... pháp giảitrìnhtự chuỗi xem có nhiều ưu điểm bật bên cạnh việc xác định trìnhtự chuỗi Nucleotids gen HBV để từ so sánh với thư viện gen xác định HBV genotypes mà dựa vào kết giảitrìnhtự xác ... Việc xác định thứ tự Nu gắn kết với dọc theo chiều dài gen (DNA) gọi việc giảitrìnhtự chuỗi (Sequencing), trìnhtự gắn kết Nu gọi trìnhtự chuỗi (Sequence) Cấu tạo gen HBV HBV có gen phân tử DNA, ... biến vùng trình phát triển tự nhiên siêu vi B tác động thuốc điều trị dẫn tới vấn đề đột biến kháng thuốc Quy trìnhgiảitrìnhtự chuỗi: Thực PCR: Để khuếch đại gene HBV ta dùng kỹthuật PCR...
... khác 8% tồn trìnhtự chuỗi gen HBV, phân bố kiểu gen khác châu lục, nước khác Tuy nhiên phân loại HBV genotypes cần dựa trìnhtự chuỗi (sequence) đoạn gen HBV phần trìnhtự chuỗi gen pre-S; S ... pháp giảitrìnhtự chuỗi xem có nhiều ưu điểm bật bên cạnh việc xác định trìnhtự chuỗi Nucleotids gen HBV để từ so sánh với thư viện gen xác định HBV genotypes mà dựa vào kết giảitrìnhtự xác ... xác định thứ tự Nu gắn kết với dọc theo chiều dài gen (DNA) gọi việc giảitrìnhtự chuỗi (Sequencing), trìnhtự gắn kết Nu gọi trìnhtự chuỗi (Sequence) 2, CẤU TẠO BỘ GEN HBV: HBV có gen phân tử...
... immunoassay) Kỹthuật dùng để xác định kiểu gen HBV kỹthuậtgiảitrìnhtự chuỗi bên cạnh việc xác định kiểu gen HBV chúng tơi tìm đột biến kháng Lamivudine lần thực giảitrìnhtự chuỗi Vai trò kiểu gen ... HBV dựa vào nghiên cứu gen HBV phân HBV thành loại đặt tên từ A đến H dựa vào khác 8% tồn bộ gen HBV Có nhiều kỹthuật dùng để xác định kiểu gen HBV kỹthuậtgiảitrìnhtự chuỗi (Sequencing), ... hay nước có kiểu gen vượt trội khác Có nhiều kỹthuật sinh học phân tử dùng để xác định đột biến kháng thuốc HBV xác định kiểu gen HBV Chúng tơi sử dụng kỹthuậtgiảitrìnhtự chuỗi (Sequengcing)...
... tính xác kết định genotype HCV phát triển khơng khác kết định genotype kỹthuậtgiảitrìnhtự Trugene đọan trìnhtự đích phương pháp chúng tơi đọan trìnhtự đích phương pháp Trugen gần phù hợp ... Sản phẩm giảitrìnhtự làm tủa tinh phương pháp tủa với ethanol Cuối thực giảitrìnhtự máy sequencer CEQ8000 Becman Coulter Kết giảitrìnhtự phân tích phần mềm phân tích giảitrìnhtự CEQ8000 ... giúp nhà lâm sàng cho định xác định genotype HCV dễ dàng hơn, việc tìm kiếm kỹthuật xác định genotype HCV mà khơng phải sử dụng kỹthuậtgiảitrìnhtự Trugene kỹthuật InoLIPA với giá thành thấp...
... immunoassay) Kỹthuật dùng để xác định kiểu gen HBV kỹthuậtgiảitrìnhtự chuỗi bên cạnh việc xác định kiểu gen HBV chúng tơi tìm đột biến kháng Lamivudine lần thực giảitrìnhtự chuỗi Vai trò kiểu gen ... dựa vào nghiên cứu gen HBV phân HBV thành loại đặt tên từ A đến H dựa vào khác 8% toàn bộ gen HBV4,6,8 Có nhiều kỹthuật dùng để xác định kiểu gen HBV8,13 kỹthuậtgiảitrìnhtự chuỗi (Sequencing), ... nước có kiểu gen vượt trội khác nhau4,8 Có nhiều kỹthuật sinh học phân tử dùng để xác định đột biến kháng thuốc HBV xác định kiểu gen HBV Chúng tơi sử dụng kỹthuậtgiảitrìnhtự chuỗi (Sequencing)...
... tính xác kết định genotype HCV phát triển khơng khác kết định genotype kỹthuậtgiảitrìnhtự Trugene đoạn trìnhtự đích phương pháp chúng tơi đoạn trìnhtự đích phương pháp Trugen gần phù hợp ... phylogenetic Thư viện HCV thư viện xây dựng sẵn người dùng cập nhật thêm kết (thực máy giảitrìnhtự Trugene) vào thư viện này, lấy thư viện bên ngồi khơng thể đăng nhập trìnhtự có từ máy giảitrình ... với chiều dài mà chúng tơi dự đốn, từ 190bp đến < 200bp BÀN LUẬN Định genotype HCV kỹthuậtgiảitrìnhtự Trugene hay kỹthuật InoLIPA lai vạch Bayer dựa đoạn nucleotide đặc hiệu vùng 5’NC Đây...
... 1000 trìnhtự Đọc trìnhtự phân tích lồi thực gen riêng biệt, đặc biệt gen S Phuơng pháp đọc trìnhtự phân tích lồi Okamoto CS sử dụng năm 1988 phân tích 18 trìnhtựgen HBV phát hiện kiểu gen ... Sơ đồ qui trình: Chạy PCR gắn BigDye Tinh BigDye Biến tính HiDi Giảitrình ọc trìnhtự genegen Phân tích trìnhtự genegen Thứ tự bước thực bao gồm: 50 * Chạy phản ứng PCR gắn BigDye: Thành phần ... pháp đánh giá phù hợp kỹthuật PCR - RFLP so với đọc trìnhtựgen Tiến hành đánh giá 30 mẫu HBV - DNA (+) xác định kiểu gen đồng thời hai kỹthuật PCR - RFLP đọc trìnhtựgen Sau tính hệ số phù...
... nhỏ ADN virus hệ gene người có kích thước gấp 100 000 lần Mặt khác dùng kỹthuật miễn dịch với kháng thể phải cần tới ngày có đáp ứng miễn dịch máu, với kỹthuật PCR tồn quy trình phát vài (đối ... Có thể nhận tính đặc hiệu độ nhạy cao sử dụng kỹthuật RFLP với sản phẩm PCR lai với mẫu dò đặc hiệu Tuy nhiên, thông tin đầy đủ kết xác định trìnhtự ADN sản phẩm PCR Ngay từ giới thiệu PCR xem ... hay phi phóng xạ tiến hành phản ứng khuyếch đại Mẫu dò đánh dấu với kỹthuật PCR có ưu phương pháp đánh dấu truyền thống kỹthuật tổng hợp mạch đứt gãy (nick translation) hay đánh dấu với mồi...
... ADN dùng cột Qiagene: Các cột Qiagene chuẩn bị dễ dàng nhanh để tinh ADN không cần dùng gradient CsCl ADN chuẩn bị theo phương pháp đạt kết tốt cho việc biến nạp giảitrìnhtự gene Có hai ý quan ... tích đệm thích hợp (25ml) Chú ý trường hợp mẫu dùng cho giảitrìnhtự ADN tự động huỳnh quang hồ tan mẫu nước Nói chung sử dụng cột Qiagene thu 90% ADN thường dùng cho tinh Plasmid cosmit (kích ... Ly tâm lại bước lần để loại phần cặn có Cân đệm cho cột Qiagene-tip 20 với 1ml QBT đệm chảy hết tự Đưa phần dịch thu bước lên cột để tự chảy qua cột 7 Rửa cột lần, lần ml đệm QC Thu ADN với 0.8...
... b Kỹthuậtgiảitrìnhtự ADN thiết bị giảitrìnhtự ADN tự động: Hình 1.12 Thiết bị giảitrìnhtự ADN tự độngg (3100-Avant Genetic Analyzer) Trong phần chúng tơi đề cập phản ứng giảitrìnhtự ... tủa ADN bắt cặp với ADN mồi dùng để giảitrìnhtự Phương pháp giảitrìnhtự ADN với sợi đôi cần lượng ADN mồi cao gấp 10-20 lần so với sợi đơn Việc giảitrìnhtự gồm hai phản ứng: phản ứng đánh ... việc giảitrìnhtự ADN plasmid nên tái tinh với Genee-Clean sắc ký trao đổi ion Hình 1.11 Tra mẫu thiết bị chạy gel Các phần đề cập đến số vấn đề nảy sinh cách giải tiến hành giảitrìnhtự ADN...
... biến Để định genotype HBV, đăng nhập trìnhtựgiải lên local blast phần mềm miễn phí Bio-edit chúng tơi có cài thư viện genotype HBV, sau truy cập dể so sánh trìnhtựgiải với trìnhtự thư viện, ... heterozygote Sau dùng chức investigator CEQ8000 để thực đối chiếu so sánh trìnhtựgiải với trìnhtự tham chiếu thành lập từtrìnhtự gene polymerase HBV dòng khơng đột biến để phát vị trí đột biến, đặc ... trạng kháng lamivudine Cơng trình nghiên cứu chúng tơi nhằm mục đích dùng kỹthuậtgiảitrìnhtự vùng rt HBV để định genotype HBV đồng thời tìm hiểu đột biến giới ghi nhận gene polymerase virus có...
... để giảitrìnhtự lượng DNA tương đương [Hall N., 2007] Kỹthuậtgiảitrìnhtự DNA tự động dựa phương pháp giảitrìnhtự Sanger kinh điển Sự đời phương pháp giảitrìnhtự Sanger kỹthuậtgiảitrình ... hầu hết phòng thí nghiệm giảitrìnhtựgen phương pháp enzyme máy tự động Thay việc phải đánh dấu trìnhtự ống giảitrìnhtự xạ kýtự ghi, phương pháp giảitrìnhtựgentự động đánh dấu dideoxynucleotide ... tích thành trìnhtự đoạn DNA Hình 10: Cấu tạo máy giảitrìnhtự DNA tự động 33 4.2 Kỹthuậtgiảitrìnhtự DNA tự động (Dye termination sequencing) 4.2.1 Chuẩn bị DNA cần giảitrìnhtự * DNA khn...
... sequenase) 28/31 Nhân gene kỹthuậtgiảitrìnhtự ADN Kỹthuậtgiảitrìnhtự ADN thiết bị giảitrìnhtự ADN tự động: Hình 1.12 Thiết bị giảitrìnhtự ADN tự độngg (3100-Avant Genetic Analyzer) Trong ... Bảng 1.7 Một số ví dụ ứng dụng kỹthuật PCR xác định vi sinh vât 2/31 Nhân gene kỹthuậtgiảitrìnhtự ADN 3/31 Nhân gene kỹthuậtgiảitrìnhtự ADN Sau nét chung kỹthuật PCR: Nguyên tắc PCR: Khái ... Phương pháp Chuẩn bị gel cho giảitrìnhtự ADN Giới thiệu chung: 17/31 Nhân gene kỹthuậtgiảitrìnhtự ADN Phương pháp giới thiệu cách đổ gel, lên mẫu chạy gel giảitrìnhtự ADN Có nhiều cách đổ...
... nhận với với kết đònh kiểu gene HCV kỹthuật HCV-LIPA và/hay kỹthuậtgiảitrìnhtự TRUGENE Bayer Sản phẩm qui trình hoàn chỉnh đònh kiểu gene HCV băng kỹthuậtgiảitrìnhtự Thực phòng nghiên cứu ... gian: Xây dưng kỹthuậtgiảitrìnhtự sản phẩm PCR nội dung máy giảitrìnhtự CEQ 8000 trang bò công ty Nam Khoa Là mồi đặc hiệu cho phản ứng giảitrìnhtự qui trìnhgiảitrìnhtự Thực phòng nghiên ... kỹthuật RT-PCR phát HCV dựa vùng 5’-NC có trìnhtự đặc hiệu cho kiểu gene tương tựtrìnhtự mà Trugene LIPA nghiên cứu Nội dung 2: Xây dưng kỹthuậtgiảitrìnhtự sản phẩm PCR nội dung máy giải...
... hóa lồi (Guarro, 1999) Các trìnhtựgen rDNA đƣợc thu thập cách phân lập giảitrìnhtựgen dòng vơ tính riêng Trực tiếp giảitrìnhtự rDNA đƣợc thực để thu đƣợc trìnhtự nhanh chóng Tuy nhiên, ... chuỗi đƣợc giảitrìnhtự Việc thực phản ứng PCR giảitrìnhtự DNA trực tiếp cho vài thuận lợi so với việc tạo dòng (cloning) giảitrìnhtự DNA trực tiếp Phƣơng pháp dùng DNA tổng số từgen với lƣợng ... ứng khuếch đại); hai mạch đơn gen đƣợc dùng để giảitrìnhtự nhằm hạn chế bớt sai sót; phƣơng pháp thích hợp với thiết bị giảitrìnhtự DNA tự động sử dụng trìnhtự mồi có đánh dấu huỳnh quang...
... Hình ảnh minh họa kỹthuậtgiảitrìnhtự theo phương pháp Sanger [13] Giảitrìnhtự DNA chia làm bước lớn: PCR giảitrìnhtự đọc trìnhtự máy tự động Bước 1: PCR giảitrìnhtự Thành phần hỗn ... nhân đoạn gen đặc hiệu với OI - Chạy điện di kiểm tra sản phẩm Bước 4: Giảitrìnhtự sản phẩm PCR gồm bước: - Thực phản ứng PCR giảitrìnhtự - Tinh sản phẩm PCR giảitrìnhtự - Giảitrìnhtự trực ... biểu protein collagen týp I (da, xương) Như để phát đột biến gen COL1A1 cần ý tới kỹthuật là: PCR, RT-PCR giảitrìnhtựgen 1.4.1 Kỹthuật Polymerase Chain Reaction (PCR): PCR kỹthuật nhân DNA...
... băng để giảitrìnhtự Sản phẩm PCR sau tinh giảitrìnhtự trực tiếp, sử dụng mồi ITS1 Xử lý trìnhtự chuỗi nucleotid phần mềm chuyên biệt, bao gồm SeqEd1.03, AsemblyLIGNv1.9c hệ chương trình MacVector8.2 ... băng thu phân tích giám định loài ADN tinh vào ống để đưa Một số sản phẩm PCR giảitrìnhtựgiảitrìnhtự Sau giảitrình tự, chuỗi cho chuỗi nucleotid lồng nhau, không nucleotid xử lý phân tích phần ... phân biệt để thu clon riêng giải sách mẫu, kết PCR, chuỗi gengiảitrìnhtựtrình tự, kết truy cập Ngân hàng Gen Kết truy cập Ngân hàng Gen chủ yếu liệt kê xác định loài số 51 mẫu truy cập, kết...
... tích gen mức độ ADN protein A) Ở mức độ ADN Trìnhtự tồn gen HP1125 vừa giải mã so sánh với gen tương ứng chủng nước ngồi chương trình Blast Nhìn chung, gen Việt nam có tương đồng cao với gen ... Hultman (6a) Phân tích trìnhtự đoạn ADN: Chương trình Blast trang Web sử dụng để phân tích trìnhtự protein cuar gen KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN Khuếch đại gen HP1125 phương pháp PCR Toàn gen HP1125 khuyếch ... đại gen HP1125 phương pháp PCR M Thang chuẩn ADN 100 cặp bazơ Sản phẩm PCR có kích thướckhoảng 540 cặp bazo kiểm tra phương pháp điện di Kết giảitrìnhtự Sản phẩm PCR, sau làm giảitrìnhtự trực...