4. KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
4.5ðÔNG LẠNH PHÔI TẠO RA TRONG ỐNG NGHIỆM 1 Chất lượng phôi trước ñông lạnh
4.5.1 Chất lượng phôi trước ựông lạnh
Chất lượng phôi có ảnh hưởng rất lớn ựến kết quả cấy phôi cũng như tỷ lệ có chửa (ựối với phôi cấy tươi) và khả năng sống sót của phôi sau ựông lạnh-giải ựông. Trên thực tế, số lượng phôi tạo ra ựược cấy ngay cho bò nhận là
rất thấp mà chủ yếu ựược ựông lạnh ựể phục vụ các nghiên cứu cơ bản cũng như bảo quản phôi. Chắnh vì vậy chất lượng phôi trước ựông lạnh rất quan trọng. Ở bất kỳ trạng thái phát triển nào của phôi sau khi ựông lạnh-giải ựông chất lượng phôi ựều giảm ựi rõ rệt. Vì vậy ựánh giá và phân loại phôi là rất quan trọng, cần lựa chọn chắnh xác phôi có chất lượng tốt ựể ựông lạnh.
Do vậy sau khi thu hoạch phôi ựược ựánh giá về chất lượng theo phương pháp của Lindner và Wright (1983)[37].
Phôi loại A: có hình thái chuẩn phản ánh ựúng giai ựoạn phát triển, màng trong suốt tròn ựẹp, khối phôi bào ựậm, phân chia ựều rõ. Các phôi bào liên kết với nhau chặt chẽ, không có tế bào rời hay mảnh vụn bên ngoài.
Phôi loại B: có hình thái chuẩn, phản ánh ựúng giai ựoạn phát triển, màng trong suốt tròn ựẹp nhưng khối phôi bào không ựều, rõ nét như phôi loại A. Sự liên kết của phôi bào tương ựối chặt, ựôi khi có mảnh vụn hay một số phôi bào rời.
Phôi loại C: có màu sắc phân bố không ựều, các tế bào liên kết lỏng lẻo, nhiều tế bào rời, nhiều mảnh vụn xen kẽ hoặc tụ thành ựám nhỏ.
Kết quả phân loại phôi sau thu hoạch ựược trình bầy qua bảng 4.11
Bảng 4.11. Phân loại phôi sau thu hoạch
Kết quả Chất lượng phôi Số lượng (n) Tỷ lệ (%) Tổng số phôi 162 100 Phôi loại A 60 37,04 Phôi loại B 55 33,95 Phôi loại C 47 29,01
Qua bảng 4.11 cho thấy: trong trong số 162 phôi thu ựược có 60 phôi loại A chiếm tỷ lệ 37,04%; 55 tế bào phôi loại B chiếm 33,95% còn lại là 29,01% phôi loại C. Phôi loại A, B và C là những phôi có khả năng cấy tươi nhưng ựể tỷ lệ phôi sống sau ựông lạnh-giải ựông cao chúng tôi chỉ sử dụng những phôi loại A và B. Tổng số phôi ựủ tiêu chuẩn ựông lạnh là 115 ựạt tỷ lệ 70,99%. Phôi loại C là phôi không ựủ tiêu chuẩn ựể ựông lạnh.
Như vậy trong 162 phôi có 115 phôi dâu, phôi nang ựủ tiêu chuẩn ựông lạnh. Kết quả ựánh giá phôi trước ựông lạnh ựược trình bầy qua bảng 4.12
Trước ựông lạnh, tỷ lệ phôi loại A là 53,04%, tỷ lệ phôi loại B là 46,96%. Tỷ lệ phôi dâu ựược ựông lạnh là 57,39% trong khi ựó tỷ lệ phôi nang là 42,61%. Tỷ lệ phôi loại A ựược ựông lạnh cao hơn phôi loại B và tỷ lệ phôi dâu ựông lạnh có chiều hướng cao hơn phôi nang.
Bảng 4.12. đánh giá phân loại phôi trước ựông lạnh
Chất lượng phôi
Phôi loại A Phôi loại B
Loại phôi Số lượng (n) Tỷ lệ (%) n % n % Phôi dâu 66 57,39 40 60,60 26 39,40 Phôi nang sớm 49 42,61 21 42,86 28 57,14 Tổng số 115 100 61 53,04 54 46,96
Sự khác nhau về sự sống của trạng thái phát triển có liên quan ựến sự khác nhau về kắch thước tế bào trong quá trình phát triển, ựến sự biến ựổi về tắnh thẩm thấu của màng tế bào, ựến sự thay ựổi tắnh thẩm thấu này với nhiệt ựộ. Phôi nang 6-8 ngày tuổi có màng trong suốt có sức kháng cơ học với biến ựổi nhiệt ựộ tốt hơn và hạn chế tổn hại hơn. Polge và cs (1974)[43] cho rằng ở bò phôi nang sớm nên chọn ựể ựông lạnh và giải ựông; phôi nang giãn nở có khả năng nhạy cảm hơn phôi dâu muộn và phôi nang sớm vì tầm
vóc của phôi mầm phôi và xoang phôi phát triển hơn (Willadsen (1980)[54]). Tuy nhiên sức kháng cơ học khi xoang phôi lớn sẽ kém hơn với biến ựổi nhiệt ựộ và tỷ lệ tế bào sống sau ựông lạnh-giải ựông cao nên khả năng hồi phục tốt hơn. Cũng theo nghiên cứu của nhiều tác giả thấy rằng chọn phôi dâu và phôi nang ựể ựông lạnh là thắch hợp nhất vì phôi dâu và phôi nang có màng trong suốt có sức kháng cơ học tốt trong quá trình biến ựổi nhiệt ựộ và ắt tổn hại, ắt ảnh hưởng tới chất lượng phôi. Do vậy trong thực tế nên sử dụng phôi dâu và phôi nang sớm ựể ựông lạnh.