lang nuôi cấy bởi hai phương pháp khác nhau.
Ba loại giá thể ra cây ngoài vườn ươm ựược sử dụng là: cát sạch, trấu hun và + cát sạch (tỷ lệ 1:1). Kết quả theo dõi các chỉ tiêu ựánh giá sau 2 tuần thắ nghiệm ựược trình bày trong bảng 3.11, hình 3.24, hình 3.25.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 67
Bảng 3.11. Ảnh hưởng của giá thể ựến số cây sống, tỉ lệ sống và chiều cao cây của cây có nguồn gốc in vitro
Giá thể Tỷ lệ sống (%) Chiều cao cây (cm) Chất lượng cây TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3
Cây in vitro nuôi cấy truyền thống
Cát 51,86 52,59 71,48 6,00 6,21 6,04 - - -
Cát + trấu hun 80,37 75,20 77,78 7,62 7,69 7,31 + + +
Trấu hun 73,70 78,52 73,33 6.74 6,91 6,74 + + +
Cây in vitro nuôi cấy thoáng khắ
Cát 100 100 99,26 10,81 10,45 10,29 + + +
Cát + trấu hun 99,63 100 100 12,61 12,45 12,34 ++ ++ ++
Trấu hun 100 100 97,41 11,61 11,54 11,29 ++ ++ ++
CV% 1,1 1,2 1,0 0,40 0,30 0,40
LSD5% 1,68 1,80 1,61 0,63 0,44 0,57
Hình 3.24. Ảnh hưởng của phương pháp nuôi cấy ựến khả năng thắch nghi của cây con khoai lang ngoài vườn ươm
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 68
Hình 3.25. Ảnh hưởng của phương pháp nuôi cấy và giá thể ựến sinh trưởng cây con giống khoai lang ngoài vườn ươm
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 69
Hình 3.26. Ảnh hưởng của giá thể và ựiều kiện nuôi cấy ựến sinh trưởng của cây có nguồn gốc in vitro
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 70
Qua bảng số liệu 3.11, hình 3.24, 3.25 và 3.26 cho thấy, tất cả các công thức sử dụng cây con ựược tạo bởi phương pháp nuôi cấy in vitro thoáng khắ cho tỷ lệ sống cao hơn nhiều so với các công thức sử dụng cây nuôi cấy truyền thống. Tỷ lệ cây sống ở các công thức nuôi cấy thoáng khắ cho ựạt từ 97,41% - 100% (so với 51,86% - 80,37% ở phương pháp nuôi cấy truyền thống). Trong ựó, với giá thể cát sạch trộn trấu hun (tỷ lệ 1:1) cho tỷ lệ sống ựạt cao nhất ựối với cả 2 phương pháp nuôi cấy truyền thống (từ 99,63% - 100%) và phương pháp nuôi cấy truyền thống (75,20% - 80,37%). Không có sự chênh lệch lớn giữa các tổ hợp khoai lang ựược thử nghiệm.
Tiến hành ựánh giá kết quả theo dõi các chỉ tiêu chiều cao và chất lượng của cây con ngoài vườn ươm sau 2 tuần thắch nghi ở các công thức thắ nghiệm cho thấy, cây con nuôi cấy bằng phương pháp thoáng khắ khi ra vườn ươm ựều sinh trưởng phát triển tốt, lá dày và sậm màu hơn, cho từ gần 5 Ờ 9 lá mới, cao hơn, ựốt thân dày hơn cây to mập khỏe hơn rất nhiều và ựặc biệt không bị rụng lá gốc (lá của cây mô) so với cây con nuôi cấy truyền thống chỉ cho từ gần 4 ựến gần 6 lá, ựốt thân thưa, cây gầy nhỏ và rụng gần như hết lá gốc.
Như vậy, có thể kết luận:
-Cây con ựược nuôi cây bằng phương pháp thoáng khắ có khả năng thắch nghi cao hơn, sinh trưởng phát triển sau thắch nghi tốt hơn hẳn cây con ựược nuôi cây bằng phương pháp kắn khắ truyền thống;
-Giá thể phù hợp cho ra ngôi cây khoai lang in vitro là trấu hun + cát sạch trộn theo tỷ lệ 1:1.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 71
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 72
KẾT LUẬN VÀ đỀ NGHỊ
Từ những kết quả nghiên cứu chúng tôi rút ra một số kết luận sau: 1) để nhân giống khoai lang bằng ựoạn thân mang mắt ngủ trong ựiều kiện in vitro sử dụng dung dịch hoá chất HgCl2 0,1% trong 10 phút ựể khử trùng mẫu là thắch hợp nhất cho tỷ lệ mẫu sống từ 54,33 Ờ 56,67%;
2) Môi trường phù hợp cho nhân nhanh chồi khoai lang in vitro là môi trường MS + 1,0 mg/l BAP + 0,5 mg/l IAA + 20% nước dừa + 3% Saccarose + 0,8% Agar, pH = 5,8. cho hệ số nhân chồi ựạt 3,96 ựến 4,15 chồi/ mắt ngủ.
3) Môi trường ra rễ tối ưu cho chồi khoai lang là MS + 0,3 mg/l α Ờ NAA + 3% Saccarose + 0,8% Agar, pH = 5,8. ựạt số rễ trung bình 3,04 -3,06 rễ/chồi và chiều dài trung bình của rễ ựạt 8,66 Ờ 8,07cm;
4) Sinh trưởng, chất lượng chồi và chất lượng rễ nuôi cấy trong ựiều kiện thoáng khắ ựạt 8,5 -8,8 lá/chồi, 6,60 Ờ 6,92cm/chồi, 3,84 Ờ 4,01 rễ/chồi, 9,81 -10,00cm/rễ, tỷ lệ cây sống khi thắch nghi ngoài vườn ươm là 100% ựạt từ 10,29 Ờ 12,61cm/cây tốt hơn so với ựiều kiện nuôi cấy kắn khắ truyền thống chỉ ựạt 6,8 Ờ 7,0 lá/chồi, 5,01 Ờ 5,22cm/chồi., 3,04 Ờ 3,06 rễ/chồi, 8,65 Ờ 8,71cm/rễ, tỷ lệ cây sống khi thắch nghi ngoài vườn ươm chỉ từ 51,86 Ờ 80,37%, ựạt từ 6,00 Ờ 7,69cm/cây;
5) Giá thể ra ngôi phù hợp cho cây con nuôi cấy in vitro là trấu hun + cát sạch trộn với tỷ lệ 1:1;
Căn cứ vào thực tế nghiên cứu tác giả ựề nghị :
Cần tiếp tục hoàn thiện quy trình kỹ thuật nuôi cấy thoáng khắ trên ựối với khoai lang bằng ựoạn thân mang mắt ngủ với môi
trường cải tiến rẻ hơn và hiệu quả hơn như sử dụng túi nilon thoáng khắ, nuôi bằng ánh sáng tự nhiên...
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 73
PHỤ LỤC PHỤ LỤC 1