... http://www.Lrc-tnu.edu.vn
27
3.3. NHÂN DÕNG ĐOẠN GENMÃHÓA ENZYME INVERTASE
RNA tổng số sau khi đƣợc tinh sạch sẽ sử dụng làm khuôn cho phản
ứng RT-PCR để nhân đoạn genmãhóa cho enzyme Invertase với cặp mồi ... THIẾT KẾ MỒI 24
3.2. TÁCH RNA TỔNG SỐ 25
3.3. NHÂN DÒNG ĐOẠN GENMÃHÓA ENZYME INVERTASE 27
3.4. TÁCH DÒNG GEN VÀ XÁC ĐỊNH TRÌNH TỰ GEN 28
3.4.1. Tạo plasmid tái tổ hợp INV-pENTR 28
3.4.2. Biến ... chuyển gen INV_RNAi của genmãhóa Invertase. Phản ứng
này đƣợc tiến hành với sự xúc tác của enzyme LR-clonase và Proteinase K ở
nhiệt độ phòng.
pK7GWIWG2(II) là một vector chuyển gen đƣợc...
... đƣợc sự biểuhiện
của genmãhóa Invertase. Cơ chế gây bất hoạt gen RNAi (RNA-interference)
hiện nay đã trở thành một biện pháp công nghệ hữu hiệu có thể ức chế hoàn
toàn biểuhiện của gen ở ... Clonase
TM
II Enzyme Mix Kit (Invitrogen, Mỹ)
- Bộ kit kit Trizol Regents (Invitrogen, Mỹ)
- Bộ kit Qiagen (QIAquick Gel Extraction)
- Bộ kit QIAprep Spin Miniprep (QIAGEN).
- Các hóa chất thông ... Gateway đƣợc thực hiện bởi hai bƣớc chính:
+ Tạo dòng tiếp nhận “entry clone” bằng cách chèn genbiểuhiện
(expression gene) vào vector tiếp nhận (pENTR/D).
+ Tạo dòng biểuhiện (expression...
... đã
thu đƣợc sáu trình tự của genmãhóa cho enzyme Invertase ở cây mía, trong
đó có 5 trình tự mãhóa cho enzyme Invertase hòa tan (soluble acid Invertase)
với mã số AF062734, AF 062735, AF083855, ... cho trình tự
của đoạn genmãhóa cho enzyme Invertase. Chúng tôi đã sử dụng từ khóa
“Invertase Sugarcane” để tìm kiếm trong ngân hàng dữ liệu gen NCBI các
trình tự gen Invertase đã đƣợc công ... Gateway đƣợc thực hiện bởi hai bƣớc chính:
+ Tạo dòng tiếp nhận “entry clone” bằng cách chèn genbiểuhiện
(expression gene) vào vector tiếp nhận (pENTR/D).
+ Tạo dòng biểuhiện (expression...
...
Sản phẩm PCR nhân cDNA mãhóa h-tPA
30
3.2
Kết quả xử lý cDNA mãhóa h-tPA và các vector biểuhiện
bằng enzyme hạn chế
32
3.3
Chọn dòng pGEX6p1
mang cDNA mãhóa h-tPA (pGEX6p1/h-tPA) ...
NGHIÊN CỨU BIỂUHIỆNGENMÃHÓA
CHẤT HOẠT HÓA PLASMINOGEN MÔ CỦA NGƯỜI
TRONG VI KHUẨN Echerichia coli
LUẬN VĂN THẠC SĨ SINH HỌC
Thái Nguyên – 2008
Số hóa bởi Trung ... trên, chúng tôi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu biểuhiệngenmã
hóa chất hoạt hóa plasminogen mô của ngƣời trong vi khuẩn Escherichia coli”.
Số hóa bởi Trung tâm Học liệu – Đại học Thái Nguyên...
... bằng enzym hạn chế 38
3.2.5. Kết quả giải trình tự gen seb đột biến trên vector biểuhiện ……. ……….……40
3.3. Kết quả biểuhiệngenmãhóa cho protein SEB tái tổ hợp 39
Số hóa bởi ... chủng biểuhiện mang genmãhóaenzym T7 RNA
polymerase trong genome. Khi trong môi trường có IPTG enzym này sẽ được kích
hoạt bám vào promoter của vector tái tổ hợp khởi động quá trình dịch mã ... thiết kế vector biểuhiện pET21a+ mang gen seb đột biến 34
3.2.1. Xử lý enzym hạn chế tạo đầu cắt so le trên pET21a+ 34
3.2.2. Phản ứng gắn đoạn gen đích seb vào vector biểuhiện 36
3.2.3....
... đoạn genmãhóa legumain
và vector chứa biểuhiện pET-32c(+), quy trình thiết kế vector biểuhiện mang
gen mãhóa legumain được tiến hành như sau:
• Bước 1: Cắt và tinh sạch đoạn genmãhóa ... thiết kế vector biểuhiện pET-32c(+) mang genmãhoá legumain
khởi đầu với việc vector tách dòng tái tổ hợp pBT-legumain được xử lý với
enzyme EcoRI và HindIII, thu được đoạn genmãhóa legumain ... và tinh sạch đoạn genmãhóa legumain và vector biểuhiện
pET-32c(+).
• Bước 2: Thực hiện phản ứng lai đoạn genmãhóa legumain và vector
biểu hiện pET-32c(+) .
• Bước 3: Biến nạp sản phẩm lai...
... cerevisiae
1.1.5. Vector biểuhiện gene ngoại lai của P. pastoris
1.1.5.1. Đặc điểm chung của vector biểuhiện của P. pastoris
...
P. pastoris mang gene il-
P. pastoris mang gene mãhóa c
-
...
-CTGCAGTTTTATTCGCAGCATCC-
MF(ALPHA)1-Rv1
-GCAGCAATGCTGGCAATAGTAG-
2.1.3. Hóa chất, enzyme và các thiết bị máy móc
Hóa chất, enzyme:
Máy móc...
... Glycoprotein vỏ gp 120 của virus HIV
Khuếch đại gen gp120B_EX bằng cặp mồi biểuhiện
ĐC1: Thang DNA chuẩn 1kb
ĐC2: sản phẩm PCR.
Những thuốc điều trị HIV hiện nay
•
Triomune-30( or -40);Mỗi viên nén ... hữu.
Biểu hiệngen gp120B trong vi khuẩn E.coli chủng BL21 Star
TM
(DE3)
ĐC 1: Thang Protein chuẩn
ĐC 2,4: Mẫu không cảm ứng
ĐC 3,5: Mẫu cảm ứng bằng IPTG 1mM
Phương pháp nghiên cứu
•
Nhân bản gen ... genmãhóa protein gp120B của virus HIV bằng phương pháp PCR.
•
Gắn sản phẩm PCR vào vector.
•
Biến nạp DNA plasmid vào tế bào E.coli.
•
Cắt DNA bằng enzyme giới hạn.
•
Xác định trình tự gen...
... được vector biểuhiện pET32a/FIX
noSP
mang đoạn cDNA mãhóa FIX
noSP
và biểuhiện được genmãhóa cho yếu tố đông máu IX ở E. coli.
Kiến nghị
Tiếp tục nghiên cứu biểuhiện cDNA mãhóa FIX
noSP
... hai phần và thực hiện qua các bước sau:
a. Phân lập genmãhóa yếu tố đông máu IX từ mô gan sinh thiết ở người.
b. Thiết kế vector biểuhiện mang cDNA mãhóa FIX
noSP
và biểuhiện trong tế bào ... vai
trò rất quan trọng trong việc hoạt hóa yếu tố đông máu X thành dạng hoạt hóa Fxa.
1.3. Cấu trúc genmãhóa yếu tố đông máu IX
Gen FIX là genmãhóa cho yếu tố đông máu IX (human factor...
... s
khi nghiên cu truyn tin ca th th -n hành dung hp genmãhóa cho th th
này vi genmãhóa cho NK1 và biu hin chúng trong hai h vector pCDNA3.1 và pEGFP-N1
t ...
th ch c ngun gen và các h thng sàng lc thuc t ngu c liu Vit Nam,
tài “Tách dòng và thiết kế vector biểuhiệngenmãhóa cho thụ thể
neurokinin-1 ... dòng và thit k vector biu hin cDNA mãhóa cho
th th neurokinin 1 phi Vit Nam.
Chƣơng 3: KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
3.1. TÁCH DÒNG GENMÃHÓA CHO THỤ THỂ NEUROKININ-1 TỪ PHỔI NGƢỜI...
... in serveral minutes. We
chosen several appropriate conditions as: concenttation of capture reagents on test line and control line,
concenttation of colloidal conjugated gold on the conjugate ... Store the test below room temperature. Expiry date is about
18
months.
Keywords:
Capillary
reagent,
Clenbuterol,
Clenbuterol
detection,
immunochromatography,
rapid test
' Author for...