi trường peptone water.
SVTH: Đoê Queđ Mi Hương