Phương pháp phân tắch các chỉ tiêu hóa sinh

Một phần của tài liệu đánh giá khả năng kháng bệnh mốc sương và các đặc tính nông sinh học của các con lai soma khoai tây sau dung hợp tế bào trần (Trang 54)

- Thắ nghiệm 2: đánh giá ựặc tắnh kháng mốc sương thông qua lây

2.3.8. Phương pháp phân tắch các chỉ tiêu hóa sinh

* Phương pháp ựịnh lượng ựường khử (phương pháp iod-Ixekutz)

Nguyên liệu: Dịch chiết ựược chuẩn bị theo phương pháp Bertrand Tiến hành: lấy 2 bình tam giác bình 1(ựối chứng),bình 2( thắ nghiệm). Cho vào bình 1: 5ml nước cất, bình 2: từ 2-5ml dịch chiết ựường, cho vào mỗi bình 10ml K3Fe(CN)6 0.05N. đun sôi 1 phút trên bếp ựiện, ựể nguội. Cho vào mỗi bình 10ml hỗn hợp (ZnSO4+ KI), 10ml CH3COOH10%.

Chuẩn ựộ bằng Na2S2O3 0.05N cho ựến màu vàng rơm. Thêm 3 giọt tinh bột (dung dịch chuyển màu xanh), chuẩn ựộ tiếp cho tới khi có màu trắng sữa

hoàn toàn.

* Phương pháp ựịnh lượng tinh bột

Nguyên tắc: Dưới tác dụng của axit tinh bột ựược thủy phân hoàn toàn thành ựường glucose. định lượng ựường khử, suy ra hàm lượng tinh bột.

Nguyên liệu: 2g củ khoai tây

Tiến hành: Nghiền 2g nguyên liệu, nghiền nhỏ, trộn ựều chuyển sang cốc. Cho vào cốc 100ml nước cất, khuấy ựều từ 45-60 phút. Sau ựó lọc bằng phễu có giấy lọc. Tráng cốc và rửa tinh bột nhiều lần bằng nước cất ựể loại toàn bộ ựường khử khỏi tinh bột.

Chuyển phễu lọc chứa tinh bột sang bình 250ml, dùng ựũa thủy tinh nhỏ chọc thủng giấy lọc, chuyển tinh bột xuống bình cầu bằng nước cất (80- 100ml). Sau ựó cho 125ml HCl 25% vào bình. đặt bình vào nồi cách thủy sôi, ựun nóng từ 3-4h, thỉnh thoảng lắc ựều. Sau khi kết thúc thủy phân tinh bột, làm nguội bình, trung hòa dịch thủy phân bằng NaOH 10%, dùng giấy quỳ thử sao cho dung dịch thủy phân không thừa kiềm. Sau ựó thêm 1-2 giọt HCl 25% ựể dung dịch thủy phân ựã ựược trung hòa có ựộ axit yếu. Chuyển toàn bộ dung dịch sang bình ựịnh mức 100ml, dùng nước cất ựịnh mức tới mức của bình. Khuấy ựều, lọc dung dịch, dung dịch lọc trong suốt, ựể ựịnh lượng ựường khử.

Một phần của tài liệu đánh giá khả năng kháng bệnh mốc sương và các đặc tính nông sinh học của các con lai soma khoai tây sau dung hợp tế bào trần (Trang 54)