BAP (6-Benzylaminopurine hay benzyl adenine còn gọi là BA) cũng là một cytokinine tổng hợp nhân tạo nhưng có hoạt tắnh mạnh hơn Kinetin. Giống như Kinetin, BAP có tác dụng kắch thắch sự hình thành chồi mới, tác ựộng tới quá trình phân chia tế bào, ựặc biệt ựây là chất ựược sử dụng rộng rãi trong nghiên cứu nhân ựa chồi tổ hợp in vitro nhiều loại cây trồng. Thắ nghiệm sử dụng môi trường nền (MTN = MS + 3% Saccarose + 0,8% Agar, pH = 5,8) có bổ sung nồng ựộ BAP với các mức khác nhau: 0,5 mg/l; 1,0 mg/l; 1,5 mg/l và 2,0 mg/l. Kết quả nghiên cứu của thắ nghiệm ựược theo dõi sau 4 tuần nuôi cấy trình bày và mô phỏng tại bảng 3.5, hình 3.7, 3.8:
Bảng 3.5. Ảnh hưởng của nồng ựộ BAP ựến số lá và chiều cao trung bình của chồi và hệ số nhân chồi sau 4 tuần nuôi cấy
Nồng ựộ BAP
Số lá TB Chiều cao TB (cm) Hệ số nhân chồi
TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 TH1 TH2 TH3 0mg/l 4,1 4,0 3,9 3,2 3,4 3,4 1,09 1,07 1,06 0,5mg/l 4,8 4,8 4,6 4,6 4,5 4,3 1,69 1,69 1,57 1,0mg/l 5,8 5,9 5,7 5,5 5,8 5,6 2,44 2,41 2,28 1,5mg/l 5,3 5,3 5,2 5,0 5,0 5,1 1,82 1,76 1,65 2,0mg/l 4,7 4,8 4,6 4,6 4,7 4,9 1,46 1,34 1,26 CV% 0,8 1,1 1,7 LSD5% 0,26 0,34 0,47
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 46
Hình 3.7. Ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng BAP ựến khả năng nhân chồi 3 tổ hợp khoai lang
Từ các kết quả trình bày tại bảng 3.5 và hình 3.7 cho thấy, bổ sung chất ựiều tiết sinh trưởng BAP vào môi trường nuôi cấy cho hiệu quả rõ rệt ựến hệ số nhân chồi của 3 tổ hợp khoai lang thắ nghiệm. Các công thức bổ sung BAP với các nồng ựộ tương ứng 0,5mg/l; 1,0mg/l; 1,5mg/l và 2,0 mg/l cho hệ số nhân chồi cao hơn hẳn so với công thức ựối chứng. Hệ số nhân chồi tại công thức ựối chứng gần như ựược coi là 1, nghĩa là mỗi mẫu chỉ cho 1 chồi. Trong khi ựó, các công thức bổ sung nồng ựộ BAP khác nhau cho hệ số nhân từ 1,26 ựến 2,44 lần. Ở công thức bổ sung 1,0mg/l BAP cho hệ số nhân chồi ựạt cao nhất ở cả 3 tổ hợp khoai lang CIP29 x CL6; VC971 x Dâu ựỏ và KLT10 x HL6 Ờ 3 tương ứng 2,44 lần; 2,41 lần và 2,28 lần. Khi nồng ựộ BAP tăng từ 0,5 mg/l lên 1,0mg/l thì hệ số nhân chồi cũng tăng theo tỷ lệ thuận từ 1,69 lên 2,44 lần ựối với tổ hợp thứ nhất CIP29 x CL6, từ 1,69 lên 2,41 lần ựối với tổ hợp thứ 2 VC971 x Dâu ựỏ và tăng từ 1,57 lên 2,28 lần nhưng khi tiếp tục tăng lên 1,5 mg/l và 2,0 mg/l thì hệ số nhân chồi có xu hướng giảm dần ở cả 3 tổ hợp (từ 2,44 → 1,82 → 1,46 lần ở tổ hợp CIP29 x CL6; từ 2,41 → 1,76 →
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 47
KLT10 x HL6 Ờ 3). Kết quả phân tắch thống kê hệ số nhân chồi với mức ý nghĩa 95% cho thấy sự sai khác có ý nghĩa giữa các công thức thắ nghiệm nằm trong khoảng cho phép. Cũng trong bảng 3.5 và hình 3.6 này thể hiển rõ một ựiều giữa 3 tổ hợp khoai lang CIP29 x CL6; VC971 x Dâu ựỏ và KLT10 x HL6 Ờ 3 không có sự sai khác quá lớn về hệ số nhân chồi.
đánh giá các chỉ tiêu chiều cao và số lá trung bình trên chồi ựược trình bày tại bảng 3.5 và hình 3.8 cho thấy, nồng ựộ BAP bổ sung vào môi trường nuôi cấy không ảnh hưởng lớn ựến các tổ hợp khoai lang thắ nghiệm. Chiều cao chồi mẫu nuôi cấy tại 3 tổ hợp thắ nghiệm ở các công thức bổ sung BAP trung bình ựạt từ 4,3 - 5,8 cm và số lá/chồi trung bình ựạt 4,6 Ờ 5,9 lá/chồi. Trong ựó, tổ hợp VC971 x Dâu ựỏ cho chiều cao chồi và số lá trung bình cao hơn so với 2 tổ hợp CIP29 x CL6 và KLT10 x HL6 Ờ 3.
Hình 3.8. Ảnh hưởng của nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng BAP ựến số lá và chiều cao trung bình của chồi 3 tổ hợp khoai lang
Khi ựánh giá cảm quan chất lượng các mẫu chồi nuôi cấy bằng chất ựiều tiết sinh trưởng BAP chất lượng mẫu chồi ựạt ựược khá tốt, chồi khỏe xanh, lá dày.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 48
Như vậy, nồng ựộ chất ựiều tiết sinh trưởng BAP cho tối ưu cho quá trình nhân chồi của 3 tổ hợp khoai lang CIP29 x CL6, VC971 x Dâu ựỏ và KLT10 x HL6 Ờ 3 là 1,0 mg/l.
Từ các kết quả nghiên cứu trên tổng hợp so sánh hệ số nhân chồi của 3 chất ựiều tiết sinh trưởng GA3, KIN và BAP ở nồng ựộ tối ưu tác giả trình bày cụ thể trong hình 3.9, hình 3.10 và hình 3.11.
Hình 3.9. Hệ số nhân chồi của 3 tổ hợp khoai lang trong môi trường nuôi cấy bổ sung
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 49
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 50
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 51
Môi trường nuôi cấy bổ sungmột trong ba chất ựiều tiết sinh trưởng GA3, KIN và BAP riêng rẽ có ảnh hưởng khác nhau ựến hệ số nhân chồi và chất