... Máy PCR Máy ly tâm Tủ lạnh -200C, tủ mát 40C Pipet, cối nghiền mẫu Hóa chất Kit táchchiết RNA: Arum Total RNA Mini Kit (Bio- rad). Primer chuyên biệt để nhận biết PMWaV-1 và PMWaV-2. ... thuật RT-PCR và Southern Blot để phát hiện PMWaV. Mô lá hay rệp được nghiền trong nitơ lỏng và táchchiết RNA tổng số sử dụng Rneasy Plant Mini Kits (Qiagen Inc., Chatsworth, CA). Mẫu RNA tinh ... kích thước tương đối ổn định nên các tế bào sinh ra từ tế bào sơ khởi qua vài lần phân chia sẽ tách rời khỏi mô phân sinh. Quá trình sinh trưởng của đỉnh sinh trưởng được chia thành 3 giai đoạn:...
... Khoa Sinh học Enzyme - 60 -XV. TÁCHCHIẾT VÀ TINH CHẾ ENZYME. Làm thế nào để táchchiết và sau đó tinh chế enzyme từ một vật liệu sinh học? Giai đoạn đầu của quá trình táchchiếtenzyme là thu ... enzyme tăng lên mà phạm vi nhiệt độ tối thích của enzyme cũng được mở rộng. Nhiệt độ cao làm cho enzyme bị biến tính, cấu trúc bậc ba của enzyme bị phá vỡ và enzyme bị mất hoạt tính. Khi enzyme ... phương pháp này protein và enzyme giữ rất tốt tính chất vốn có của chúng. GS.TS. Mai Xuân Lương Khoa Sinh học Enzyme - 61 -Một phương pháp khác thường dùng để táchchiếtenzyme khỏi các cấu trúc...
... pháp táchchiết DNA- DNA có kích thước lớn do đó cần tránh các tách nhân gây đứt gãy.- DNA genome (ĐV, TV) sau khi táchchiết phải có kích thước lớn (15kb-300kb).• Phương pháp táchchiết ... chọn phương pháp chiếttách ADN cho phù hợp• Phương pháp táchchiết RNA toàn phần cũng tương tự DNA. Chỉ khác là ở bước cuối cùng dùng enzyme Dnase loại bỏ DNA.• Táchchiết mRNA- Dựa ... khí…).+ Rnase là một enzyme có hoạt tính cao, bền nhiệt.Do đó: Thao tác táchchiết RNA tốt nhất là ở điều kiện vô trùng, tránh tiếp xúc bằng tay trần.1.1. Các phương pháp táchchiết axít nucleic•...
... loại bỏ muối và isopropanol còn lại. Bước 4. Hoà tan căn (DNA, RNA) và xử lý loại bỏ RNA bằng enzyme Ribonuclease. Sau đó kết tủa lại được DNA. ...
... Chiết ,tinh chế và ứng dụng của enzyme Phần lớn các enzyme ngoại bào (exoenzyme) là những enzyme hòa tan. Như vậy khi tiến hành ly tâm, dung dịch được tách khỏi các thành ... Nếu enzymetách khỏi sinh khối, nước và thành phần môi trường ta có enzyme hoàn toàn sạch. Các enzyme tinh chiết theo kiểu này thường được dùng để sản xuất những sản phẩm sạch. Chế phẩm enzyme ... enzyme này được gọi là enzyme đơn cấu tử hay còn gọi là enzyme đơn giản.- Nếu một enzyme, khi bị thủy phân, ta thu được ngoài axit amin còn các thành phần khác thì enzyme này được gọi là enzyme...
... cứu nhƣ kit Elisa, kit tách chiết DNA, kit táchchiết plasmid, kit PCR,… 21 Thông thƣờng kit táchchiết DNA dựa trên 4 bƣớc cơ bản trong quá trình tách chiết DNA là phân giải tế ... kit táchchiết DNA 19 3.4.2.1 Táchchiết DNA từ cơ vân (Lê Thị Thu Phƣơng, 2004) (qui trình I) 19 3.4.2.2 Phƣơng pháp tối ƣu hóa qui trình táchchiết DNA 21 3.4.2.3 Xây dựng bộ kit táchchiết ... táchchiết DNA, kỹ thuật táchchiết plasmid,…) (Gerard và Henegariu, 1997). 2.4.2 Nguyên tắc tạo kit Nguyên tắc chung của việc tạo kit trong táchchiết DNA và PCR là giúp cho công việc tách...
... Tôm sú (đầu hoặc nội tạng) Nghiền mịn Chiết dịch enzyme thô Ly tâm dịch chiếtenzyme thô Dịch chiếtenzyme thô (DC) Tủa dịch chiết Ly tâm thu chế phẩm thô Chế phẩm thô (CPT) ... của enzyme trong quá trình ly trích, có những enzyme acid thì cần phải trích ly ở pH acid thì thu protein của enzyme đó cao hơn, còn enzyme kiềm thì ngƣợc lại. 2.3.2. Phƣơng pháp làm sạch enzyme ... cực cho công nghệ enzyme. Năm 1984, Nito xác lập quá trình cơ bản tạo acry-lamide và một loạt các quá trình sản xuất có sự tham gia của enzyme. 2.1.2. Định nghĩa về enzymeEnzyme là nhóm protein...
... chế để táchchiết một số hợp chất thứ cấp từ phân đoạn có hoạt tính kháng khuẩn mạnh nhất. - Gửi mẫu chạy phổ cộng hƣởng từ hạt nhân để xác định cấu trúc của các hợp chất đƣợc táchchiết ở ... Khảo sát tính kháng khuẩn của các phân đoạn đƣợc chiết từ cao chloroform Hình 3.4: Sắc ký điều chế v MICsalmonella= 500 µg/ml. - Táchchiết đƣợc 18 phân đoạn và xác định đƣợc phân đoạn ... khuẩn để tách chất sạch. Thời gian thực hiện từ ngày 5/7/2007 đến ngày 19/7/2007. - Giai đoạn 6: Gửi mẫu chạy phổ cộng hƣởng từ hạt nhân để xác định cấu trúc của các hợp chất đƣợc tách chiết...
... đồ 4.1 DNA táchchiết theo qui trình I và II 31 Biểu đồ 4.2 DNA táchchiết theo qui trình I và III 32 Biểu đồ 4.3 DNA táchchiết theo qui trình I và IV 33 Biểu đồ 4.4 DNA táchchiết theo qui ... kit táchchiết DNA 19 3.4.2.1 Táchchiết DNA từ cơ vân (Lê Thị Thu Phƣơng, 2004) (qui trình I) 19 3.4.2.2 Phƣơng pháp tối ƣu hóa qui trình táchchiết DNA 21 3.4.2.3 Xây dựng bộ kit táchchiết ... táchchiết DNA, kỹ thuật táchchiết plasmid,…) (Gerard và Henegariu, 1997). 2.4.2 Nguyên tắc tạo kit Nguyên tắc chung của việc tạo kit trong táchchiết DNA và PCR là giúp cho công việc tách...
... protein enzyme mong muốn sẽ giảm, do lƣợng protein không mong muốn táchchiết tăng ảnh hƣởng đến hoạt tính enzyme, có thể xảy ra khả năng thủy phân lẫn nhau cao. Nhƣ vậy khả năng táchchiết ... cao với hầu hết các enzyme. Một số ion kim loại ức chế enzyme này nhƣng hoạt hóa enzyme kia. Có những ion kim loại ức chế một enzyme ở nồng độ này nhƣng lại hoạt hoá chính enzyme đó ở nồng độ ... không tăng nữa. Thời điểm này enzyme bão hoà cơ chất. Nồng độ enzyme Tốc độ phản ứng xúc tác bởi enzyme tỷ lệ thuận với hàm lƣợng enzyme nhƣng khi tăng cao nồng độ enzyme thì tốc độ cũng không...
... chế để táchchiết một số hợp chất thứ cấp từ phân đoạn có hoạt tính kháng khuẩn mạnh nhất. - Gửi mẫu chạy phổ cộng hƣởng từ hạt nhân để xác định cấu trúc của các hợp chất đƣợc táchchiết ở ... MICsalmonella= 500 µg/ml. - Táchchiết đƣợc 18 phân đoạn và xác định đƣợc phân đoạn có hoạt tính kháng khuẩn là XH9, XH10, XH11, XH12, XH13. - Tiến hành táchchiết trên phân đoạn có hoạt tính ... đƣợc thực hiện qua 2 phần: Phần 1: Tiến hành táchchiết một số hợp chất thứ cấp từ lá Xuân Hoa và khảo sát tính kháng khuẩn. - Giai đoạn 1: Tiến hành chiết Soxhlet lá Xuân Hoa để thu các loại...
... khuẩn để tách chất sạch. Thời gian thực hiện từ ngày 5/7/2007 đến ngày 19/7/2007. - Giai đoạn 6: Gửi mẫu chạy phổ cộng hƣởng từ hạt nhân để xác định cấu trúc của các hợp chất đƣợc táchchiết ... càng dài thì sự tách càng tốt. Tiến hành: Bƣớc 1: Chuẩn bị cột. - Rửa cột thật sạch, tráng lại với nƣớc cất, sau đó sấy khô. v MICsalmonella= 500 µg/ml. - Táchchiết đƣợc 18 phân ... loại cao. Dịch trích Ete dầu hỏa Bột khô 670 g chiết soxhlet với EtOH 70% Dịch trích EtOH Bã Pha nƣớc cô quay, chiết với ete dầu hỏa 14 - Acid palmitic: Là chất rắn màu...
... của enzyme trong quá trình ly trích, có những enzyme acid thì cần phải trích ly ở pH acid thì thu protein của enzyme đó cao hơn, còn enzyme kiềm thì ngƣợc lại. 2.3.2. Phƣơng pháp làm sạch enzyme ... cao với hầu hết các enzyme. Một số ion kim loại ức chế enzyme này nhƣng hoạt hóa enzyme kia. Có những ion kim loại ức chế một enzyme ở nồng độ này nhƣng lại hoạt hoá chính enzyme đó ở nồng độ ... không tăng nữa. Thời điểm này enzyme bão hoà cơ chất. Nồng độ enzyme Tốc độ phản ứng xúc tác bởi enzyme tỷ lệ thuận với hàm lƣợng enzyme nhƣng khi tăng cao nồng độ enzyme thì tốc độ cũng không...