So sánh với nhiệt độ tối ưu của chủng nghiên cứu B.subtilis S5 của tác giả Vũ Ngọc Bội thì nhiệt độ tối ưu của CPE B thấp hơn so với nhiệt độ tối ưu của
chủng B.subtilis S5 (nhiệt độ tối ưu là 550C). Khoảng nhiệt độ tối ưu của CPE B tương tự với 1 số protease CPE thương mại, Neutrasse có khoảng nhiệt độ thích hợp từ 400C – 500C, Protamax là 500C.
3.8. Khảo sát sự thủy phân của các cơ chất protein khác nhau bởi chế phẩm protease. protease.
CPE B hoạt động trên khoảng pH khá rộng 6 – 11, nên có phạm vi ứng dụng rộng như trong công nghiệp da, công nghiệp chất tẩy rửa, công nghiệp thực phẩm hay trong nông nghiệp như bổ sung vào thức ăn chăn nuôi.
Nhằm đánh giá sơ bộ khả năng thủy phân của CPE B ở quy mô phòng thí nghiệm nên chúng tôi tiến hành khảo sát khả năng thủy phân protid của CPE B trên các cơ chất khác nhau là: casein 2%, bột đậu nành 2%, bột cá 2%.
Các protein của bột cá và bột đậu nành sẽ bị CPE B thủy phân thành các peptid và acid amin. Trong thí nghiệm này chúng tôi sử dụng phương pháp Sorensen, phương pháp này cho phép xác định được nitơ có trong acid amin, peptid, qua đó chúng tôi có thể đánh giá sơ bộ khả năng thủy phân của CPE B.
Tiến hành khảo sát sự thủy phân bởi CPE B theo phương pháp được trình bày trong mục 2.3.16 ở nhiệt độ là 450C và pH = 8. Sau thời gian phản ứng, xác định lượng nitơ formol tạo thành. Kết quả được trình bày tại bảng 3.17, đồ thị 3.9.
Bảng 3.17. Hàm lượng nitơ formol tạo thành theo thời gian thủy phân trên các cơ chất khác nhau
Thời gian (giờ)
Hàm lượng nitơ formol tạo thành trên các cơ chất khác nhau (g/l) Casein Bột đậu nành Bột cá 0 0,000 0,000 0,000 1 0,049 0,015 0,015 2 0,057 0,027 0,041 3 0,081 0,042 0,070 4 0,099 0,066 0,097 5 0,133 0,078 0,111 6 0,168 0,097 0,126 7 0,206 0,104 0,145 8 0,271 0,121 0,158 9 0,270 0,148 0,167 10 0,271 0,164 0,184 11 0,272 0,165 0,185 12 0,272 0,167 0,186 13 0,273 0,166 0,186 14 0,274 0,169 0,187
Đồ thị 3.9. Hàm lượng nitơ formol tạo thành theo thời gian thủy phân trên các cơ chất khác nhau
Kết quả trên cho thấy hàm lượng NF tạo thành tăng theo thời gian thủy phân trên các cơ chất. Đối với cơ chất casein lượng NF tạo thành tăng liên tục trong 8 giờ, nhưng không đều lúc nhanh lúc chậm, sau 8 giờ tăng chậm và hầu như không đổi. Đối với cơ chất bột đậu nành và bột cá thì lượng NF tạo thành tăng liên tục từ lúc bắt đầu khảo sát cho tới thời điểm 10 giờ, sau 10 giờ thì lượng NF tạo thành hầu như không đổi, giữ ở 0,164 (g/l) đối với cơ chất là bột đậu nành và 0,184 (g/l) với cơ chất là bột cá.
Sau khi ghi nhận kết quả về lượng NF tạo thành, để đánh giá khả năng thủy phân của CPE B đối với các cơ chất trên, chúng tôi khảo sát hiệu suất thủy phân của chế phẩm tại các thời điểm khác nhau. Kết quả được trình bày ở bảng 3.18 và đồ thị 3.10.
Kết quả tại bảng 3.18 và 3.10 cho thấy hiệu suất thủy phân tăng theo thời gian thủy phân với cơ chất. Hiệu suất thủy phân của CPE B tăng tỉ lệ thuận với lượng nitơ formol tạo thành và đạt giá trị cao nhất khi thủy phân trên cơ chất là bột cá (27,84%) sau 10 giờ thủy phân, tiếp đó là bột đậu nành (25,75%) cũng sau 10 giờ
thủy phân. Ở casein hiệu suất thủy phân tăng nhanh trong 8 giờ đầu và đạt giá trị là 19,45%. Qua kết quả này ta có thể thấy khả năng thủy phân của CPE B trên các cơ chất khác nhau được sắp xếp theo thứ tự: Bột cá > bột đậu nành > casein.
Bảng 3.18. Hiệu suất thủy phân của CPE B theo thời gian trên các cơ chất khác nhau
Thời gian (giờ)
Hiệu suất thủy phân (%)
Casein Bột đậu nành Bột cá 0 0,00 0,00 0,00 1 3,52 2,35 2,27 2 4,09 4,24 6,20 3 5,81 6,59 10,59 4 7,11 10,36 14,67 5 9,55 12,24 16,79 6 12,06 15,23 19,06 7 14,79 16,33 21,94 8 19,45 19,00 23,90 9 19,38 23,23 25,26 10 19,45 25,75 27,84 11 19,53 25,90 27,99 12 19,53 26,22 28,14 13 19,60 26,06 28,14 14 19,67 26,53 28,29
Đồ thị 3.10. Hiệu suất thủy phân của CPE B theo thời gian trên các cơ chất khác nhau
CHƯƠNG 4. KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ