Kinetin thực chất là một dẫn xuất của bazơ nitơ adenin. Kinetin là các chất ựiều tiết sinh trưởng thuộc nhóm cytokinine chúng có tác dụng kắch thắch sự phân chia tế bào, kéo dài thời gian hoạt ựộng của tế bào phân sinh và làm hạn chế sự già hóa của tế bào (Nguyễn đức Thành, 2000; Nguyễn Như Khanh, 2002). Cytokinine ựược dùng ựể kắch thắch sự phát sinh chồi, kắch thắch phân chia tế bào. (Narayaswamy, 1994). để xác ựịnh ảnh hưởng của nồng ựộ Kinetin ựến hệ số nhân chồi, số lá trung bình/ chồi và chiều cao trung bình của chồi, thắ nghiệm ựã tiến hành bổ sung nồng ựộ Kinetin từ mức 0,5 mg/l ựến 2,0 mg/l vào môi trường nuôi cấy (MTN = MS + 3% succarose + 0,8% agar, pH=5,8). Kết quả theo dõi, ựánh giá các chỉ tiêu hệ số nhân chồi, chiều cao trung bình và số lá trung bình/chồi sau 4 tuần nuôi cấy ựược trình bày tại bảng 3.4 và biểu diễn trực quan bằng biểu ựồ ở hình 3.5 và hình 3.6
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 42
Bảng 3.4. Ảnh hưởng của nồng ựộ Kinetin ựến số lá trung bình, chiều cao trung bình và hệ số nhân chồi sau 4 tuần nuôi cấy
Nồng ựộ KIN
Số lá TB Chiều cao TB (cm) Hệ số nhân chồi
TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 0mg/l 4,1 4 3,9 3,2 3,4 3,4 1,06 1,06 1,04 0,5mg/l 4,4 4,6 4,6 4,5 4,4 4,3 1,55 1,54 1,40 1,0mg/l 5,3 5,6 5,4 5 5,2 5,2 2,26 2,21 2,14 1,5mg/l 5 5 5 4,7 4,8 4,7 1,76 1,66 1,51 2,0mg/l 4,5 4,6 4,6 4,5 4,5 4,3 1,29 1,25 1,20 CV% 1,3 1,8 1,6 LSD5% 0,38 0,5 0,43
Hình 3.5. Ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng KIN ựến khả năng nhân chồi 3 tổ hợp khoai lang
Qua số liệu trình bày tại bảng 3.4 và quan sát biểu ựồ tại hình 3.5 cho thấy, khi bổ sung chất ựiều tiết sinh trưởng KIN với các nồng ựộ khác nhau vào môi trường nuôi cấy ựã kắch thắch khả năng tạo chồi của 3 tổ hợp khoai lang CIP29 x CL6;VC971 x Dâu ựỏ; và KLT10 x HL6 Ờ 3. Nghĩa là có sự phân hóa mạnh hình thành các cụm chồi từ một mẫu cấy. Cụ thể, khi bổ sung với nồng ựộ KIN tăng dần từ 0,5 mg/l ựến 1,0 mg/l KIN vào môi trường nuôi
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 43
cấy thì hệ số nhân chồi của mẫu cấy tại 3 tổ hợp khoai lang thắ nghiệm ựều tăng cao (từ 1,40 lần ựến 2,26 lần). Trong khi ựối chứng chỉ ựạt 1,04 Ờ 1,06 lần ở các tổ hợp. Như vậy KIN ựã có ảnh hưởng mạnh mẽ tới việc phát sinh ựa chồi. Tuy nhiên, khi nâng nồng ựộ của chất ựiều tiết sinh trưởng KIN từ 1,0mg/l lên 1,5 mg/l ựến 2,0 mg/l thì hệ số nhân chồi lại có sự giảm xuống (từ 2,26 lần xuống còn 1,76 - 1,20 lần). Như vậy, trong các công thức thắ nghiệm trên thì công thức bổ sung 1,0 mg/l KIN cho hiệu quả tốt hơn so với các công thức còn lại. Kết quả phân tắch thống kê hệ số nhân chồi ở các tổ hợp khoai lang thắ nghiệm cho thấy có sự sai khác rõ rệt giữa các công thức thắ nghiệm với mức ý nghĩa 95%. điều này ựồng nghĩa với việc thắ nghiệm có ựộ tin cậy cho phép. Kết quả bổ sung KIN với nồng ựộ 1,0 mg/l cho hệ số nhân chồi của các tổ hợp khoai lang ựạt lần lượt là 2,26 lần (tổ hợp CIP29 x CL6); 2,21 lần (tổ hợp VC971 x Dâu ựỏ) và 2,04 lần (tổ hợp KLT10 x HL6 Ờ 3).
Tiến hành ựánh giá ảnh hưởng của các mức nồng ựộ KIN ựến chiều cao trung bình của chồi và số lá trung bình/chồi tại 3 tổ hợp khoai lang thắ nghiệm không có sự chênh lệch quá lớn. Các công thức có bổ sung KIN thì chiều cao trung bình ựạt từ 4,3 Ờ 5,2 cm và số lá trung bình ựạt từ 4,4 ựến 5,6 lá. Trong khi tại ựối chứng số lá chỉ ựạt trung bình từ 3,9 ựến 4,1 và chiều cao trung bình chỉ từ 3,2 Ờ 3,4cm. Kết quả cho thấy, chiều cao của chồi mẫu cấy của 3 tổ hợp ựạt trung bình cao nhất tại công thức bổ sung 1,0 mg/l KIN vào môi trường nền nuôi cấy.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 44
Hình 3.6. Ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng KIN ựến số lá và chiều cao trung bình của chồi ở 3 tổ hợp khoai lang
Hình 3.6 cho thấy, ảnh hưởng của chất ựiều tiết sinh trưởng KIN ựến chiều cao và số lá/chồi của các tổ hợp khoai lang thắ nghiệm. Tuy nhiên, với các công thức thắ nghiệm khác nhau khi bổ sung các nồng ựộ KIN khác nhau thì số lá và chiều cao trung bình của chồi không có sự chênh lệch ựáng kể; ựồng thời sự chênh lệch giữa các tổ hợp khoai lang nuôi cấy cũng là không ựáng kể. Tuy nhiên, so sánh giữa ựối chứng môi trường nuôi cấy không bổ sung chất kắch thắch sinh trưởng KIN thì có sự khác nhau rõ rệt cả về số lá và chiều cao. Với các công thức có bổ sung nồng ựộ KIN với các mức khác nhau cho số lá nhiều hơn ựối chứng lên tới hơn 1 lá và chiều cao cao hơn ựối chứng 1,8cm. Quan sát và ựánh giá chất lượng chồi mẫu cấy sau 4 tuần theo dõi cho thấy tất cả các mẫu cấy tại các công thức thắ nghiệm có bổ sung KIN ựều cho chất lượng chồi bình thường (thân chồi và lá vừa phải, lá có màu xanh nhạt).
Như vậy, với kết quả nghiên cứu ựược ựánh giá như trên tác giả nhận thấy môi trường thắch hợp hơn cả cho quá trình nhân chồi in vitro của 3 tổ hợp khoai lang CIP29 x CL6; VC971 x Dâu ựỏ và KLT10 x HL6 Ờ 3 là môi trường MTN bổ sung 1,0 mg/l KIN cho hệ số nhân chồi ựạt 2,04 Ờ 2,26 lần.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 45