x HL6 Ờ 3. Trong ựó, 2 môi trường nuôi cấy bổ sung 1,0 mg/l Ki và 1,0 mg/l BAP cho hệ số nhân chồi và chất lượng chồi của 3 tổ hợp khoai lang thắ nghiệm tốt hơn so với môi trường nuôi cấy bổ sung GA3. Như vậy, hai chất ựiều tiết sinh trưởng Ki và BAP bổ sung vào môi trường nuôi cấy MS với nồng ựộ 1,0 mg/l ựều có thể ựược sử dụng cho quá trình nhân nhanh in vitro
chồi khoai lang. đề tài ựã tiến hành sử dụng chất ựiều tiết sinh trưởng BAP với nồng ựộ 1,0 mg/l bổ sung vào môi trường nền nuôi cấy cho các nghiên cứu tiếp theo.
3.3. Ảnh hưởng của tổ hợp BAP và IAA ựến khả năng nhân nhanh chồi khoai lang khoai lang
Sự kết hợp giữa các chất ựiều tiết sinh trưởng nhóm auxin và cytokinine trong nuôi cấy in vitro có vai trò quyết ựịnh sự phân hóa mô của tế bào thực vật theo hướng tạo chồi, tạo rễ hay hình thành mô sẹo. Nồng ựộ cytokinine/auxin cao kìm hãm sự hình thành chồi và kắch thắch sự phát triển của rễ. Ngược lại tỷ lệ cytokinine/auxin thấp kắch thắch sự hình thành rễ và ức chế sự hình thành chồi (Narayaswamy, 1994).
Tại Việt Nam cũng như trên Thế giới, ựã có nhiều công trình nghiên cứu chứng minh việc bổ sung phối hợp nồng ựộ của BAP và IAA ựã cho khả năng nhân chồi hiệu quả ựối với một số loài cây thân thảo, cây thân gỗ và ựặc biệt là các cây trồng nông nghiệp.
đề tài tiến hành nghiên cứu ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng IAA với các nồng ựộ 0,1 mg/l; 0,3 mg/l; 0,5 mg/l và 0,7 mg/l trên môi trường MS + 3% Saccarose + 0,8% Agar + 1,0 mg/l BAP. Kết quả ựánh giá ảnh hưởng của tổ hợp BAP và IAA (cytokinin/auxin) ựến khả năng nhân chồi và chất lượng chồi khoai lang ở 3 tổ hợp. Kết quả thắ nghiệm ựược theo dõi sau 4 tuần nuôi cấy trình bày cụ thể tại bảng 3.6, hình 3.12 và hình 3.13.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 52
Bảng 3.6. Ảnh hưởng của tổ hợp BAP 1,0mg/l với IAA ở các nồng ựộ khác nhau ựến số lá, chiều cao trung bình chồi và hệ số nhân chồi khoai lang
Nồng ựộ IAA
Số lá TB Chiều cao TB (cm) Hệ số nhân chồi
TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 0mg/l 5,80 5,90 5,70 5,50 5,80 5,60 2,44 2,41 2,28 0,1mg/l 5,80 5,80 5,70 5,60 5,80 5,70 2,71 2,64 2,54 0,3mg/l 5,70 5,90 6,00 5,90 6,10 6,00 2,94 2,87 2,82 0,5mg/l 6,00 6,10 6,20 6,20 6,30 6,30 3,42 3,36 3,26 0,7mg/l 5,80 5,90 5,80 5,40 5,60 5,30 2,79 2,76 2,73 CV% 0,7 0,9 0,7 LSD5% 0,37 0,46 0,37
Hình 3.12. Ảnh hưởng của tổ hợp 1,0mg/l BAP và IAA với các nồng ựộ khác nhau ựến
khả năng nhân chồi khoai lang in vitro
Kết quả ựánh giá cho thấy, môi trường bổ sung 1,0mg/l BAP kết hợp với IAA ở các mức nồng ựộ khác nhau ựều có ảnh hưởng tới hệ số nhân chồi và nâng cao chất lượng chồi so với môi trường ựối chứng.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 53
Kết quả bảng 3.6 và hình 3.12 cho thấy, với hàm lượng BAP 1,0 mg/l cùng việc bổ sung nồng ựộ IAA vào môi trường nuôi cấy tăng dần tử 0,1 mg/l ựến 0,5 mg/l thì hệ số nhân chồi có tỷ lệ thuận tăng lên từ 2,71 lên 3,42 lần với tổ hợp CIP29 x CL6; từ 2,64 ựến 3,36 lần với tổ hợp VC971 x Dâu ựỏ và từ 2,54 ựến 3,26 lần với tổ hợp KLT10 x HL6 Ờ 3. Khi tiếp tục tăng nồng ựộ IAA ựến 0,7 mg/l thì hệ số nhân chồi ở cả 3 tổ hợp khoai lang nuôi cấy in vitro ựều giảm xuống. Kết quả phân tắch thống kê hệ số nhân chồi với mức ý nghĩa 95% cho thấy các công thức thắ nghiệm khác nhau có sự sai khác có ý nghĩa.
Như vậy, công thức bổ sung 0,5 mg/l IAA so với môi trường ựối chứng cho hiệu quả tốt nhất ựến khả năng nhân nhanh chồi khoai lang in vitro trên cả 3 tổ hợp thắ nghiệm (ựạt 3,26 Ờ 3,42 lần).
Hình 3.13. Ảnh hưởng của tổ hợp 1,0mg/l BAP và IAA với các nồng ựộ khác nhau ựến số lá và chiều cao trung bình của chồi khoai lang
Quá trình ựánh giá các chỉ tiêu chiều cao và số lá trung bình trên chồi của các công thức thắ nghiệm (hình 3.13) cho thấy, sử dụng kết hợp nồng ựộ 1,0 mg/l BAP và 0,5 mg/l IAA cho chiều cao chồi ựạt trung bình 6,30 cm và trung bình
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 54
6,20 lá/ chồi; không có sự chênh lệch về chiều cao và số lá/chồi giữa các tổ hợp khoai lang thắ nghiệm.
đánh giá cảm quan chất lượng chồi ở các công thức thắ nghiệm cho thấy, việc sử dụng kết hợp nồng ựộ 1,0mg/l BAP và IAA cho chất lượng chồi tốt, chồi nuôi cấy sau 4 tuần theo dõi khỏe mạnh, cứng cáp, lá xanh tốt.
Từ các kết quả ựánh giá trên cho thấy, môi trường nuôi cấy MS + 3% Saccarose + 0,8% Agar + 1,0 mg/l BAP + 0,5 mg/l IAA hiệu quả nhất cho quá trình nhân nhanh chồi khoai lang in vitro cho 3 tổ hợp CIP29 x CL6; VC971 x Dâu ựỏ và KLT10 x HL6 Ờ 3.