Dung dịch kiềm hóa đóng vai trò chuyển các alkaloid về dạng bazơ do vậy
ảnh hƣởng đến hiệu suất chiết của các alkaloid vào pha hữu cơ. Do vậy chúng tôi tiến hành khảo sát một số dung dịch kiềm phổ biến dùng trong chiết alkaloid từ
dƣợc liệu: dung dịch NaOH 0,1 N, dung dịch NH4OH 5% và dung dịch đệm borat
pH 9. Cố định các bƣớc chiết khác nhƣ quy trình trên s ử dụng nền mẫu thực phẩm chức năng có nguồn gốc thảo dƣợc không phát hiện các alkaloid . Sau khi cân mẫu, thêm 25 µL dung dịch chuẩn hỗn hợp 1-10 µg/mL các alkaloid (để thu đƣợc nồng độ alkaloid trong dịch cuối là 5 ng/mL đối với nicotin, scopolamin, atropin và 50 ng/mL đối với brucin, strychnin, koumin, aconitin, colchicin trong dịch chiết cuối cùng trƣớc khi bơm vào máy LC/MS/MS). Để yên 5 phút. Thêm 1 mL các dung dịch kiềm hóa. Tiến hành chiết lặp hai lần theo qui trình trên thu đƣơ ̣c kết quả trung bình nhƣ bảng sau:
Bảng 3.8 : Ảnh hƣởng của dung dịch kiềm hóa đến hiệu suất chiết các alkaloid
Hiệu suất
(%) Anconitin Atropin Brucin Colchicin Koumin Nicotin Scopolamin Strychnin
NaOH 0,1N 33 45 54 80 56 50 73 39
NH4OH 5% 83 74 80 116 112 103 120 95
Acid boric
Hình 3.17 : Biểu đồ ảnh hƣởng của dung dịch kiềm hóa đến hiệu suất chiết các alkaloid
Nhận xét: So sánh hiệu suất chiết của các chất phân tích cho thấy hiệu suất
chiết của hầu hết các alkaloid trừ nicotin đều cao hơn khi sử dụng dung dịch kiềm hóa là dung dịch NH4OH 5%. Do vậy chúng tôi lựa chọn dung dịch kiềm hóa là
dung dịch NH4OH 5%.