Xây dựng phương pháp xác định đồng thời một số thuốc hạ huyết áp và lợi tiểu trộn trái phép trong chế phẩm đông dược bằng hplc

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HÙNG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ THUỐC HẠ HUYẾT ÁP VÀ LỢI TIỂU TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƢỢC BẰNG HPLC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC HÀ NỘI 2021 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HÙNG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ THUỐC HẠ HUYẾT ÁP VÀ LỢI TIỂU TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƢỢC BẰNG HPLC LUẬN VĂN THẠC SĨ DƢỢC HỌC CHUYÊN NGÀNH: KIỂM NGHIỆM THUỐC VÀ ĐỘC CHẤT MÃ SỐ: 8720210 Ngƣời hƣớng dẫn khoa học: TS Trần Cao Sơn PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh HÀ NỘI 2021 LỜI CẢM ƠN Đầu tiên xin chân thành bày tỏ lịng kính trọng biết ơn sâu sắc đến TS Trần Cao Sơn PGS.TS Nguyễn Thị Kiều Anh ngƣời trực tiếp hƣớng dẫn, tận tình bảo tạo điều kiện thuận lợi cho tơi suốt q trình thực hồn thành Luận văn Tơi xin gửi lời cảm ơn đến Ban lãnh đạo anh chị cán Viện Công nghệ Dƣợc Phẩm Quốc Gia- Trƣờng đại học Dƣợc Hà Nội tạo điều kiện thiết bị hỗ trợ cho tơi suốt q trình nghiên cứu để hoàn thành luận văn Cuối cùng, tơi xin chân thành cảm ơn gia đình, bạn bè đồng nghiệp Trung tâm kiểm nghiệm Thuốc, mỹ phẩm, thực phẩm Yên Bái tạo điều kiện thiết bị thời gian, động viên, hỗ trợ cho tơi nhiều suốt q trình học tập thực đề tài Dù có nhiều cố gắng q trình thực đề tài, song cịn nhiều mặt thiếu sót hạn chế Tơi mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp dẫn thầy cô giáo anh chị đồng nghiệp Tôi xin chân thành cảm ơn! Hà Nội, ngày 30 tháng 03 năm 2021 Phạm Văn Hùng MỤC LỤC ĐẶT VẤN ĐỀ Chƣơng TỔNG QUAN 1.1 Tổng quan đối tƣợng nghiên cứu 1.1.1 Amlodipin besylat 1.1.2 Felodipin 1.1.3 Nifedipin 1.1.4 Furosemid 1.1.5 Spironolacton 1.2 Tình hình nghiên cứu thuốc hóa dƣợc hạ huyết áp, lợi tiểu trộn trái phép chế phẩm đông dƣợc 1.2.1 Trên giới 1.2.2 Tại Việt Nam 11 1.3 Tổng quan phƣơng pháp HPLC 13 Chƣơng 2: ĐỐI TƢỢNG VÀ PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 15 2.1 Nguyên vật liệu, thiết bị đối tƣợng nghiên cứu 15 2.1.1 Nguyên vật liệu 15 2.1.2 Thiết bị nghiên cứu 15 2.1.3 Đối tƣợng nghiên cứu 16 2.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 16 2.2.1 Nền mẫu nghiên cứu 16 2.2.2 Xử lý mẫu 18 2.2.3 Xây dựng thẩm định phƣơng pháp phân tích 18 2.2.4 Ứng dụng phƣơng pháp để xác định thuốc chống tăng huyết áp, lợi tiểu đƣợc trộn lẫn chế phẩm đông dƣợc 19 2.2.5 Phƣơng pháp xử lý số liệu 20 Chƣơng THỰC NGHIỆM VÀ KẾT QUẢ 21 3.1 Xây dựng phƣơng pháp phân tích 21 3.1.1 Khảo sát pha động 21 3.1.2: Khảo sát cột phân tích 23 3.1.3 Lựa chọn bƣớc sóng phân tích 25 3.1.4 Khảo sát thể tích tiêm mẫu 26 3.2 Lựa chọn quy trình xử lý mẫu 27 3.3 Thẩm định phƣơng pháp phân tích 30 3.3.1 Tính thích hợp hệ thống 30 3.3.2 Độ đặc hiệu phƣơng pháp 31 3.3.3 Khoảng tuyến tính 33 3.3.4 Giới hạn phát (LOD) giới hạn định lƣợng (LOQ) 37 3.3.5 Độ xác 41 3.4 Ứng dụng phân tích mẫu thị trƣờng 44 Chƣơng BÀN LUẬN 49 4.1 Tạo mẫu 49 4.2 Xây dựng phƣơng pháp phân tích 50 4.2.1 Lựa chọn phƣơng pháp phân tích 50 4.2.2 Về phƣơng pháp xử lý mẫu 50 4.2.3 Về xây dựng phƣơng pháp HPLC 51 4.2.4 Thẩm định phƣơng pháp 52 4.3 Ứng dụng phƣơng pháp 53 KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 55 TÀI LIỆU THAM KHẢO 57 DANH MỤC CÁC KÝ HIỆU, CHỮ VIẾT TẮT Từ viết tắt Tiếng Anh tên khoa học Tiếng Việt ACN Acetonitrile Acetonitril AML Amlodipine besylate Amlodipin besylat AOAC Association of Official Hiệp hội hợp tác phân Analytical Collaboration tích thức quốc tế International CTPT Công thức phân tử FEL Felodipine Felodipin FUR Furosemide Furosemid HPLC High Performance Liquid Sắc ký lỏng hiệu Chromatography cao HPTLC High Performance Thin Layer Sắc ký lớp mỏng hiệu Chromatography cao LOD Limit of Detection Giới hạn phát hiên LOQ Limit of Quantification Giới hạn định lƣợng MeOH Methanol Methanol NIF Nifedipine Nifedipin Phân tử lƣợng ptl SPI Spironolactone Spironolacton WHO Word health organization Tổ chức y tế giới DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 2.1 Các chất chuẩn dùng nghiên cứu Bảng 2.2 Thành phần mẫu Bảng 3.1 Thành phần mẫu Bảng 3.2 Chế độ gradient pha động Bảng 3.3 Kết bƣớc sóng cực đại tín hiệu độ hấp thụ dung dịch chuẩn hỗn hợp Bảng 3.4 Khảo sát dung môi chiết Bảng 3.5 Kết đánh giá độ phù hợp hệ thống Bảng 3.6 Cách pha dãy dung dịch chuẩn Bảng 3.7 Bảng 3.8 Bảng 3.9 Sự phụ thuộc tuyến tính nồng độ diện tích pic chất nghiên cứu Kết thẩm định LOD, LOQ phƣơng pháp mẫu cao khô Kết thẩm định LOD, LOQ phƣơng pháp mẫu cao lỏng Bảng 3.10 Kết độ độ lặp lại ngày phƣơng pháp Bảng 3.11 Kết độ chụm phƣơng pháp Bảng 3.12 Kết ứng dụng phân tích mẫu thực Bảng 3.13 Kết phân tích LC-MS DANH MỤC HÌNH ẢNH Hình 1.1 Sơ đồ hệ thống HPLC Hình 3.1 Sắc ký đồ khảo sát pha động Hình 3.2 Sắc ký đồ chế độ gradient dung mơi pha động Hình 3.3 Sắc ký đồ khảo sát cột Inertsil ODS-3, InertSustain-AQ1, Eclipse XDB-C18 Apollo mẫu chuẩn hỗn hợp Hình 3.4 Phổ hấp thụ UV chất nghiên cứu Hình 3.5 Sắc ký đồ dung mơi chiết MeOH ACN Hình 3.6 Mẫu cao lỏng, cao lỏng thêm chuẩn chuẩn hỗn hợp Hình 3.7 Đồ thị khoảng tuyến tính chất nghiên cứu Hình 3.8 Sắc ký đồ phân tích mẫu thử THA11, TLT TLT Hình 3.9 Hình 3.10 Chồng phổ pic nghi ngờ mẫu thử THA11, TLT TLT Sắc ký đồ phân tích mẫu nghi ngờ LC-MS ĐẶT VẤN ĐỀ Tăng huyết áp tình trạng tăng huyết áp tâm thu và/hoặc huyết áp tâm trƣơng có khơng có ngun nhân, bệnh lý mạn tính, có nguy cao gây nhiều biến chứng tim mạch nhƣ loạn nhịp tim, thiếu máu não, suy tim [4] Theo thống kê tổ chức y tế giới (WHO), giới có khoảng 1,13 tỷ ngƣời bị tăng huyết áp với tỷ lệ bốn với nam giới năm với nữ giới [34] Ở Việt Nam, tỷ lệ ngƣời tăng huyết áp ngày tăng cao Nếu nhƣ năm 2000 có khoảng 16,3% ngƣời lớn bị tăng huyết áp đến năm 2009, tỷ lệ tăng lên 25,4% Đến năm 2016, tỷ lệ mức báo động đỏ với 40% ngƣời lớn [33] Chính tỷ lệ mắc cao nên nhu cầu sử dụng thuốc hạ huyết áp ngày tăng Các thuốc đƣợc sử dụng điều trị tăng huyết áp gồm nhóm chẹn kênh calci nhƣ amlodipin, felodipin, nifedipin…; Nhóm ức chế men chuyển nhƣ caltopril, enalapril…; Nhóm ức chế thần kinh giao cảm nhƣ respirin, atenolol…; Nhóm lợi tiểu nhƣ hydrochlorothiazid, furosemid, spironolacton [4] Trong đó, nhóm thuốc chẹn kênh calci lợi tiểu hay đƣợc sử dụng liều sử dụng thấp, giá thành rẻ, kết hợp với để tăng tác dụng điều trị Tuy nhiên, việc sử dụng kéo dài thuốc điều trị tăng huyết áp dẫn đến nguy tăng tác dụng không mong muốn Nắm bắt đƣợc xu trên, nhiều sản phẩm nguồn gốc đông dƣợc dùng để điều trị, hỗ trợ điều trị tăng huyết áp đời đƣợc nhiều bệnh nhân tăng huyết áp sử dụng tin tƣởng tác dụng điều trị bền vững an tồn so với thuốc hóa dƣợc Tuy nhiên, vấn đề tăng nhanh hiệu điều trị, tăng doanh thu mà số nhà sản xuất trộn lẫn thuốc hóa dƣợc vào sản phẩm nguồn gốc thảo dƣợc Rất nhiều nghiên cứu giới phát chất hóa dƣợc trộn lẫn trái phép chế phẩm điều trị tăng huyết áp nhƣ Nifedipin, Hydroclorothiazid, Atenolol …[21], [22], [24], [25] Đây thuốc thuộc danh mục thuốc kê đơn, việc sử dụng không theo định hƣớng dẫn bác sĩ gây ảnh hƣởng xấu tới sức khỏe bệnh nhân Nhiều kỹ thuật phân tích đƣợc sử dụng để phát thuốc hóa dƣợc nhóm hạ huyết áp, lợi tiểu trộn chế phẩm đông dƣợc Trên giới, việc sử dụng phƣơng pháp đơn giản, dễ thực chi phí thấp nhƣ TLC để sàng lọc sau đánh giá lại mẫu nghi ngờ phƣơng pháp có độ xác cao nhƣ HPLC hay LC-MS/MS hay đƣợc sử dụng [19], [29] Tại Việt Nam, Trần Thị Hoài Ân sử dụng phƣơng pháp LC-MS để xác định đồng thời Amlodipin besilat, atenolol, nifedipin, valsartan, hydroclorothiazid furosemid [2], có LOD thấp độ đặc hiệu cao xong phƣơng pháp đắt tiền khó áp dụng phổ biến Trần Lệ Hoa sử dụng phƣơng pháp HPLC để xác định đồng thời amlodipin, felodipin, nifedipin valsartan, phƣơng pháp có LOD thấp, độ đặc hiệu cao nhiên thực dƣợc chất nhóm hạ huyết áp [9] Với mục đích góp phần vào công tác kiểm tra phát chất cấm trộn chế phẩm đông dƣợc, đề tài “Xây dựng phƣơng pháp xác định đồng thời số thuốc hạ huyết áp lợi tiểu trộn trái phép chế phẩm đông dƣợc HPLC” đƣợc thực với mục tiêu: Xây dựng phƣơng pháp xác định đồng thời amlodipin besylat, felodipin, furosemid, nifedipin, spironolacton trộn trái phép chế phẩm đông dƣợc HPLC Ứng dụng phƣơng pháp xây dựng phát thuốc trộn trái phép số chế phẩm đông dƣợc lƣu hành thị trƣờng Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: NCL LOD 2021-03-15 21-12-14\006-0501.D Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 30.365 BB 0.3149 50.47626 2.36613 18.8442 Totals : 267.86060 21.52077 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/17/2021 8:46:07 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: NCL LOD 2021-03-15 21-12-14\007-0601.D ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : Acq Instrument : HPLC Location : Vial Injection Date : 3/16/2021 12:30:44 AM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : C:\CHEM32\1\DATA\SERTRALIN\SERTRALIN 2021-03-15 21-12-14\HUNGCH24.M Last changed : 3/15/2021 9:12:14 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\HUNGCH24RUA.M Last changed : 3/17/2021 8:45:08 AM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD 2021-03-15 21-12-14\007-0601.D) mAU 40 30 30.375 24.004 21.865 10 17.440 16.513 20 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type # [min] Width [min] Area [mAU*s] Height [mAU] Area % | -| | -| | | | 16.513 BB 0.2159 102.67200 7.21912 36.6550 17.440 BB 0.1445 30.80683 3.31176 10.9984 21.865 BB 0.1555 50.11158 4.97687 17.8904 24.004 BB 0.1763 47.48030 4.12313 16.9510 HPLC 3/17/2021 8:46:19 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: NCL LOD 2021-03-15 21-12-14\007-0601.D Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 30.375 BB 0.3135 48.03259 2.31101 17.5052 Totals : 280.10330 21.94188 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/17/2021 8:46:19 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\041-1101.D Sample Name: THA 11 ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : 11 Acq Instrument : HPLC Location : Vial 41 Injection Date : 3/21/2021 10:55:54 PM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\HUNGCH24.M Last changed : 3/21/2021 4:20:24 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\DEF_LC.M Last changed : 3/24/2021 2:25:27 PM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\041-1101.D) mAU 19.064 600 500 25.193 400 200 22.210 22.661 22.990 23.652 24.135 24.632 13.865 300 100 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 13.865 BB 0.4163 4639.20264 168.98024 23.2321 19.064 VB 0.1761 5346.14160 451.56851 26.7723 22.210 BV 0.1540 311.24435 31.31435 1.5586 22.661 VV 0.1559 1434.21863 139.53011 7.1822 HPLC 3/24/2021 2:25:44 PM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\041-1101.D Sample Name: THA 11 Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 22.990 VB 0.1498 280.32050 29.25315 1.4038 23.652 VB 0.1719 1018.45172 88.72198 5.1002 24.135 BB 0.1516 1432.42798 144.51030 7.1733 24.632 BV 0.1710 1571.23206 137.81296 7.8684 25.193 VB 0.1847 3935.70532 321.67374 19.7091 Totals : 1.99689e4 1513.36532 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/24/2021 2:25:44 PM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: Thu THA 2021-03-15 21-12-14\034-2901.D ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : 29 Acq Instrument : HPLC Location : Vial 34 Injection Date : 3/16/2021 6:03:38 PM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : C:\CHEM32\1\DATA\SERTRALIN\SERTRALIN 2021-03-15 21-12-14\HUNGCH24.M Last changed : 3/15/2021 9:12:14 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\HUNGCH24RUA.M Last changed : 3/17/2021 8:51:17 AM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD 2021-03-15 21-12-14\034-2901.D) mAU 175 150 125 100 75 28.579 19.940 25 20.768 18.586 50 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 18.586 BB 0.1712 33.53701 2.98206 12.4973 19.940 BB 0.2013 109.52778 7.82702 40.8146 20.768 BB 0.2029 64.39610 4.50031 23.9967 28.579 BB 0.2954 60.89339 3.04359 22.6914 HPLC 3/17/2021 8:52:30 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: Thu THA 2021-03-15 21-12-14\034-2901.D Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | Totals : 268.35427 18.35297 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/17/2021 8:52:30 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: Thu THA 2021-03-15 21-12-14\036-3101.D ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : 31 Acq Instrument : HPLC Location : Vial 36 Injection Date : 3/16/2021 7:22:32 PM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : C:\CHEM32\1\DATA\SERTRALIN\SERTRALIN 2021-03-15 21-12-14\HUNGCH24.M Last changed : 3/15/2021 9:12:14 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\HUNGCH24RUA.M Last changed : 3/17/2021 8:54:26 AM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD 2021-03-15 21-12-14\036-3101.D) mAU 250 200 150 20.777 21.175 18.121 50 22.394 22.896 18.601 100 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 18.121 BV 0.2230 80.14477 5.40426 8.3940 18.601 VB 0.1679 421.10492 39.02532 44.1044 20.777 BB 0.2049 111.08122 8.25944 11.6341 21.175 BB 0.1438 113.59119 12.29468 11.8970 HPLC 3/17/2021 8:54:50 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: Thu THA 2021-03-15 21-12-14\036-3101.D Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 22.394 BB 0.2684 187.19406 9.39757 19.6058 22.896 BB 0.1429 41.67395 4.46589 4.3647 Totals : 954.79011 78.84716 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/17/2021 8:54:50 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: Thu THA 2021-03-15 21-12-14\037-3201.D ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : 32 Acq Instrument : HPLC Location : Vial 37 Injection Date : 3/16/2021 8:01:59 PM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : C:\CHEM32\1\DATA\SERTRALIN\SERTRALIN 2021-03-15 21-12-14\HUNGCH24.M Last changed : 3/15/2021 9:12:14 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\HUNGCH24RUA.M Last changed : 3/17/2021 8:55:17 AM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD 2021-03-15 21-12-14\037-3201.D) mAU 250 200 150 100 19.947 18.602 13.066 50 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 13.066 BB 0.4347 343.79483 12.27820 86.6367 18.602 BB 0.1625 24.75719 2.39635 6.2388 19.947 BB 0.1783 28.27168 2.38567 7.1245 HPLC 3/17/2021 8:55:20 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\LOD&LOQ\LOD Sample Name: Thu THA Totals : 2021-03-15 21-12-14\037-3201.D 396.82370 17.06023 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/17/2021 8:55:20 AM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\035-0501.D Sample Name: TLT1 ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : Acq Instrument : HPLC Location : Vial 35 Injection Date : 3/21/2021 6:59:20 PM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\HUNGCH24.M Last changed : 3/21/2021 4:20:24 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\DEF_LC.M Last changed : 3/24/2021 2:17:44 PM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\035-0501.D) mAU 80 60 27.691 24.106 22.647 22.967 21.363 18.575 20 19.652 20.143 40 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 18.575 BB 0.1782 52.89326 4.40166 28.4099 19.652 BB 0.1607 13.50327 1.30573 7.2528 20.143 BB 0.1624 14.08825 1.34330 7.5670 21.363 BB 0.1379 38.89437 4.28580 20.8908 HPLC 3/24/2021 2:18:08 PM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\035-0501.D Sample Name: TLT1 Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 22.647 BB 0.1457 6.89938 7.34028e-1 3.7058 22.967 BB 0.1607 20.36486 1.93623 10.9383 24.106 BB 0.1783 21.86766 1.81892 11.7455 27.691 BB 0.2136 17.66796 1.22955 9.4898 Totals : 186.17899 17.05521 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/24/2021 2:18:08 PM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\039-0901.D Sample Name: TLT5 ===================================================================== Acq Operator : SYSTEM Seq Line : Acq Instrument : HPLC Location : Vial 39 Injection Date : 3/21/2021 9:37:00 PM Inj : Inj Volume : 50.000 µl Acq Method : E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\HUNGCH24.M Last changed : 3/21/2021 4:20:24 PM by SYSTEM Analysis Method : C:\CHEM32\1\METHODS\DEF_LC.M Last changed : 3/24/2021 2:20:04 PM by SYSTEM (modified after loading) Additional Info : Peak(s) manually integrated DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off (E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\039-0901.D) mAU 175 150 23.976 27.020 50 25 31.703 75 30.750 11.254 20.688 100 28.843 125 0 10 15 20 25 30 35 ===================================================================== Area Percent Report ===================================================================== Sorted By : Signal Multiplier : 1.0000 Dilution : 1.0000 Use Multiplier & Dilution Factor with ISTDs Signal 1: DAD1 A, Sig=238,4 Ref=off Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 11.254 BB 0.3600 1537.69165 64.54296 22.8147 20.688 VB 0.1629 751.91821 69.15397 11.1562 23.976 BB 0.1528 63.67636 6.46942 0.9448 27.020 BB 0.2644 380.43060 21.29603 5.6444 HPLC 3/24/2021 2:22:13 PM SYSTEM Page of Data File E:\HPLC\HUNGCH24\KSTHU\KS THU 2021-03-21 16-20-24\039-0901.D Sample Name: TLT5 Peak RetTime Type Width Area Height Area # [min] [min] [mAU*s] [mAU] % | -| | -| | | | 28.843 BV 0.3576 2316.21338 92.65459 34.3656 30.750 BV 0.3481 834.72809 35.01662 12.3848 31.703 VB 0.3525 855.26202 36.08894 12.6895 Totals : 6739.92031 325.22253 ===================================================================== *** End of Report *** HPLC 3/24/2021 2:22:13 PM SYSTEM Page of ... cấm trộn chế phẩm đông dƣợc, đề tài ? ?Xây dựng phƣơng pháp xác định đồng thời số thuốc hạ huyết áp lợi tiểu trộn trái phép chế phẩm đông dƣợc HPLC? ?? đƣợc thực với mục tiêu: Xây dựng phƣơng pháp xác. .. DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ Y TẾ TRƢỜNG ĐẠI HỌC DƢỢC HÀ NỘI PHẠM VĂN HÙNG XÂY DỰNG PHƢƠNG PHÁP XÁC ĐỊNH ĐỒNG THỜI MỘT SỐ THUỐC HẠ HUYẾT ÁP VÀ LỢI TIỂU TRỘN TRÁI PHÉP TRONG CHẾ PHẨM ĐÔNG DƢỢC BẰNG HPLC. .. xác định đồng thời amlodipin besylat, felodipin, furosemid, nifedipin, spironolacton trộn trái phép chế phẩm đông dƣợc HPLC Ứng dụng phƣơng pháp xây dựng phát thuốc trộn trái phép số chế phẩm đông