... oligohistidine,
tác giả đà tổng hợp thành công HIP táitổhợpcủa
ngời có mang oligohistidine ở đầu - N tận trên hệ
vi khuẩn E. coli. Hai đặc tính của protein táitổhợp
này đà đợc lợi dụng để có thể ... quy trình
tổng hợp protein táitổhợp (HIP) của ngời trên hệ
vi khuẩn E. coli sử dụng vector có oligo - histidine.
2. HIP táitổhợp đà đợc tinh chế với độ tinh
khiết cao nhờ kết hợp các kỹ ... trơn.
2.2. Tổng hợp và tinh chế HIP táitổhợp
Các cặp mồi có vị trí của enzyme cắt giới hạn
EcoRI cho phép nhân đoạn nucleotide của HIP từ
vị trí 25 - 508. Trình tự nucleotide của các cặp...
... như thế sẽ được
nối với nhau bởi DNA ligase của vi
khuẩn. Cơ sở của phương pháp kết hợp
DNA này được thực hiện lần đầu tiên
giữa DNAcủa virus SV40 với DNAcủa
phage l bởi L.Lobban và D.Kaiser ...
tiếp bằng DNA ligase của phage T4 hoặc
tổng hợp thêm các đầu dính vào các đầu
3' một số nucleotide bổ sung bằng cách
sử dụng các enzyme end-transferase, rồi
sau đó các đoạn DNA như thế ... phân tử DNA khác nhau
được cắt bởi cùng một enzyme giới hạn
EcoRI tạo ra các đầu dính bổ sung nhau,
bằng cách đó có thể khâu nối thành phân
tử DNAtáitổhợp in vitro nhờ xử lý với
DNA ligase....
... vector táitổhợp gọi là dòng
tái tổ hợp. Dòng táitổhợp đƣợc phân lập để lƣu trữ DNAtáitổhợp hoặc dùng cho các
thao tác trên gen. Toàn bộ quá trình trên gọi là tạo dòng DNA hay DNA cloning. ... mol ra lượng (ng) của phân tử DNA
μg DNA = fmole DNA x x
Từ lượng của vector DNA tính ra lượng củaDNA chèn
(ng )DNA chèn =
Căn cứ vào tỉ lệ về số mol giữa vector và DNA chèn rồi dựa ... agarose, thực hiện phản ứng
cắt DNA plasmid tách chiết và DNA plasnid đối chứng.
Thực hiện phản ứng cắt DNA plasmid và DNA plasmid đối chứng bằng enzym
EcoRV, sau đó kiểm chứng bằng cách điện di...
... trung bình của tín hiệu lại
được sử dụng theo cách gián tiếp, trong đó sai số lối ra của mạch lọc tương quan với các
mẫu của tín hiệu vào của mạch lọc theo một số cách và sử dụng kết quả của phương ... logic cao, FPGA được ứngdụng cho những
bài toán đòi hỏi khối lượng tính toán lớn và dùng trong các hệ thống làm việc theo thời
gian thực. Những ứngdụng trong thực tế của FPGA rất rộng rãi, ... diễn như hình 3:
Hình 3: Cấu trúc của bộ lọc FIR truyền thống
Trong đó:
x[n]: là tín hiệu lối vào của mạch
y[n]: là tín hiệu lối ra của mạch
h[n]: là đáp ứng xung của mạch
Lối ra y[n] và lối vào...
...
chuyên dùngcủa Chính phủ.
4a/ Tổng số máy chủ (đang sử dụng) tại cơ quan Trung ương: ………………………………………
4b/ Tổng số máy chủ (đang sử dụng) do Trung ương đầu tư cho toàn ngành: ……………………….
5/ Tổng băng ... triển khai tại cơ quan Trung ương (đề nghị ghi tổng số
rồi liệt kê chi tiết theo Phụ lục 1):
- Tổng số: ……………… phần mềm ứng dụng.
3/ Số lượng các ứngdụng đã được thay thế hoặc nâng cấp trong năm ... nghị
ghi tổng số rồi liệt kê chi tiết theo Phụ lục 2):
- Tổng số: ……………… ứng dụng.
4/ Số lượng cán bộ biết sử dụng máy tính trong công việc tại cơ quan Trung ương (là cán bộ biết sử
dụng tin...
... ngh. DNAtái t. h.p 36
đầu 3’.
+ Tổng hợp sợi thứ hai của cDNA trong tạo dòng cDNA.
+ Tổng hợpDNA sợi đôi từ các khuôn mẫu sợi đơn trong phát sinh đột biến in vitro.
1.3. DNA polymerase của bacteriophage ... lớn hơn củaDNA polymerase I đến 200 lần. Đoạn Klenow
phải cần có đoạn mồi (primer) mới tổ
ng hợpDNA được, còn DNA polymerase phage T4 thì không cần
mồi cũng tổng hợp được DNA.
- Ứngdụng chính
+ ... sử
dụng để tạo ra đoạn DNA tổng hợp thông qua nhiều vòng khuếch đại PCR. Khả năng tạo ra DNA tổng
hợp có nhiều ứngdụng tùy thuộc vào thiết kế của chúng ta. Người ta có thể thiế
t kế một gen tổng...
... cho kỹ thuật DNAtáitổhợp sau này.
Nối sai
Nối sai
DNA sẽ được
xen vào
DNA được cắt
vớiEcoRI
Các đầu dính
Tái tổhợpDNA
+ DNA ligase
DNA
tái tổ hợp
Hình 10.3 Hai phân tử DNA khác nhau ...
Trong trường hợp đó, các tế bào chuyên sản xuất insulin vẫn được duy trì
và tái sử dụng với hiệu quả kinh tế cao.
IV. Ứngdụngcủa công nghệ DNAtáitổhợp
1. Công nghệ DNAtáitổhợp với việc ... Các vector thông dụng trong kỹ thuật di truyền
2.1. DNAtáitổhợp là gì?
DNAtáitổhợp (recombinant DNA) là phân tử DNA được tạo ra trong
ống nghiệm bằng cách kết hợp các DNA từ các nguồn...
... bức tranh tổng quát về các quá trình cơ
bản của công nghệ DNAtáitổ hợp.
II. Phân lập đoạn DNA/ gen
Một số phương pháp phân lập gen để thực hiện kỹ thuật táitổhợp
DNA đã được sử dụng là: ... mapping).
2. Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA
Đoạn DNA được tổng hợp dựa trên khuôn mẫu mRNA được gọi là
cDNA (complementary DNA) . ba
như sau:
- .
- - 2 (Mg
2+
.
- .
mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th E. ... đúng plasmid táitổ hợp.
Vì vậy, việc xác định đúng các dòng vi khuẩn chứa plasmid táitổhợp
phải mất nhiều công sức. Có ba phương thức chính để xác định các dòng
DNA táitổhợp là lai khuẩn...
... bức tranh tổng quát về các quá trình cơ
bản của công nghệ DNAtáitổ hợp.
II. Phân lập đoạn DNA/ gen
Một số phương pháp phân lập gen để thực hiện kỹ thuật táitổhợp
DNA đã được sử dụng là: ... mapping).
2. Sinh tổng hợp cDNA từ mRNA
Đoạn DNA được tổng hợp dựa trên khuôn mẫu mRNA được gọi là
cDNA (complementary DNA) . ba
như sau:
- .
- - 2 (Mg
2+
.
- .
mRNA-cDNA (khi tổng hợp sợi th E. ... Dừng phản ứng
bắt màu
Nhập môn Công nghệ sinh học
31
Chương 2
Công nghệ DNAtáitổhợp
I. Mở đầu
Công nghệ DNAtáitổhợp được hình thành từ những năm 1970 nhờ
sự phát triển của các...
... cho kỹ thuật DNAtáitổhợp sau này.
Nối sai
Nối sai
DNA sẽ được
xen vào
DNA được cắt
vớiEcoRI
Các đầu dính
Tái tổhợpDNA
+ DNA ligase
DNA
tái tổ hợp
Hình 10.3 Hai phân tử DNA khác nhau ...
Trong trường hợp đó, các tế bào chuyên sản xuất insulin vẫn được duy trì
và tái sử dụng với hiệu quả kinh tế cao.
IV. Ứngdụngcủa công nghệ DNAtáitổhợp
1. Công nghệ DNAtáitổhợp với việc ... đặc tính của enzyme cắt
giới hạn, các nguyên lý cơ bản của kỹ thuật DNAtáitổhợp và một số ứng
dụng của lĩnh vực công nghệ này.
I. Các công cụ chính của kỹ thuật tạo dòng DNAtáitổhợp
1....
... mang DNAtáitổhợp
có chứa gen insulin người
Ứng dụngcủa vaccine thực phẩm kháng bệnh IBDV trên gà
Hình 2.4. Ứngdụngcủa vaccine thực phẩm
kháng bệnh IBDV trên gà
1.2. Mục đích tạo DNAtáitổ ... vi
khuẩn mang gen
mong muốn.
Hình 1.2. Quy trình tạo DNAtáitổ hợp
1. Mở đầu
1.1. Công nghệ DNAtáitổhợp là gì?
Công nghệ DNAtáitổhợp (còn gọi là kỹ thuật di
truyền hay kỹ thuật gen) ... phân tử DNAtáitổ hợp
Hình 2.6. Tạo vaccine virus H5N1,
cơ chế loại độc tính ở gen HA của virus H5N1
Có tính an toàn cao, nhất là tránh được độc tính của
virus.
Một số vaccine DNAtáitổhợp đã...