ELISA được mụ tả lần đầu tiớn văo năm 1971 vă từ đú đờ trở thănh một phương phõp được sử dụng ngăy căng rộng rời vă quan trọng hơn trong nghiớn cứu, chẩn đoõn vă xĩt nghiệm bởi vỡ nú cú khả năng phõt hiện nhạy bĩn với một lượng vật chất rất nhỏ.
ELISA đờ thay thế một số kỹ thuật huyết thanh “cổ điển“ phức tạp, cồng kềnh tốn nhiều thời gian hơn vă mở rộng phạm vi phương phõp phõt hiện virus cũng như cõc marker liớn quan đến sự nhiễm của chỳng.
Xĩt nghiệm ELISA cú thể được tiến hănh với một số phương phõp như ELISA “trực tiếp“, “giõn tiếp“, “sandwich“ vă “cạnh tranh“.
Nguyớn tắc cơ bản của phương phõp ELISA lă khõng nguyớn đờ hoă tan trong dung dịch đệm thớch hợp cú thể phủ lớn bề mặt plastic (như polystyrene). Quõ trỡnh năy cú thể lă trực tiếp hoặc thụng qua một khõng thể. Khi huyết thanh được thớm văo, cõc khõng thể cú thể kết hợp với khõng nguyớn ở pha đặc (solid phase).
Xĩt nghiệm ELISA được thực hiện trong đĩa plastic kớch thước 8cm x 12cm, chứa 8x12 giếng. Mỗi giếng cú chiều cao khoảng 1cm vă đường kớnh lă 0,7cm (Hỡnh 3.4).
Hỡnh 3.4: éĩa plastic sử dụng để tiến hănh xĩt nghiệm ELISA
Cõc khõng thể sử dụng trong phương phõp ELISA được gắn với enzyme bằng liớn kết đồng hoõ trị. Khõng nguyớn được gắn với giếng plastic vă khõng thể liớn kết với enzyme được gắn với khõng nguyớn. Khõng thể khụng gắn khõng nguyớn sẽ bị rửa trụi đi. Enzyme được giữ lại vă vỡ vậy lượng khõng thể gắn enzyme được phõt hiện bằng cõch cho thớm văo một cơ chất lăm thay đổi mău do hoạt tớnh của enzyme. éộ mău tạo thănh lă tỉ lệ với lượng enzyme bõm ở giếng plastic, từ đú suy ra lượng khõng thể, sau đú tiếp tục suy ra lượng khõng nguyớn (Hỡnh 3.5).
Tớnh nhạy của ELISA lă do sự khuyếch đại bởi hoạt tớnh enzyme. Mỗi một phđn tử enzyme bõm văo khõng thể cú thể tạo ra hăng ngăn phđn tử mău do hoạt tớnh enzyme. Trước khi cõc khõng thể gắn enzyme cú thể được sử dụng rộng rời, cõc khõng thể phúng xạ đờ được sử dụng trong kỹ thuật miễn dịch phúng xạ (radio immuno assays-RIA). Kỹ thuật RIA như lă một đột phõ cú ý nghĩa vă người sõng tạo ra nú lă Rosalyn Yalow đờ được nhận giải thưởng Nobel Sinh lý vă Y học văo năm 1977.