Thí nghieơm xác định khạ naíng đôi kháng baỉng phương pháp Turbidometricassay (đo đoơ đúc)

Một phần của tài liệu Thử nghiệm và so sánh các phương pháp đo hoạt tính khánh vi sinh vật của vi khẩn lên men LACTIC để chọn chủng tiềm năng PROBIOTIC (Trang 59 - 62)

Sản phẩm Teđn sạn phaơm Kí hieơu các chụng phađn laơp Sữa chuaSữa đeơ chua tự nhieđn 1S1a, S1b

3.2.3.4Thí nghieơm xác định khạ naíng đôi kháng baỉng phương pháp Turbidometricassay (đo đoơ đúc)

Nguyeđn taĩc cụa phương pháp đo đoơ đúc: Baỉng máy quang phoơ đo maơt đoơ tê bào vi sinh vaơt có trong dịch nuođi cây ở bước sóng 600nm.

Thí nghieơm được tiên hành với 2 nghieơm thức:

Nghieơm thức 1: xác định hốt tính dựa tređn sự ức chê vi khuaơn chư thị

E.coli baỉng các chât được sinh ra trong quá trình trao đoơi chât cụa các chụng

LAB.

Nghieơm thức 2: xác định hốt tính tređn sự ức chê vi khuaơn chư thị E.coli baỉng các chât được sinh ra trong quá trình phát trieơn cụa các chụng LAB nhưng đã lối bỏ yêu tô acid lactic baỉng cách trung hòa bằng dung dịch NaOH 1N.

Chuaơn bị: Dịch nuođi cây E.coli (21h, 370C) . Pha loãng 10-2 được noăng đoơ sử dúng là 105 tê bào/ml

Dịch nuođi cây LAB trong MRS lỏng 18- 24h, ở 370C.

Nghieơm thức 1: Đem ly tađm dịch nuođi cây LAB 14000 vòng/ phút, trong 10 phút. Lối bỏ sinh khôi.

SVTH: Đoê Queđ Mi Hương

Nghieơm thức 2: Trung hòa dịch nuođi cây veă pH 6 baỉng NaOH 1N, tiên hành thanh trùng 800C trong 10 phút. Đem ly tađm 14000 vòng/ phút, trong 10 phút. Lối bỏ sinh khôi.

Cođng thức tính như sau: %OD=ODODdc×100

Với: OD: là giá trị đo OD cụa ông có chứa hợp chât kháng khuaơn.

ODdc: là giá trị đo OD cụa ông đôi chứng khođng có chứa hợp chât kháng khuaơn.

Cách thực hieơn:

Dịch nuođi cây E.coli nuođi cây taíng sinh qua 24h, pha loãng 10-2

Lây 1ml 1ml dịch ly tađm LAB

Cho vào 8ml BHI+1ml MRS Broth

Ụ hiêu khí 24h, 370C

Đo OD

Cho vào 8ml BHI

Ụ hiêu khí 24h, 370C

Đo OD

So sánh đoơ đúc, kêt luaơn Có theơ laơp theo bạng sau:

Nghieơm Thức 1 Nghieơm Thức 2

Ông kieơm

tra

1ml dịch nuođi cây E.coli qua 21h, noăng đoơ 105 tê bào/ml.

+

1ml dịch nuođi cây E.coli qua 21h, noăng đoơ 105 tê bào/ml.

hốt tính (adsbygoogle = window.adsbygoogle || []).push({});

1ml dịch ly tađm mođi trường nuođi cây LAB sau 18-24h.

+

8ml mođi trường peptone water.

1ml dịch ly tađm đã trung hòa acid baỉng NaOH 1N.

+

8ml mođi trường peptone water. Ông

đôi chứng

1ml dịch nuođi cây E.coli qua 21h, noăng đoơ 105 tê bào/ml. +

1ml MRS lỏng +

8ml mođi trường peptone water.

SVTH: Đoê Queđ Mi Hương

Một phần của tài liệu Thử nghiệm và so sánh các phương pháp đo hoạt tính khánh vi sinh vật của vi khẩn lên men LACTIC để chọn chủng tiềm năng PROBIOTIC (Trang 59 - 62)