... phóng xạ .25 2. 11 .2 Phương pháp đánh dấu 29 2. 11 .2. 1 Phương pháp nick – translation .29 2. 11 .2. 2 Phương pháp random priming (thiết lập mồi ngẫu nhiên) 30 2. 11 .2. 3 Phương pháp ... 36 2. 12. 1.3 Khái niệm lai phân tử 37 2. 12. 1.4 Các yếu tố ảnh hưởng đến lai phân tử 37 2. 12. 2 Các kiểu lai phân tử .37 2. 12. 2.1 Lai pha lỏng 37 2. 12. 2 .2 Lai ... 32 2.11 .2. 4 Phương pháp photobiotin 32 2. 12 Các phương pháp lai phân tử 35 2. 12. 1 Cơ sở lai phân tử 35 2. 12. 1.1 Khái niệm nhiệt độ nóng chảy DNA 35 2. 12. 1.2...
... SOUTHERN BLOT, NORTHERN BLOT VÀ WESTERN BLOT Bảng 2. 1 Những điểm khác Southern blot, Northern blot Western blotSouthernblot Northern blot Western blot 1) Chiết xuất DNA từ tế bào 1) Chiết xuất ... pháp Southernblot có vai trò chẩn đoán bệnh di truyền khám phá vi khuẩn chủng vi rút gây bệnh (Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang, 20 01) 2. 4 SỰ KHÁC NHAU GIỮA SOUTHERN BLOT, NORTHERN BLOT VÀ WESTERN BLOT ... - 2a, phl - 2b B2BF, BRR4 thiết kế dựa trình tự gen phlD có vai trò việc tổng hợp chất 2, 4 – DAPG (2, 4 Diacetylphloroglucinol) Đây chất kháng sinh sinh học, giúp trồng kháng với số nấm bệnh 2. 9...
... Gel Doc 20 00 phân tích kết 3.3 .2. 4 Thiếtlậpphản ứng cắt genomic DNA enzyme giới hạn * Thiếtlậpphản ứng Sử dụng enzyme cắt giới hạn BamH I, Eco RV Hind III để cắt genomic DNA, thiếtlậpphản ... phlA, phlC, phlB cần thiết cho trình chuyển đổi MAPG thành DAPG Sử dụng cặp primer Phl2a Phl2b phát 2, 4 – DAPG * Thực phản ứng PCR µl DNA 10X PCR buffer 2, 5 µl dNTP 2, 5 µl MgCl2 0,75 µl Primer 1 ... trong: Khuếch đại trình tự 629 bp B2BF: ACCCACCGCAGCATCGTTTATGAGC BRR4: CGCCGGTATGGAAGATGAAAAAGTC 49 Trình tự primer thiết kế gen phlD Hình 3 .2 Tổ hợp gen sinh tổng hợp chất 2, 4 – DAPG Trong gen...
... Gel Doc 20 00 phân tích kết 3.3 .2. 4 Thiếtlậpphản ứng cắt genomic DNA enzyme giới hạn * Thiếtlậpphản ứng Sử dụng enzyme cắt giới hạn BamH I, Eco RV Hind III để cắt genomic DNA, thiếtlậpphản ... phlA, phlC, phlB cần thiết cho trình chuyển đổi MAPG thành DAPG Sử dụng cặp primer Phl2a Phl2b phát 2, 4 – DAPG * Thực phản ứng PCR µl DNA 10X PCR buffer 2, 5 µl dNTP 2, 5 µl MgCl2 0,75 µl Primer 1 ... trong: Khuếch đại trình tự 629 bp B2BF: ACCCACCGCAGCATCGTTTATGAGC BRR4: CGCCGGTATGGAAGATGAAAAAGTC 49 Trình tự primer thiết kế gen phlD Hình 3 .2 Tổ hợp gen sinh tổng hợp chất 2, 4 – DAPG Trong gen...
... B2BF, BRR4; L: Ladder (thang chuẩn 1000 bp) b) Sản phẩm PCR mẫu 130, 129 , 121 , 4, 28 với hai cặp primer B2BF, BRR4 phl - 2a, ph l- 2b 62 Chúng thực phản ứng PCR dòng số (2P24), 28 , 129 , 130, 121 , ... enzyme - 20 oC 4.3 KẾT QUẢ PHẢN ỨNG PCR VỚI HAI CẶP PRIMER B2BF, BRR4 VÀ Phl 2a, Phl - 2b Hình 4.5 Sản phẩm PCR với cặp primer B2BF, BRR4 ph l- 2a, ph l- 2b a) Sản phẩm PCR mẫu số 4, 28 , 129 , 130 ... ( 12 giờ; 16 giờ) khác nhau, khẳng định quitrình lai ổn định, phản ứng đánh dấu DNA sử dụng làm probe thành công 69 Phần KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 KẾT LUẬN Chúng bước đầu thiếtlậpquitrình Southern...
... SOUTHERN BLOT, NORTHERN BLOT VÀ WESTERN BLOT Bảng 2. 1 Những điểm khác Southern blot, Northern blot Western blotSouthernblot Northern blot Western blot 1) Chiết xuất DNA từ tế bào 1) Chiết xuất ... pháp Southernblot có vai trò chẩn đoán bệnh di truyền khám phá vi khuẩn chủng vi rút gây bệnh (Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang, 20 01) 2. 4 SỰ KHÁC NHAU GIỮA SOUTHERN BLOT, NORTHERN BLOT VÀ WESTERN BLOT ... - 2a, phl - 2b B2BF, BRR4 thiết kế dựa trình tự gen phlD có vai trò việc tổng hợp chất 2, 4 – DAPG (2, 4 Diacetylphloroglucinol) Đây chất kháng sinh sinh học, giúp trồng kháng với số nấm bệnh 2. 9...
... Genotypes of 2, 4 Diacetylphloroglucinol Producing Pseudomonas fluorescens Strains To Colonize the Roots of pae Plants Applied And Environmential Microbiology, vol 68 (7): p 322 6 - 323 7 American ... Microbiology, vol 66 (5): p 1939- 1946 American Society for Microbiology, USA 12 Sambrook Joseph and Rusell W.David, 20 01 Molecular Cloning A Laboratory Manual Volume 3rd edition, Cold Spring Harbor ... Gardener, K L Schroeder, S E Kalloger, J M Raaijmakers, Linda S Thomashow, and David M Weller, 20 00 Genotypic and Phenotypic Diversity of phlD - Containing Pseudomonas Strains Isolated from the...
... 80 Dung dịch rửa Thành phần nồng độ cuối Tris base 121 g 1M NaCl 1 12 g 2M Pha dung dịch 20 X Hòa tan 121 g Tris base 1 12 g NaCl 800 ml nước cất Điều chỉnh pH đến 10,0 ... nước vào hỗn hợp để đạt thể tích 20 lit Pha Natri phosphate 0,5 M Cân 13,8 g NaH2PO4 H2O 20 0 ml nước Điều chỉnh pH đến 7,0 NaOH Pha MgCl M Hòa tan 1,9 g MgCl2 10 ml nước cất 10 Tris – HCl 1,0 ... nồng độ sử dụng Pha loãng dung dịch 20 X xuống 20 lần thêm ml MgCl2 M vào dung dịch Dung dịch sử dụng không bảo quản Dung dịch rửa phim Dung dịch developer Thành phần: dung dịch A (5 lít), dung dịch...
... 1.7 2. 0 2. 3 2. 7 3.0 3.3 3.7 4.0 4.3 4.7 5.0 5.3 5.7 *Đệm điện di (ml) 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 2. 5 10% w/v SDS (ml) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 ... vật 2. 2.1 Quy trình có sử dụng SDS 2.2 .2 Quy trình có sử dụng phenol 2. 2.3 Quy trình có sử dụng PMSF 2. 3 Phƣơng pháp điện di gel polyacrylamide 2. 3.1 Sơ ... SDS– PAGE phân tách 28 thành phần T4– phage 2. 3 .2 Gel polyacrylamide Acrylamide đơn phân tử có cấu trúc: CH2=CH–CO–NH2 bisacrylamide có cấu trúc: CH2=CH–CO–NH–CH2–NH–CO–CH=CH2 Acrylamide độc tố...