... chuyểngen vào nấm[12] Phương phápchuyểngen thông qua vikhuẩn A tumefaciens coi phươngpháp đơn giản để chuyểngen vào nấm sợi Phươngpháp ATMT chuyểngen vào nấm dựa chế chuyển đoạn T-DNA Ti-plasmid ... dụng vikhuẩn A tumefaciens hiệu đạt đến 97% [11] 1.2.3.4 Ứng dụng phươngpháp ATMT cải biến di truyền Phươngphápchuyểngen vào nấm vikhuẩn A tumefaciens chứng minh lợi phươngphápchuyểngen ... ngẫu nhiên, phươngphápchuyểngen A tumefaciens sử dụng vi c xóa gen nhờ chế trao đổi chéo tương đồng tế bào nấm[49] Phươngphápchuyểngen thông qua vikhuẩn A tumefaciens ghi nhận chuyển thành...
... t bào tr n chuy n gen thông qua vi khu n Agrobacteriumtumefaciens Tuy nhiên vi cchuy n gen vào n m s iA oryzaecho đ n ch s d ng ph ng pháp chuy n gen qua t bào tr n.Ph ng pháp t ng đ i ph c ... công đ chuy n gen vào n m[12] c ng d ng Ph ph ng pháp chuy n gen thông qua vi khu n A tumefaciens đ ng pháp đ n gi n nh t đ chuy n gen vào n m s i Ph c coi ng pháp ATMT chuy n gen vào n m d a ... tumefaciens 1.2.3.1 C ch chuy n gen vào t bào ch c a A tumefaciensVi khu n A tumefacienslà m t loài vi khu n Gram âm s ng đ t, thu c chi Agrobacterium, h Rhizobiaceae Vi khu n A tumefaciens tác nhân gây...
... công để chuyểngen vào nấm [12] Phƣơng phápchuyểngen thông qua vikhuẩn A tumefaciens đƣợc coi phƣơng pháp đơn giản để chuyểngen vào nấm sợi Phƣơng pháp ATMT chuyểngen vào nấm dựa chế chuyển ... khuẩn A tumefaciens (ATMT) 1.2.3.1 Cơ chế chuyểngen vào tế bào chủ A tumefaciensVikhuẩn A tumefaciens loài vikhuẩn Gram âm sống đất, thuộc chi Agrobacterium, họ Rhizobiaceae Vikhuẩn A tumefaciens ... protein Chuyểngen công cụ thiếu nghiên cứu Hiện nay, nhiều phƣơng phápchuyểngen đƣợc sử dụng nhƣ chuyểngen thông qua tế bào trần (protoplast), chuyểngen xung điện, chuyểngen súng bắn gen chuyển...
... nay, phươngphápchuyểngen vào trồng vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens (At) xem phươngpháp có hiệu phươngpháp mà qua kết chuyểngen (ở phân tích Southern blot) thường biểu kiểu tích hợp gen ... vector sử dụng kiểu gen thực vật [21] 10 2.1.4 Quy trình chuyểngenAgrobacteriumchuyểngen gián tiếp nhờ vikhuẩnAgrobacterium 11 2.1.5 Ưu nhược điểm phươngphápchuyểngen nhờ Agrobacterium 2.1.5.1 ... bắn gen Các phươngpháp phức tạp hiệu bao gồm sử dụng phức hợp lipid-DNA (liposome), vector virus, tế bào gốc phôi, chuyểngen gián tiếp nhờ vikhuẩn Agrobacterium, chuyểngen súng bắn gen Phương...
... Chuy n gen gián ti p nh Agrobacteriumtumefaciens 1.7.1 u m c a ph ng pháp chuy n gen nh Agrobacteriumtumefaciens S ăchuy năDNAănh ăA tumefaciens làăm tăph t ănhiênăvàăph ng pháp nàyăĎ ng pháp bi ... CÂY CẨ CHUA MANG GEN HBsAg B NG PH NG PHÁP BI N N P GEN DỐNG VI KHU N Agrobacteriumtumefaciens Nghiênăc uăĎ c th căhi năt iăPhòngăCôngăngh Gen, Vi năSinh h căNhi tă Ď iă– Vi năHànălâmăKhoaăh ... 47 1.7 Chuy n gen giánăti pănh Agrobacteriumtumefaciens 47 1.7.1ă uăĎi măc aăph ng pháp chuy n gen nh Agrobacteriumtumefaciens 47 1.7.2ăC ăch ăxâmănh păc a Agrobacteriumtumefaciens vàoăt...
... Agrobacteriumtumefaciens để đưa gen mong muốn vào gen trồng Phươngpháp sử dụng vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens để chuyển nạp gen gọi phươngphápchuyển nạp gen gián tiếp 2.3.1 Đặc điểm vikhuẩnAgrobacterium ... công vi c chuyển nạp gen vào vải phươngpháp tiêm DNA qua ống phấn, phươngpháp gặp khó khăn vi c xác định chuyểngen nhiều tạo thành số chuyển nạp gen (Chen ctv, 2000) 11 2.3 Chuyểngenvikhuẩn ... khả chuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens giống vải trồng Vi t Nam Vìvi c thực đề tài “Nghiên cứu khả chuyển nạp gen ba giống vải Coker 312 VN36P vikhuẩnAgrobacterium tumefaciens...
... Agrobacteriumtumefaciens để đưa gen mong muốn vào gen trồng Phươngpháp sử dụng vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens để chuyển nạp gen gọi phươngphápchuyển nạp gen gián tiếp 2.3.1 Đặc điểm vikhuẩnAgrobacterium ... công vi c chuyển nạp gen vào vải phươngpháp tiêm DNA qua ống phấn, phươngpháp gặp khó khăn vi c xác định chuyểngen nhiều tạo thành số chuyển nạp gen (Chen ctv, 2000) 11 2.3 Chuyểngenvikhuẩn ... khả chuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens giống vải trồng Vi t Nam Vìvi c thực đề tài “Nghiên cứu khả chuyển nạp gen ba giống vải Coker 312 VN36P vikhuẩnAgrobacterium tumefaciens...
... NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG CHUYỂN NẠP GEN CỦA HAI GIỐNG BÔNG VẢI COKER312 VÀ VN36P BẰNGVIKHUẨNAgrobacteriumtumefaciens Giáo vi n hướng dẫn: TS.TRẦN THỊ CÚC HÒA Sinh vi n thực hiện: NGÔ VI T DUY Thành...
... triển công nghệ sinh học, gen mong muốn chuyển vào vải nhằm nâng cao suất, chất lượng xơ khả kháng sâu bệnh phươngpháp khác phươngphápchuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens sử dụng phổ ... xuất Vi t Nam 2.1.4 Tình hình sản xuất Thế Giới 2.2 Một số nghiên cứu chuyển nạp gen vải .9 2.3 Chuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens 11 2.3.1 Đặc điểm vikhuẩnAgrobacterium ... TẮT NGÔ VI T DUY, Đại học Nông Lâm TP Hồ Chí Minh Tháng 8/2005 “NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG CHUYỂN NẠP GEN CỦA HAI GIỐNG BÔNG VẢI COKER 312 VÀ VN36P BẰNGVIKHUẨNAGROBACTERIUMTUMEFACIENS ” Giáo vi n hướng...
... plasmid A tumefaciens) 3.5 Quy trình chuyểngen vào mầm cà chua 3.5.1 Khảo sát ảnh hưởng mật độ quang vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens (OD600nm) đến hiệu suất chuyểngen Kết khảo sát mật độ vikhuẩn ... pCAMBIA 2301 – Cry1Ab, agarose (Invitrogen), ethidium bromide (Invitrogen), Agrobacteriumtumefaciens LBA 4404, cefotaxime (Vi t Nam), kanamycin sulphate (Invitrogen), glucose (Sigma), acetosyringone ... cà chua in vitro từ mầm, tạo dòng vikhuẩn mang gen mục tiêu thiết lập quy trình chuyểngen phù hợp cho giống Hồng Châu VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNGPHÁP 2.1 Vật liệu Hạt cà chua Hồng Châu (Syngenta), môi...
... ứng chuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens hai giống vải Coker 312 VN36P vi c ứng dụng hệ thống lọc đường mannose có nhận xét sau: -Các giống vải Coker 312 VN36P sau chuyển nạp genvi ... đường mannose để ứng dụng vi c nghiên cứu khả chuyển nạp gen giống trồng Vi t Nam 34 CHƢƠNG TÀI LIỆU THAM KHẢO TIẾNG VI T Lê Trần Bình, 2001 Thực trạng chuyển nạp genVi t Nam Hội Nghị Nhận Thức ... trồng biến đổi genvi c sử dụng gen đánh dấu chọn lọc gen kháng chất kháng sinh -Kỹ thuật tách nhỏ mô sẹo giai đoạn lọc đóng vai trò quan trọng vi c hạn chế phát triển mô không chuyển gen, đặc biệt...
... mannose gen thị gus chủng vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens LBA 4404 (Hoekema ctv, 1983) Hình 3.3 Sơ đồ vector pManCa mang gen pmi gen gus 3.4.2.2 Chuẩn bị vikhuẩn Chủng vikhuẩn LBA4404 mang vector ... nuôi cấy với vi khuẩn, mẫu cấy rửa vikhuẩn nước cất vô trùng lần để loại bỏ vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens bám bề mặt mẫu cấy kháng sinh carbernicillin 500 mg/l để ức chế vikhuẩn mọc trở ... chuyển nạp gen 3.4.2.1 Nguồn plasmid Nguồn plasmid sử dụng để nghiên cứu vector pManCa (Hoa Bong, 2003) mang gen pmi (phosphomannose isomerase) giúp tế bào vikhuẩn biến dưỡng đường mannose gen...
... Agrobacteriumtumefaciens để đưa gen mong muốn vào gen trồng Phươngpháp sử dụng vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens để chuyển nạp gen gọi phươngphápchuyển nạp gen gián tiếp 2.3.1 Đặc điểm vikhuẩnAgrobacterium ... kiểu thuộc nhóm mannityl opine 2.3.2.2 Chức gen vir Vùng vir Plasmid Ti có khoảng 25 gen nhận biết đơn vị phiên mã là: virA, virB, virC, virD, virE, virG, virF (Nguyễn Đức Lượng ctv, 2002) vùng có ... sinh bào tử có quan hệ gần gũi với vikhuẩn cố định đạm Rhizobium (Deacon ctv, 2005) VikhuẩnAgrobacteriumtumefaciensvikhuẩn hiếu khí, có 5- 11 lông roi, vikhuẩn phát triển tối ưu nhiệt 29oC...
... lọc mẫu chuyểngen qua lần lọc với nồng độ kanamycin lần lƣợt 50mg/l, 25mg/l, 25mg/l 25mg/l (Haq, 2004) Điều làm cho số mẫu chuyển nạp gen mẫu chuyển nạp gen chƣa kịp thích nghi, gen đƣợc chuyển ... lo ngại tính an toàn chuyển nạp gen sử dụng kháng sinh lọc 53 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ NGHỊ 5.1 Kết luận Với kết thu đƣợc khả đáp ứng chuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens hai giống ... cotton varieties via Agrobacteriumtumefaciens Plant Science 162: 215-223 50 Stachel S.E., Timmerman B and Zambryski P., 1987 Activation of Agrobacteriumtumefaciens vir gene expression genrates multiple...
... hình thành mô sẹo 4.2 Kết lọc Trong chuyển nạp gen, lọc mẫu điều quan trọng Thanh lọc mẫu giúp loại bỏ bớt mẫu không đƣợc chuyển nạp gen Các mẫu không chuyển nạp gen đƣợc loại bỏ cách đặt mẫu môi ... triển mô sẹo mẫu chuyển nạp gen Ở mẫu đối chứng không chuyển nạp gen, tỷ lệ chết 100% giống; mẫu chuyển nạp gen, tỷ lệ sống sót 1,73% giống Coker 312 3,67% giống SSR60F Vi c tách nhỏ khối mô sẹo ... mẫu môi trƣờng chứa tác nhân lọc Những mẫu không chuyển nạp gen không phát triển phát triển chậm môi trƣờng có tác nhân lọc Trong đó, mẫu đƣợc chuyển nạp lại sống sót phát triển tốt môi trƣờng...
... chất, nguồn vikhuẩn hóa chất: Các dụng cụ hóa chất chuẩn bị cho nuôi cấy mô, chuyển nạp gen xét nghiệm sinh học phòng thí nghiệm Công Nghệ Gen, Bộ Môn Công Nghệ Sinh Học, Vi n Lúa Đồng Bằng Sông ... với vikhuẩn mẫu trụ hạ diệp đƣợc rửa nƣớc cất tiệt trùng kháng sinh carbenicillin để ức chế vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens Sau rửa mẫu trụ hạ diệp đƣợc làm khô giấy thấm tiệt trùng chuyển ... đáp ứng chuyển nạp gen giống Phần mềm sử dụng trình phân tích số liệu: Microsoft Excel (Microsoft Office 2003) 37 Bảng 3.2 Tóm tắt quy trình chuyển nạp gen vào vải vikhuẩn Agrobactrieum tumefaciens...
... phƣơng pháp tiêm DNA qua ống phấn, nhƣng phƣơng pháp gặp khó khăn vi c xác định chuyểngen nhiều đƣợc tạo thành nhƣng số đƣợc chuyển nạp gen (Chen ctv., 2000) 2.3 Chuyển nạp genvikhuẩnAgrobacterium ... muốn Chuyển nạp gen thành công trồng đƣợc ghi nhận cách sử dụng vectơ plasmid Ti, thông qua vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens để đƣa gen mong muốn vào gen trồng Phƣơng pháp sử dụng vikhuẩnAgrobacterium ... Agrobacteriumtumefaciens để chuyển nạp gen đƣợc gọi phƣơng phápchuyển nạp gen gián tiếp (Bùi Chí Bửu Nguyễn Thị Lang, 2000) 23 2.3.1 Đặc điểm vikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens Chi Agrobacterium...
... COKER 312 BẰNGVIKHUẨNAGROBACTERIUMTUMEFACIENS 13 1.2 Mục tiêu Khóa luận: “NGHIÊN CỨU KHẢ NĂNG CHUYỂN NẠP GEN CỦA HAI GIỐNG BÔNG VẢI SSR60F VÀ COKER 312 BẰNGVIKHUẨNAgrobacteriumTumefaciens ... PEG (polyethylene glycol), phƣơng pháp bắn gen phƣơng phápchuyển nạp genvikhuẩnAgrobacteriumtumefaciens Nhƣng phổ biến chuyển nạp gen trực tiếp súng bắn gen với vật liệu nuôi cấy đỉnh chồi ... phƣơng pháp lai tạo truyền thống 2.2.2 Một số nghiên cứu chuyển nạp gen vải Hiện nay, nghiên cứu chuyển nạp gen với nhiều phƣơng pháp khác nhƣ: phƣơng pháp xung điện, phƣơng phápvi tiêm, phƣơng pháp...