- Dưới vùng DP: cũng bao gồm 2 bộ gien ,1 bộ chứa gien giả DPA2 và
ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU
2.2.4 Phương pháp kiểm chứng độ đặc hiệu và độ nhạy của kháng huyết thanh, sau khi chiết tách:
thanh, sau khi chiết tách:
Phương pháp kiểm chứng độ đặc hiệu:
Với những mẫu huyết thanh cĩ thể dùng để làm kháng huyết thanh chẩn đốn. Tiến hành kiểm chứng lại độ đặc hiệu.
Việc chọn mẫu để kiểm chứng, dựa trên thành phần các kháng huyết thanh chiết tách được. Sau đĩ, dùng kỹ thuật độc tế bào theo phương pháp Terasaki (Các bước tiến hành kiểm chứng: được thực hiện giống như các bước của kỹ thuật độc tế bào). Ngồi ra, các kháng huyết thanh được tìm thấy sẽ được
kiểm tra chéo với các kháng huyết thanh của phịng thí nghiệm HLA, trường Đại học Louvain của Bỉ.
Quá trình kiểm tra được thực hiện:
Bước 1: thực hiện kiểm tra với kháng nguyên tương ứng:
. Mỗi loại kháng thể được cho vào mỗi giếng. Dựa vào kết quả phân tích HLA-PCR-SSO của 150 người tình nguyện, chọn ra các cá thể mang các yếu tố HLA lớp I, tương ứng với kháng huyết thanh tìm được, để kiểm tra độ đặc hiệu.
.Bước 2: thực hiện kiễm tra chéo giữa với kháng thể tìm được với kháng thể tương ứng do đại học Louvain cung cấp[50].
Phương pháp kiểm tra độ nhạy: sử dụng kỹ thuật pha lỗng huyết thanh
ở các nồng độ: 1/1; 1/2; 1/4; 1/8; 1/16; … ,[12].
Mỗi huyết thanh chứa kháng thể sẽ được pha lỗng giảm dần theo nồng độ ½. Dùng kỹ thuật độc tế bào để kiểm tra độ nhạy. Các bước tiến hành: được thực hiện giống như các bước của kỹ thuật độc tế bào Terasaki.
Độ nhạy của huyết thanh được xác định ở độ pha lỗng cao nhất cĩ kết quả dương tính với kháng nguyên tương ứng.