cơ sở khả năng sinh tổng hợp beta-carotene
Cấy cùng tỷ lệ giống khoảng 2 x 107 CFU/g môi trường và tiến hành LBR 8 chủng nấm men Rhodotorula phân lập được trong cùng điều kiện. Khảo sát khả năng sinh tổng
hợp beta-carotene của chúng ở ngày lên men thứ 7 trên môi trường cơ bản. Kết quả thu được thể hiện ở bảng 3.3.
Bảng 3.3 Khả năng sinh tổng hợp beta-carotene của các chủng nấm men Rhodotorula trên môi trường cơ bản
Chủng nấm men Hàm lượng beta-carotene (ppm theo CK)
MN1 14,48 3,81c MN5 27,77 7,03 b MN7 3,98 0,97 d MN8 4,42 1,43d MN10 16,70 2,18 c MN12 42,55 3,57 a MN16 5,10 2,06 d MN17 2,46 0,42 d
(Các giá trị có chỉ số mũ khác nhau thì khác nhau có ý nghĩa ở mức = 0,05)
Kết quả thí nghiệm cho thấy, bốn nấm men có ký hiệu MN7, MN8, MN16 và MN17 hầu như không phát triển trên môi trường cơ bản đã chọn. Bốn chủng giống có ký hiệu MN1, MN5, MN10 và MN12 có khả năng LBR và sinh tổng hợp beta-carotene trên môi trường cơ bản, tuy nhiên hàm lượng beta-carotene do bốn chủng nấm men này tổng hợp không giống nhau và khác biệt ở mức ý nghĩa = 0,05.
Bảng 3.3 cho thấy MN12 là nấm men có khả năng sinh tổng hợp beta-carotene cao nhất (xem kết quả phân tích HPLC ở phụ lục 5.7.1 và phân tích anova ở phụ lục 5.7.2), do đó MN12 được chọn làm chủng giống nghiên cứu chính.
Bên cạnh phương pháp định danh dựa vào các đặc điểm sinh lý, sinh hóa theo khoá phân loại của Kreger-van Rij (1984), mẫu nấm men MN12 cũng được gửi đến Công ty Nam Khoa để định danh.
Bằng phương pháp giải trình tự 28S ADN và tra cứu trên blast search, kết quả định danh nấm men MN12 thu được như sau:
Hình 3.3 Trình tự nucleotid đoạn 28S ADN
Hình 3.4 Giải trình tự 28S ADN của chủng MN12
- Tra cứu trên bằng phần mềm blast search:
Hình3.5 Kết quả tra cứu trình tự 28S ADN của chủng MN12
Qua việc giải trình tự 28S ADN và tra cứu trên blast search, cho kết quả với độ tương
đồng 100% với chủng Rhodotorula sp. CBS 10104 trong dữ liệu ngân hàng NCBI
(xem phụ lục 5.8). Vậy trong nghiên cứu này, để thuận lợi cho việc trình bày chúng tôi gọi nấm men Rhodotorula sp.3 (MN12) là Rhodotorula.