cấy
Hỗn hợp hạt của mỗi trong 3 tổ hợp lai: TH1: CIP29 x CL6, TH2: VC971 x Dâu ựỏ và TH3: KLT10 x HL6-3, sau khi phá ngủ ựược gieo trên nền hỗn hợp cát và chất hữu cơ hoai mục trong nhà lưới tại Viện Cây lương thực và Cây thực phẩm Gia Lộc, Hải Dương. Quần thể của mỗi tổ hợp có ắt nhất 50 cây con. Khi cây con ựược 3 tháng tuổi dùng dao sắc cắt phần ngọn có chứa chồi nách (mắt ngủ), loại bỏ bớt lá và rửa dưới vòi nước chảy 15 phút. Sử dụng dao sắc ựã khử trùng cắt ựoạn thân khoai lang thành những ựoạn ngắn 2,5 - 3cm chứa một mắt ngủ làm mẫu cấy sau này. Các phân ựoạn ựược cho vào cốc, rửa bằng nước xà phòng Omo (10ml xà phòng/2 lắt nước) trong 15 phút, rửa sạch xà phòng dưới vòi nước chảy 15 phút, sau ựó rửa 2 lần bằng nước cất vô trùng và thấm khô bằng giấy thấm mềm vô trùng trước khi ựưa vào buồng cấy.
Trong buồng cấy, mẫu ựược rửa bằng cồn 700 trong 30 giây rồi rửa sạch 3 lần bằng nước cất vô trùng trước khi sử dụng hóa chất khử trùng HgCl2 0,1% và NaClO 2%.
Môi trường nền (MTN) ựược sử dụng là môi trường MS (Murashige và Skoog, 1962), bổ sung 3% Saccarose + 0,8% Agar với pH = 5,8. Tất cả môi trường nuôi cấy (MTN và bổ sung các chất ựiều tiết sinh trưởng) ựược khử trùng ở 1210C trong 20 phút ở áp suất 1,4atm.
Tất cả thắ nghiệm nuôi cấy ựược lặp lại 3 lần, mỗi lần 10 bình tam giác 250 ml, mỗi bình chứa 4 mẫu cấy. Mẫu ựược nuôi cấy ựược ựặt dưới ựèn huỳnh quang cường ựộ 3000lux, 16h sáng/8h tối, ẩm ựộ không khắ tương ựối 70 - 80%, nhiệt ựộ phòng nuôi duy trì ở 27 ổ 20C.
Học viện Nông nghiệp Việt Nam Ờ Luận văn Thạc sỹ Khoa học Nông nghiệp Page 27