nhà và trứng ếch đồng
Trong phạm vi của nghiên cứu này, chúng tôi chỉ mới lựa chọn 2 loại
môi trường để chiết rút RNase là đệm PBS 0,1M pH 7,4 và dung dịch H2SO4
0,25N. Đây là những loại môi trường thường được sử dụng để chiết rút enzym
từ các loại mô động vật do có những ưu điểm như: Dung dịch H2SO4 0,25N
có tác dụng vô hiệu hoá các enzym thuỷ phân có trong lizosom (bào quan giàu enzym trong các tế bào động vật), dung dịch đệm PBS 0,1M pH 7,4 có thành phần ion (chứa K+, Na+) gần giống với điều kiện trong tế bào, có pH trung tính.
Qua nghiên cứu chúng tôi rút ra kết luận sử dụng môi trường đệm PBS 0,1M pH 7,4 cho hiệu quả chiết rút RNase cao hơn, hoạt tính Ribonucleotic cũng thể hiện mạnh hơn trong môi trường này.
Tuy nhiên, trong thực tế còn nhiều loại môi trường khác cũng thường được sử dụng để chiết rút enzym như các dung dịch đệm Tris-HCl có pH trong vùng trung tính, đệm Citrate; các dung dịch saccaroza đẳng trương, ưu trương hay nhược trương. Do đó nếu có điều kiện có thể nghiên cứu kỹ hơn về môi trường chiết rút RNase để cho hiệu quả chiết rút tối ưu nhất.
4.2. Về kết quả nghiên cứu tính bền nhiệt của các RNase chiết rút từ trứng cóc nhà và trứng ếch đồng từ trứng cóc nhà và trứng ếch đồng
Qua nghiên cứu chúng tôi rút ra kết luận RNase từ trứng cóc nhà và trứng ếch đồng rất bền với nhiệt. RNase từ trứng cóc nhà có thể chịu được
trong điều kiện nhiệt độ ở 1000C trong 5 phút, trong khi RNase từ trứng ếch
kém bền nhiệt hơn một chút, chịu được trong điều kiện nhiệt độ ở 900C trong
5 phút. Đây là một đặc tính rất quan trọng cho phép chúng tôi sử dụng nhiệt độ để loại các protein tạp kém bền nhiệt. Kết quả điện di protein từ các mẫu
sau khi xử lý nhiệt cho thấy đã loại được phần lớn các protein tạp kém bền nhiệt. Đây là một đặc tính rất quan trọng và lý tưởng khi dùng nhiệt độ để loại các protein tạp kém bền nhiệt và là một bước quan trọng trong quá trình tinh sạch RNase từ trứng cóc nhà và trứng ếch đồng. Ngoài ra, đặc tính này cho phép chúng tôi dễ dàng và yên tâm hơn trong các quá trình thao tác thí nghiệm về sau (không sợ RNase bị phân hủy ở nhiệt độ phòng).
Đặc tính này cũng giống với các enzym trong siêu họ RNase A ở người nhưng lại rất khác biệt với RNase trong nọc của loài rắn hổ mang Naja oxiana
ở vùng Trung Á của Liên Xô cũ (mất hoạt tính hoàn toàn ở 700C).
4.3. Về sự phân bố hoạt tính RNase trong các phân đoạn protein thu được bằng phương pháp tủa phân đoạn bằng muối amoni sulfat