Nghiên cứu sự biến động của vi khuẩn trong môi trường nuôi và mức độ nhiễm vi khuẩn vibrio trong mẫu tôm sú ( penaus monodon ) tại một số tỉnh khu vực phía bắc

BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƢỜNG ĐẠI HỌC VINH  Trần Thị Mơ NGHIÊN CỨU SỰ BIẾN ĐỘNG CỦA VI KHUẨN TRONG MÔI TRƢỜNG AO NUÔI VÀ MỨC ĐỘ NHIỄM VI KHUẨN VIBRIO TRONG MẪU TÔM SÚ (PENAEUS MONODON) TẠI MỘT SỐ TỈNH KHU VỰC PHÍA BẮC KHỐ LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ SƯ NUÔI TRỒNG THUỶ SẢN VINH – 2009 MỞ ĐẦU Nuôi trồng thuỷ sản (NTTS) nghề quyền tỉnh ven biển miền Bắc Trung Bộ (Nghệ An, Hà Tĩnh, Thanh Hoá, Quảng Bình…) đưa vào ngành kinh tế mũi nhọn thời kỳ từ đến 2010 Trong tơm sú đối tượng nuôi quan trọng nhất, đồng thời đánh giá cao tiềm diện tích Tính đến 2002, sản lượng ni tơm sú tỉnh miền Bắc đạt 12.805 tấn, suất bình quân đạt 500kg/ha, cao gấp lần sản lượng tôm nuôi năm 2000 Nuôi tôm sú thực làm tăng thu nhập, nâng cao đời sống làm giàu cho người dân vùng ven biển Chính thế, chương trình phát triển ni trồng thuỷ sản đến năm 2010, Bộ Thuỷ sản định hướng phát triển nuôi tôm Sú đạt sản lượng 360.000 tấn, giá trị xuất 1.400 triệu USD [12] Như qui luật tự nhiên, phát triển đạt thể qua diện tích, suất ni tơm kéo theo số vấn đề xảy ô nhiễm môi trường nuôi, dịch bệnh xảy thường xuyên hơn, Một thực tế cho thấy năm gần bệnh xuất với tần suất dày diễn biến phức tạp Bệnh nguyên nhân quan trọng ảnh hưởng trực tiếp tới chất lượng tôm giống suất đạt tôm thịt Theo báo cáo kết nuôi trồng thủy sản 2003 ngành đưa nước có 546757 ni tơm nước lợ thương phẩm, diện tích có tơm bị bệnh chết 30083 Các tỉnh từ Đà Nẵng đến Kiên Giang có tới 29200 ni tơm bị chết chiếm 97,06% diện tích có tôm bị chết nước chủ yếu bệnh đốm trắng, đầu vàng, MBV, bệnh vi khuẩn vibrio, bệnh ký sinh trùng( Tạp chí thủy sản)[12] Ở tôm vi khuẩn gây nhiều bệnh nguy hiểm khác mối đe dọa lớn ngành ni tơm cơng nghiệp Có nhiều lồi gây bệnh cho tôm, nhiên mức độ ảnh hưởng khả chống chịu tôm khác tùy vào loại vi khuẩn, cường độ cảm nhiễm giai đoạn cảm nhiễm.Trong Vibrio nhóm sống tự nước tác nhân gây bệnh nguy hiểm Bệnh Vibrio phân bố rộng khắp giới, xảy hầu hết giai đoạn tơm [7] Hiện trở thành bệnh thường gặp gây nhiều tác hại cho nghề nuôi tơm nước ta nói chung tỉnh phía Bắc nói riêng Vì để góp phần hiểu rõ ngun nhân gây bệnh tơm Sú từ có biện pháp phịng trị kịp thời nhằm hạn chế rủi ro cho nghề nuôi tôm tiến hành thực đề tài: “ Nghiên cứu có mặt vi khuẩn Vibrio mẫu tôm Sú(Penaeus monodon) biến động vi khuẩn môi trường ao nuôi tôm Sú số tỉnh phía Bắc” Mục đích đề tài: - Bước đầu làm quen với phương pháp nghiên cứu khoa học - Xác định biến động vi khuẩn hiếu khí tổng vi khuẩn vibrio spp môi trường ao nuôi tôm Sú Hưng Hịa – Nghệ An, Quảng Chính – Thanh Hóa, Thạch Trị - Hà Tĩnh - Xác định có mặt vi khuẩn Vibrio mẫu tơm Sú ni Hưng Hịa – Nghệ An, Quảng Chính – Thanh Hóa, Thạch Trị - Hà Tĩnh CHƢƠNG I TỔNG QUAN 1.1 Một số đặc điểm đối tƣợng nghiên cứu 1.1.1 Một số đặc điểm vi khuẩn 1.1.1.1 Hệ thống phân loại Ngành Proteobacteria Lớp Schizomycetes Bộ Vibrionales Họ Vibrionaceae Giống Vibrio Loài Vibrio spp Vibrio có dạng hình que, kích thước tế bào 0,3-0,5x1,4-2,6µm Vibrio khơng hình thành bào tử có khả chuyển động nhờ tiêm mao nhiều tiêm mao Là vi khuẩn bắt màu gram âm, có khả oxy hố lên men mơi trường O/F Glucose, khơng có khả sinh H2S mẫn cảm với Vibriostar (0/129) Hầu hết loài giống vibrrio phân bố mơi trường nước mặn, thích hợp 20 – 40%o, có lồi phát triển 70%o nên vibrio mối đe doạ cho nghề nuôi động vật thuỷ sản biển, đặc biệt giáp xác nuôi thâm canh biển ven biển Môi trường thiosulphate citrate bile salt Sucrose agar (TCBS) môi trường chọn lọc vibrio spp… Dựa vào màu sắc khuẩn lạc môi trường chọn lọc này, vibrio spp chia thành nhóm: Nhóm có khả lên men đường Sucrose có khuẩn lạc màu vàng; nhóm khơng có khả lên men đường Sucrose có khuẩn lạc màu xanh mơi trường TCBS [7] Vi khuẩn Vibrio gây bệnh mãn tính, thứ cấp tính cấp tính Khi bệnh cấp tính xảy tỷ lệ chết lên tới 100% khơng có biện pháp trị bệnh kịp thời Khi bệnh Vibriosis bùng nổ mức độ cấp tính, ln ln liên quan đến vấn đề stress chất lượng môi trường nước xấu Vibrio vi khuẩn đặc trưng cho vùng nước biển ấm, phát triển mạnh nhịt độ 25 – 300C [7] Theo Bower (1996), số lồi vi khuẩn có khả tiết men phân huỷ vỏ kitin loài giáp xác Chitinase, Protease, lipase Các vi khuẩn thuộc giống Vibrio spp, Pseudomonas spp, Aeromonas spp.(Bower S M (1996), Rickettsia and Chlamydia of Crabs, Synopsis of infection Diseases and parasites of Commercially Exploited Shellfish) Gây bệnh Vibriosis ĐVTS gặp số loài sau: V parahaemolyticus, V haveyi, V cholera, V vulnificus, V anginolyticus, V anguilarum… 1.2 Tình hình nghiên cứu bệnh tơm sú 1.2.1 Trên giới Ngành nuôi trồng thủy sản đem lại lợi nhuận cao cho quốc gia có tiềm phát triển NTTS, đặc biệt nuôi tôm sú Các quốc gia cách mở rộng diện tích vùng ni, đẩy mạnh hình thức nuôi công nghiệp dẫn đến cân sinh thái vùng nuôi tôm Hiện tượng ô nhiễm môi trường dịch bệnh xảy liên tục nhiều nơi giới Bệnh làm giảm sản lượng tôm nuôi đáng kể Năm 1987 – 1989 dịch bệnh tôm xảy Đài Loan làm cho sản lượng tôm nuôi quốc gia giảm xuống đáng kể từ 100.000 giảm 20.000 [13] Khơng tính riêng châu Á, châu Phi, châu Mỹ mà toàn giới chịu thiệt hại lớn sản lượng, suất dịch bệnh gây ra, đặc biệt thiệt hại lớn phải kể đến Thái Lan, Philippine, Indonesia, Trung Quốc, Bangladesh [13] Trước tình hình dịch bệnh hồnh hành, hàng loạt cơng trình nghiên cứu bệnh đối tượng thủy sản tiến hành nghiên cứu Vào năm 70 bệnh virus tôm lần phát Couch (1974) gọi Baculovirus penaeid, người tìm khoảng 20 bệnh virus tơm hàng trăm lồi vi khuẩn khác nhiều loài nấm, ký sinh trùng gây tôm (Brock and Lightner 1990) [25] 1.2.1.1 Bệnh virus Theo lightner (1996), Brock lightner (1990), Fulk Main (1992), bệnh thường gặp virus gây bệnh tôm he nuôi khu vực châu Á sau [29]: Hội chứng đốm trắng WSBV Bệnh virus đầu vàng YHD Bệnh BMN MBV Bệnh hoại tử quan tạo máu IHHNV Bệnh gan tụy Parvovirus Bệnh đốm trắng WSBV Bệnh đốm trắng thông báo lần Trung Quốc vào năm 1989 đầm ni tơm sú có tỷ lệ chết cao Vài năm trở lại bệnh xuất nhiều khu vực giới có Việt Nam gây thiệt hại đáng kể Hiện bệnh đốm trắng tổ chức dịch bệnh động vật quốc tế xếp vào danh mục cần kiểm soát [31] Dấu hiệu đặc trưng bệnh có đốm trắng khoảng 0,5 – 2mm vỏ, chủ yếu tập trung giáp đầu ngực, đốm trắng không bị ta cạo lớp vỏ Những đốm trắng tạo nên lắng cặn khơng bình thường muối canxi biểu bì [34] Tơm bị bệnh thường khả tiêu thụ thức ăn giảm sút rõ ràng, cá biệt có trường hợp tăng cường độ bắt mồi sau vài ngày có tượng bỏ ăn Tơm bệnh bị chuyển sang màu hồng đỏ Hiện tượng chết xảy vài ngày sau đó, tỷ lệ chết cao, lên tới 90% - 100% – ngày có trường hợp đốm trắng tôm bị nhiễm virus mà kéo dài độ pH cao lâu dẫn đến tích tụ canxi lớp vỏ làm xuất đốm trắng, tượng không nguy hiển Chỉ cần môi trường nuôi tốt, giúp tôm ăn tốt lột xác bình thường, sau lột xác đốm trắng [34] Bệnh đốm trắng phát triển nhanh, gây chết hàng loạt hay cảm nhiễm giai đoạn tôm (sau thả giống từ 30 – 40 ngày) Virus gây bệnh phát triển nhiều đối tượng tơm nuôi khác nhau, đường lây lan bệnh rộng theo chiều ngang chiều dọc [31] Theo nhà khoa học Úc virus tồn mơi trường nước vịng – ngày với khả lây nhiễm cao Một số nhà khoa học Ấn Độ cho bệnh WSBV thường trầm trọng sau trận mưa lớn Còn Chalor Limsuwan nghiên cứu WSBV Thái Lan lại có nhận xét vùng ni có độ muối cao, mức độ nhiễm WSBV nghiêm trọng nhiều so với vùng ni có độ muối thấp [35] Bằng phương pháp mô bệnh học Lightner nhận thấy rằng: Các tế bào nhiễm virus bệnh đốm trắng có nhân bị kết dặc lại xuất thể vùi bắt màu hồng nhuộm Eosin Hematocyline [5] Ngoài để kiểm tra bệnh người ta cịn có nhiều phương pháp nhuộm nhanh mang tôm bị bệnh, phương pháp PCR [5] Bệnh MBV MBV có mặt phần lớn trang trại nuôi tôm châu Á từ Trung Quốc đến Đài Loan, Philippine, Malayxia, Singapore, Thái Lan, Indonexia, Australia… lây nhiễm nhiều loại tơm he khác nhau: P.monodon, P merguiensis, P vannamei…Tuy nhiên có tơm sú P monodon thường bị nhiễm nặng phổ biến [32] Hiện bệnh MBV xuất phổ biến toàn giới: Khu vực Tây bán cầu, vùng Trung Đông, châu Mỹ khu vực châu Á Thái Bình Dương Theo Wang ctv (1992), bệnh MBV thường gây tỷ lệ chết cao trại ương ni ao ni tơm thịt Malaysia Ơng phát tôm bị nhiễm bệnh giai đoạn hậu ấu trùng ấu niên mạnh [32] Còn theo Lightner (1996) cho rằng, tơm bị nhiễm MBV từ giai đoạn Zoea bệnh lại trầm trọng giai đoạn postlarvae, đặc biệt PL25, tỷ lệ tử vong lên đến 90% quần đàn bị nhiễm MBV nặng[34] Theo quan niệm khác Chen (1992) Chanratchakool (1994) bệnh MBV có gây tác hại hay khơng cịn phụ thuộc vào “sốc” môi trường tham gia tac nhân khác vi khuẩn, động vật đơn bào virus khác Nghĩa tôm bị nhiễm MBV sống môi trường thuận lợ ổn định tác hại bệnh tôm không đáng kể gặp điều kiện môi trường xấu, không ổn định làm tôm yếu, dễ mẫn cảm với MBV dẫn đến tôm bị chết [36] Phần lớn quần đàn tôm nhiễm MBV chết thấy khơng có tác nhân MBV mà thấy tác nhân thứ cấp vi khuẩn vibrio spp Theo Felix Devaraj (1993) có đến 70% PL tơm sú bị nhiễm MBV chết có kèm theo dấu hiệu bệnh phát sáng Ngồi cịn có vi khuẩn dạng sợi động vật đơn bào Theo Lightner (1996) MBV có tác dụng mở đường, điều thể lát cắt mô gan tuỵ tôm Khi nhiễm bệnh MBV nặng tế bào gan tuỵ tôm thường bị nhiễm vi khuẩn thứ cấp [36] Ngày bệnh MBV nghiên cứu nhiều quốc gia giới Theo Chen ctv (1989), với MBV phương pháp nhuộm màu gan tôm ép tươi xanh malachite 0,5% phương pháp mơ bệnh học cho phép chẩn đốn xác cảm nhiễm MBV tế bào gan tuỵ tôm thông qua việc phát tồn thể ẩn mẫu nghiên cứu Tuy nhiên theo Lightner (1996) hai phương pháp nhuộm tươi mơ bệnh học dù cịn hạn chế khơng phát xác tơm bị nhiễm virus giai đoạn đầu tiên, chưa hình thành thể ẩn nhiên phương pháp phù hợp cho việc nghiên cứu bệnh MBV phịng thí nghiệm thơ sơ [28] Bệnh đầu vàng YHVD có phân bố rộng, liên quan tới quốc gia có ni tơm sú bệnh nghiên cứu Thái Lan (P.J Walker, 2000) Theo Lightner (1996) bệnh xuất Thái Lan năm 1990 ao ni thâm canh Tuy người ta cịn cho bệnh xảy sớm gây dịch chết tôm nghiêm trọng Đài Loan năm 1987 – 1989 Trước số nhà nghiên cứu Thái Lan cho bệnh Baculovirus gây Tuy nhiên người ta xác định khơng thuộc họ Baculovirus Virus YHV sợi đơn hình que bao bọc bào chất virus gần giống virus thuộc họ Coronaviridae [31] YHV lây nhiễm tất giai đoạn khác tôm sú bệnh thường xảy gây thiệt hại tôm khoảng tháng tuổi, ao đầm có điều kiện mơi trường xấu vùng có mật độ số ao trại ao cao Thực tế cho thấy bệnh thường xuất hệ thống nuôi thâm canh [6] 1.2.1.2 Bệnh vi khuẩn Vi khuẩn tác nhân chiếm phần lớn tác nhân gây bệnh cho tôm ni Trong điều kiện ao ni có mật độ cao, đầu tư thức ăn lớn, tượng ô nhiễm thường xuyên xảy điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn phát triển gây tác hại Theo thống kê Sindermann lighter (1988) cho biết: Các bệnh tôm vi khuẩn gây chiếm 45,5% tổng loại bệnh tôm, vius chiếm 25,3%, Nấm chiếm 2,7%, Ký sinh trùng chiếm 26,5%[38] Trong loài vi khuẩn gây bệnh cho tơm vibrio lồi phân bố rộng khắp giới xem mối đe doạ lớn cho nghề nuôi động vật thuỷ sản biển nói riêng nghề ni tơm sú nói chung Trong bệnh vibrrio, vi khuẩn vibrio tác nhân sơ cấp tác nhân thứ cấp, tác nhân hội Ký sinh trùng hay tác động mơi trường học, hố học đóng vai trị quan trọng dịch bệnh vibrio động vật thuỷ sản 10 70% 60% 50% T4 T5 T6 T7 40% 30% 20% 10% 0% A1 A2 A3 A4 A5 Kl/ml Đồ thị 3.3: Tỷ lệ % mẫu tơm có tác nhân gây bệnh vibriosis Nghệ An 4000 3500 3000 2500 2000 1500 1000 500 A1 A2 A3 A4 A5 T4 T5 T6 T7 TC Tháng thu mẫu Đồ thị 3.2: Đồ thị kiểm tra vi khuẩn vibrio nƣớc ao nuôi tôm Nghệ An; Kl: khuẩn lạc; A1,2,3,4,5: ao nuôi tôm; T4,5,6,7: tháng thu mẫu; TC: tiêu chuẩn ngành Xem xét mối tương quan lượng vi khuẩn vibrio sp có mặt nước ao nuôi tôm diện thể tơm ta thấy rằng: lượng vibrio ao ni cao khả cảm nhiễm lên tôm lớn Tuy nhiên điều phụ thuộc vào nhiều yếu tố sức khoẻ tôm 40 nuôi yếu tố môi trường khác Khi môi trường nuôi quản lý chặt chẽ, chất lượng giống tốt hạn chế phát trriển vi sinh vật có hại khả cảm nhiễm chúng lên thể tôm 3.1.3 Tại Hà Tĩnh 120000 100000 kl/ml 80000 B1 B2 60000 B3 B4 40000 B5 20000 T4 T5 T6 T7 TC Tháng thu mẫu Đồ thị 3.4: Kết kiểm tra vi khuẩn tổng số nƣớc Hà Tĩnh: khuẩn lạc; B1,2,3,4,5: ao nuôi tôm; T4,5,6,7: tháng thu mẫu; TC: tiêu chuẩn ngành Từ kết phân tích cho thấy hầu hết tất ao có lượng vi khuẩn tăng dần theo thời gian ni Điều phù hợp với quy luật tự nhiên, cuối vụ tích tụ chất hữu nhiều Đây điều kiện thuận lợi cho vi khuẩn phát triển Bước vào vụ nuôi năm hộ nuôi mua giống chủ quan vấn đề sức khoẻ giống, mua giống sở quen biết lại không kiểm dịch tôm trước thả , tôm giống trước thả nhiễm MBV WSSV, đến tháng nuôi thứ tôm bị bệnh chết hầu hết hộ nuôi 41 3000 2500 B1 Kl/ml 2000 B2 1500 B3 1000 B4 B5 500 T4 T5 T6 T7 TC Tháng thu mẫu Đồ thị 3.5: Đồ thị kiểm tra vi khuẩn vibrio nƣớc Hà Tĩnh; Kl: khuẩn lạc; A1,2,3,4,5: ao nuôi tôm; T4,5,6,7: tháng thu mẫu; TC: tiêu chuẩn ngành Cũng lượng vi khuẩn vibrio sp tăng dần theo thời gian nuôi tất ao thu mẫu Vào tháng 5, kết phân tích cho thấy lượng vibrio tăng cao đột biến vượt ngưỡng cho phép ngành Nguyên nhân năm thời tiết nắng nóng kéo dài, mơi trường biến động lớn Hơn q trình ni phát tôm nhiễm bệnh nặng, người nuôi chán nản bỏ bê khơng chăm sóc, mơi trường xuống cấp tạo điều kiện cho vibrio sp phát triển 3.3 Kết kiểm tra vi khuẩn vibrio sp tôm sú Thạch Hà vùng nuôi tôm quảng canh cải tiến, nhiên việc chăm sóc, quản lý ao ni tơm không tốt nên kết nuôi tôm không cao Vào đợt thứ tơi thu mẫu tơm khơng cịn ao Kiểm tra vi khuẩn phát V alginolyticus mẫu tôm thu ao B2, B5 vào đợt thu mẫu thứ với tỷ lệ nhiễm 40% Theo kết phân tích Viện Nghiên cứu Ni trồng Thuỷ sản I tơm bị chết chủ yếu bệnh đốm trắng MBV, 42 ngồi cịn điều kiện mơi trường nắng nóng kéo dài, độ sâu nước ao lại thấp (80cm) Tại Thanh Hoá 120000 100000 C1 80000 kl/ml C2 60000 C3 40000 C4 20000 C5 T4 T5 T6 T7 TC tháng thu mẫu Đồ thị 3.6: Đồ thị kiểm tra vi khuẩn tổng số nƣớc Thanh Hố; Kl: khuẩn lạc; C1,2,3,4,5: ao ni tơm; T4,5,6,7: tháng thu mẫu; TC: tiêu chuẩn ngành Dựa vào đồ thị ta thấy cuối vụ hàm lượng vi khuẩn ao nuôi tôm nhiều tích tụ chất thải hữu cơ, thức ăn dư thừa lắng xuống đáy tạo điều kiện thuận lợi cho phát triển vi khuẩn Tuy nhiên kết định lượng vi khuẩn nằm khoảng cho phép nghành tất ao Năm việc kiểm dịch nguồn tơm giống Thanh Hố quan chức quan tâm Quảng Chính vùng ni tơm quan tâm tỉnh, giống trước thả nuôi kiểm dịch chặt chẽ, tôm nuôi không mắc bệnh, lớn nhanh, đem lại thu hoạch lớn cho người dân Theo vùng nuôi tôm cho kết tốt vùng thu mẫu 43 3000 2500 C1 Kl/ml 2000 C2 1500 C3 1000 C4 500 C5 T4 T5 T6 T7 TC tháng thu mẫu Đồ thị 3.7: Đồ thị kiểm tra vi khuẩn vibrio nƣớc Thanh Hóa; Kl: khuẩn lạc; C1,2,3,4,5: ao nuôi tôm; T4,5,6,7: tháng thu mẫu; TC: tiêu chuẩn ngành Sự biến động vibrio sp ao không tăng dần theo thời gian nuôi Lượng vibrio sp tăng nhanh đến tháng giảm xuống đáng kể, thời điểm người dân bắt đầu tiến hành thu hoạch Các chế phẩm sinh học sủ dụng thường xuyên để làm vỏ tơm, đồng thời góp phần cải thiện môi trường ao nuôi hạn chế phát triển vi khuẩn nước Kết kiểm tra vi khuẩn vibrio mẫu tôm cho kết âm tính Điều phản ánh chế độ chăm sóc quản lý môi trường nuôi tốt hạn chế xâm nhập vi khuẩn vào thể tôm *Từ phân tích trên, link tỉnh Nghệ An, Thanh Hoá, Hà Tĩnh ta thấy rằng: 44 2500 100000 2000 Kl/ml 80000 Nghệ An 60000 Hà Tĩnh Thanh Hoá 40000 Kl/ml 120000 Nghệ An 1500 Hà Tĩnh 1000 Thanh Hoá 500 20000 0 T4 T5 T6 T7 T4 TC T5 T6 T7 TC Tháng thu mẫu tháng thu mẫu Đồ thị 3.8: Đồ thị Kiểm tra vi khuẩn hiếu khí vibrio sp trung bình nƣớc ao nuôi tôm tỉnh thu mẫu Sự biến động vi khuẩn tỉnh tương đối tăng dần lên.Trong Nghệ An tỉnh cho kết phân tích lượng vi khuẩn nước cao Điều dễ hiểu tôm ni theo hình thức bán thâm canh thâm canh, mật độ nuôi cao mức độ đầu thư thức ăn lớn hơn, tích tụ chất thải hữu nhiều điều kiện cho vi khuẩn phát triển Hai tỉnh Hà Tĩnh Thanh Hóa tơm ni theo hình thức quảng canh cải tiến, nhiên Thanh Hóa tỉnh có chế độ chăm sóc quản lý tốt nên cho kết nuôi tôm tương đối cao Từ đồ thị ta thấy kết phân tích tổng vi khuẩn hiếu khí ln nằm khoảng cho phép ngành tỉnh thu mẫu lượng vibrio sp vượt ngưỡng cho phép ngành đợt thu mẫu cuối Như biến động lượng vi khuẩn hiếu khí vibrio sp mơi trườn ao ni khơng có mối quan hệ rõ rệt 45 25% 20% 15% T4 T5 T6 10% 5% 0% Nghệ An Hà Tĩnh T Hoá Đồ thị 3.9: Đồ thị thể tỷ lệ % trung bình mẫu tơm nhiễm loài vibriosis tĩnh thu mẫu Về kết phân tích vi khuẩn vibrio sp tơm ta thấy tỷ lệ bắt gặp vibrio sp tôm ao phân tích Nghệ An cao Trong kết phân tích vibrio sp tơm Thanh Hố cho kết âm tính Điều phụ thuộc vào nhiều yếu tố sức khoẻ tôm nuôi, chất lượng môi trường ao nuôi, mật độ nuôi… 46 CHƢƠNG IV: KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Kết luận : 1 Kết phân lập vi khuẩn vibrio gây bệnh mẫu tôm sú Qua trình tiến hành thu mẫu phân tích tơi phân lập số lồi vibrio gây bệnh tôm sú nuôi ba tỉnh Nghệ An, Thanh Hóa, Hà Tĩnh sau: Tại Nghệ An: Kết phân lập tháng cho thấy ao A3 tôm bị nhiễm V harveyi với tỷ lệ nhiễm 20% Tháng có ao A2 nhiễm V cholerae với tỷ lệ nhiễm 20%, ao A3 nhiễm V anginolyticus với tỷ lệ nhiễm 40%, ao A5 nhiễm Harveyi với tỷ lệ nhiễm 40% Tháng có ao A1 nhiễm V vulnificus với tỷ lệ nhiễm 40% ao A5 nhiễm V cholerae với tỷ lệ nhiễm 60% Tháng mẫu tơm phân tích vi khuẩn cho kết âm tính Tại Hà Tĩnh: Kết phân lập vi khuẩn mẫu tôm thu Hà Tĩnh cho thấy tôm bị nhiễm V anginolyticus với tỷ lệ nhiễm 40% ao B2 B5 tháng Tại Thanh Hóa :Kết kiểm tra vi khuẩn vibrio mẫu tơm cho kết âm tính Theo kết nghiên cứu giới V cholerae, V harveyi, V anginolyticus, V vulnificus loài vi khuẩn gây bệnh tơm Trong V vulnificus, V harveyi gây bệnh phát sáng ấu trùng tôm giống [11] Vibrio anginolyticus gây bệnh hoại tử cục giáp xác 4.1.2 Kết kiểm tra vi khuẩn hiếu khí vi khuẩn vibrio nƣớc ao nuôi tôm 47 Kết kiểm tra tổng vi khuẩn hiếu khí nước tỉnh nghệ An, Thanh Hoá, Hà Tĩnh thấp nằm khoảng cho phép ngành.Tuy nhiên Nghệ An vao đợt thu mẫu cuối kết phân tích cho thấy có vượt ngưỡng cho phép ao A3 A4 Kết phân tích lượng vibrio sp nước ao ni tơm có vượt ngưỡng cho phép ngành tỉnh thu mẫu Càng cuối vụ hàm lượng vibrio sp nước cao 4.2 Đề xuất - Các quan chức tỉnh cần có cơng tác kiểm tra kiểm dịch nghiêm ngặt tôm đầu vào nhằm loại bỏ tôm mang mầm bệnh trước đưa vào ni - Cần có cơng trình cụ thể nghiên cứu bệnh tơm - Người dân cần tích cực việc liên kết với quan chức để việc nuôi tôm đạt hiệu cao 48 Tài liệu tham khảo I Tài liệu tiếng Việt Bộ thuỷ sản, Tuyển tập báo cáo khoa học hội thảo khoa học toàn quốc NTTS 29-30/9/1998 Nguyễn Văn Hảo(2005), Một số vấn đề kỹ thuật nuôi tôm sú công nghiệp Nhà xuất nơng nghiệpTP Hồ Chí Minh 3.Đỗ Thị Hịa(1996), Nghiên cứu số bệnh chủ yếu tôm sú (penaeus monodon Pabricius,1798) nuôi khu vực Nam Trung Bộ Luận án PTS khoa học nông nghiệp, trường Đại học Thủy Sản Nha Trang.(5MBV) Đỗ Thị Hoà (1998), Thử nghiệm biện pháp ngăn chặn lây nhiễm môndon Baculovirus (MBV) tôm sú ấu trùng trại tôm giống miền Trung Việt Nam - Tuyển tập báo cáo khoa học hội thảo toàn quốc NTTS, Viện nghiên cứu NTTS I.(17MBV) Nguyễn Thị Nguyện(2005), Báo cáo: Điểm lại số tình hình quan trắc bệnh động vật thủy sản 2001-2003 kết quan trắc 2004 Nhà xuất Nông Nghiệp Hà nội Nguyễn Trọng Nho (1991), Bước đầu nghiên cứu bệnh tôm sú ni Khánh Hồ Báo cáo khoa học.(VN) Sở thuỷ sản Hà Tỉnh (2006) Sở thuỷ sản Hà Tỉnh (2007) Sở thuỷ sản Thanh Hoá(2007), Báo cáo kết NTTS năm 2007 phương hướng phát triển NTTS năm 2008 49 10.Tạp chí thuỷ sản tháng 4/2008 11.Phan Lương Tâm (1994), khảo sát nguyên nhân gây chết tơm khu vực phía Nam Báo cáo khoa học, Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thuỷ Sản II 12.Trần Minh Tâm, Đái Duy Ban (1999) Bệnh thường gặp tôm, phương pháp chẩn đốn phịng trị Nhà xuất Nơng Nghiệp Hà Nội(8W)(8MBV) 13.Bùi Quang Tề(2001), Báo cáo tình hình bệnh tơm ni tỉnh ven biển phía Bắc năm 2001 Hội nghị bàn giải pháp phát triển nghề ni tơm tỉnh ven biển phía Bắc, Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thuỷ Sản I, Nhà Xuất Bản Nông Nghiệp.(4W)(VN) 14.Bùi Quang Tề(2003), Bệnh tôm ni biện pháp phịng trị Nhà xuất Nơng Nghiệp Hà nội 15.Bùi Quang Tề (2004), Bệnh Học thủy sản Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội.(3W),(3MB)(VN) 16.Bùi Quang Tề (2004), Tổng quan tình hình dịch bệnh thuỷ sản Nhà xuất nông nghiệp Hà Nội 17.,Bùi Quang Tề, Đỗ Thị Hòa, Nguyễn Hữu Dũng, Nguyễn Thị Muội(2004), Bệnh học thủy sản Nhà xuất Nông Nghiệp, Hà Nội 18.Nguyễn Việt Thắng(1996), Xác định nguyên nhân gây bệnh cho tơm ni khu vực phía Nam giải pháp phòng trị bệnh Báo cáo khoa học, Viện Nghiên Cứu Nuôi Trồng Thuỷ Sản II.(VN 19.Nguyễn Văn Thành(1999), Đánh giá rình độ cơng nghệ ni tơm bán thâm canh Việt Nam, Bộ thuỷ sản Hà Nội 50 20.Theo NNVN(2008),Tình hình sản xuất kinh doanh thuỷ sản quý 12008 Thông tin khoa học công nghệ kinh tế thuỷ sản, Trung tâm tin học thống kê - Bộ Nông nghiệp Phát triển Nông thôn 21.Trang thông tin điện tử Nghệ An(6/2008), Báo cáo chuyên đề kỹ thuật nuôi tôm sú vụ I năm 2005.http//www.nghean.gov.vn na 22.Phạm Văn Trang, Nguyễn Trung Thanh, Nguyễn Diệu Phương(2004), Kỹ thuật ni số lồi tơm phổ biến Việt Nam Nhà xuất Nông Nghiệp Hà Nội 23.UBND xã Quảng Chính(2008), Báo cáo tình hình thực nhiệm vụ kinh tế xã hội, quốc phòng an ninh năm 2007 mục tiêu trọng tâm năm 2008 24.Phan Thị Vân(2000), Quản lý sức khoẻ tôm số bệnh thường gặp gây thiệt hại lớn nghề nuôi tôm Viện nghiên cứu nuôi trồng Thuỷ sản I(6W) 25.Viện nghiên cứu ni trồng Thuỷ sản I (2001), Tóm tắt số kết nghiên cứu bệnh tơm tỉnh phía Bắc năm 2001., Nhà xuất nông nghiệp – Hà Nội 26.Viện nghiên cứu nuôi trồng Thuỷ sản I (2003), Tuyển tập báo cáo khoa học nuôi trồng thuỷ sản 2003., nhà xuất nông nghiệp – Hà Nội 27.Viện nghiên cứu nuôi trồng Thuỷ sản I (2007),Tuyển tập báo cáo khoa học 2005Nhà xuất Nông Nghiệp Hà nội 51 II Tài liệu tiếng anh 28 Boonyaratpalin S, Chansue N, Chinabut S, Lawhavaint O, Ruangpan L, Sirikharncham P, Tangtrongpiros J, tonguthai K (1997) Disease in Asian aquaculture III Proceedings of the Third Symposium on Disease in Asian aquaculture,29 Jan to Fed 1996 Bangkok, Thailand Fish Health Section Asian Fishries Society, Decembr 1997.(20 MBV) 29 Chanratchakool, 1994, health management in shrimp pond Bangkok, 1994 30.Chanratchakool P, 1996 Low water exchange System for shrimp cultủe In: The AAHRI new sletter, July, 1996 31 Chen S N(1992) Penaeus monodon Baculovirus (MBV) in Larval Giant Tiger Prawns In: Disease of culture Penaeus Shrimp in Asian and United States by Fulk and Kewan L Main Hawai.(9W) 32 D V Lightner,1988 Vibrio disease of penaeus shrimp In: Disease diagnosis and control of penaeid shrimp in North Amecia, C J sindermann, 1988 33 D V Lighter(1996) Vibriosis Cultured and Indentification In: Hanbook of Shrimp Pathology and Diagnostic procedures for diseases of culture Peneaid shrimp The word Aquaculture Society, 1996(23MBV) 34 D V Lightner, 1996 Introdution In: Handbook of shrimp pathology and Diagnostic procedures of diseases of culture peneaid shrimp The World aquaculture society, 1996 Section 1/ Introduction/9p 52 35 Donal V Lighter and R M Redman: Shrimp disease and current diagnostic methed: In aquaculture volum 164 – 1998 (2WW) 36 DV Lig, 1996 Vibriois cultured and Identification In: Handbook of shrimp pathology and Diagnostic procedures of diseases of culture peneaid shrimp The World aquaculture society, 1996 Iddkya Karunasaga, Indrani Karunasaga and R.K Umesha, Microbial Disease in Shrimp Aquaculture, Department of Fishery Microbiology, University and Agricultural Sciences, Collge of Fisheries, Mangalore-557002, India.(23 nấm) 37 Jiravanichpaisal P et al, 1995 Comparatve histopathology of vibriosis in black Tiger shrimp, penaeus monodon In: Diséae in Asian aquaculture II by M Shariff: J R Athur and R.p Subasingbe 38 Lighter D V (1996), “ Yellow-head virus disease”, A handbook of shrimp pathology and diagnostic procedures for disease of cultured penaeid shrimp, The Worrld Aquaculture Society, section 3: / Viruses/YHV/pp.(27YHV) 39 Lighter D V (1996), A Handbook of pathology and diagnostic procedures for disease of cultured penaeid shrimp, World aquaculture Society, baton Rouge, Lousisana, USA.(1WW)(26mbv) 40 Lightner D V, 1988 MBv virus disease of penaeid shrimp In: Disease diagnotis and cotrl of penaeid Shrimp in North Americal, C j Sindermann, 1988 41 Limsuwan C D (1997) What kind of White Spot kills Shrimp In: The AAHIR newsletter Volume 6, number 2, December 1997 (26 mbv) 42 Office International Des Epizooties (1997) Disease of Crustaceans Other significant Disease In: Diagnos tic manual for aquatic animal disease The OIE Fish disease commission(11W) 53 43 Pitogo, L C R,1988 Isolation and identification of luminous bacteria causing Mortalites in penaeus monodon hatcheries in Paney Asian Aquaculture N01, 1988, up 44 Shariff M, J R Arthur, R P Subasinnghe, 1995 Disease in Asian Aquaculture II Proceeding of the Second Symposium on Disease in Asian Aquaculture 25-29, October 1993 Phuket, Thailand Fish Health Society, December 1995 45 Shariff M, Subasinghe R p and Arthur J R, 1992 Disease in Asian Aquaculture I Proceeding of the fish Symposium on Disease in Asian Aquaculture, 26-29 November 1990 Bali, Indonesia Fish Health Section Asian Fisheries Society, March 1992 46 Wang Y g et al, 1999; Areview on diseases of cultured shrimp in Malaysia Aquatic arnimal health unit, Faculty of veterinary medicine, University Pủta Malaysia, 43400UPM, Serdary, Selemgen Malaysia 18p 54 ... tài: “ Nghiên cứu có mặt vi khu? ??n Vibrio mẫu tôm S? ?( Penaeus monodon) biến động vi khu? ??n môi trường ao nuôi tôm Sú số tỉnh phía Bắc? ?? Mục đích đề tài: - Bước đầu làm quen với phương pháp nghiên cứu. .. bớt Trên thực tế hộ nuôi tôm cho kết nuôi tốt hộ thu mẫu Nghệ An So sánh lượng vi khu? ??n tổng số vi khu? ??n vibrio nước ao nuôi tôm ta thấy: Sự biến động vi khu? ??n tổng số vi khu? ??n vibrio nước không... 270C/18-24 giờ, đếm số khu? ??n lạc nhạt màu vi khu? ??n tổng số Số lượng vi khu? ??n tính theo cơng thức: A(cfu/ml) = X 1/ K.V A: Số khu? ??n lạc vi khu? ??n mọc đơn vị thể tích(KL/ml) 30 X: Số khu? ??n lạc trung