Ảnh hưởng của dung môi, tỷ lệ nguyên liệu với dung môi và thời gian tiếp xúc đến quá trình trích ly polyphenol từ hạt xoạt Cát Chu (Mangifera indica)

Mục tiêu của nghiên cứu là đánh giá sự ảnh hưởng của dung môi (loại dung môi và nồng độ dung môi), tỷ lệ nguyên liệu so với dung môi và thời gian tiếp xúc đến hàm lượng và hoạt tính kháng oxy hóa riêng của polyphenol tổng được trích ly từ hạt xoài Cát Chu (Mangifera indica) nhằm tìm ra điều kiện thích hợp để trích ly polyphenol. Mời các bạn cùng tham khảo!

Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 ẢNH HƯỞNG CỦA DUNG MÔI, TỶ LỆ NGUYÊN LIỆU VỚI DUNG MÔI VÀ THỜI GIAN TIẾP XÚC ĐẾN Q TRÌNH TRÍCH LY POLYPHENOL TỪ HẠT XOẠT CÁT CHU (MANGIFERA INDICA) *Lê Phan Thùy Hạnh; Trần Quyết Thắng Trường Đại học Công nghiệp Thực phẩm TP.HCM Email: *hanhlpt@cntp.edu.vn TÓM TẮT Mục tiêu nghiên cứu đánh giá ảnh hưởng dung môi (loại dung môi nồng độ dung môi), tỷ lệ nguyên liệu so với dung môi thời gian tiếp xúc đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol tổng trích ly từ hạt xồi Cát Chu (Mangifera indica) nhằm tìm điều kiện thích hợp để trích ly polyphenol Kết quả, điều kiện thích hợp để trích ly polyphenol: dung mơi ethanol với tỷ lệ ethanol/nước 50/50 (v/v); tỷ lệ nguyên liệu: dung mơi/nước 1:30 (w/v); thời gian 4h Từ khóa: Polyphenol, trích ly, hạt xồi cát chu ĐẶT VẤN ĐỀ Việt Nam nước đứng thứ 13 diện tích sản lượng xoài giới (87.000 gần triệu xoài loại) Xoài trồng phổ biến 59/63 tỉnh/thành Việt Nam Trong đó, xồi Cát Chu chiếm khoảng 59,1% Phần lớn xoài Cát Chu xuất dạng trái tươi (xoài loại 1) xoài cắt lát qua chế biến (xoài loại 2) xuất sang Nhật, Singapore, Hàn Quốc Newzealand (SOFRI, 2013) Với việc chế biến xuất xoài Cát Chu ngày tăng lượng phụ phẩm từ xồi (vỏ, hạt…) sản sinh ngày nhiều Hiện nay, lượng phụ phẩm chủ yếu dùng để sản xuất thức ăn chăn ni, làm phân bón thải bỏ môi trường Nhiều kết nghiên cứu cho thấy polyphenol – hợp chất tìm thấy trái thể đặc tính sinh học quý đặc biệt khả chống oxy hóa, chống viêm, chống dị ứng khả kháng khuẩn (Manach, 2005) Việc tận dụng phụ phẩm từ xoài (nguyên liệu rẻ tiền) để trích polyphenol để làm dược liệu hay ứng dụng chế biến sản phẩm thực phẩm chức có ý nghĩa thực tiễn lớn Theo Pinelo et al (2005), q trình trích ly bị ảnh hưởng yếu tố khác phương pháp trích ly, loại dung mơi, nồng độ dung mơi, thời gian tiếp xúc, nhiệt độ tích ly, tỷ lệ nguyên liệu so với dung mơi kích thước ngun liệu 11 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 Mục tiêu nghiên cứu khảo sát ảnh hưởng loại dung mơi trích, nồng độ dung mơi, tỷ lệ nguyên liệu so với dung môi thời gian đến q trình trích ly hợp chất polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa sản phẩm chiết từ hạt xồi Cát Chu (Mangifera indica) Kết thí nghiệm khảo sát làm sở để thiết kế thí nghiệm tối ưu hóa NGUN/VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP Nguyên/vật liệu Hạt xoài Cát Chu Mangifera indica phải tươi, không dập nát, hạt không hư hỏng, sâu mọt, thu mua Huyện Cái Bè, Tiền Giang Nguyên liệu loại bỏ phần thịt cịn sót lại hạt, rửa sạch, để ráo, sấy khô phương pháp sấy thăng hoa nhiệt độ - 50oC thời gian 72 h Lúc này, hàm lượng ẩm nguyên liệu < 7% Nguyên liệu nghiền nhỏ máy nghiền mẫu chia vào túi PE nhỏ với khối lượng khoảng ± 0.03g dùng cho lần thí nghiệm Các túi PE chứa mẫu hàn ghép mí bảo quản tủ đơng, t0 < - 20oC Phương pháp Phương pháp phân tích Xác định hàm lượng polyphenol tổng phương pháp so màu (Phương pháp Folin – Ciocalteau) Theo Singleton cộng (1999), với thay đổi, cụ thể sau: - Nguyên tắc: Dựa vào phản ứng oxy hóa hợp chất polyphenol thuốc thử Folin – Ciocalteau, dùng axit gallic làm chất chuẩn Phản ứng liên quan đến việc làm giảm hàm lượng polyphenol, hợp chất bị oxy hóa mơi trường kiềm dẫn đến hình thành ion superioxide, ion phản ứng với molybdate để hình thành dạng molybdenum oxide (MoO4+) Mylybdenum oxide dạng phức chất có màu xanh lam, hấp thụ bước sóng 760 nm Cường độ màu hỗn hợp phản ứng tỉ lệ thuận với nồng độ polyphenol phạm vi định Dựa vào cường độ màu đo đồ thị chuẩn acid gallic với thuốc thử xác định hàm lượng polyphenol mẫu - Cách tiến hành: + Xây dựng phương trình đường chuẩn acid gallic: Cân mg axit gallic hòa tan 100 ml nước cất Lấy axit gallic vào bình định mức với lượng: 20; 30; 40; 50; 60; 70; 80 µg Hút tiếp 0,5 ml thuốc thử Folin-Ciocaulteur vào bình định mức Sau phút cho tiếp 2,5 ml Sodium Cacbonat bão hòa Thêm nước cất đến vạch định mức, để tối 30 phút Đo cường độ hấp thu bước sóng 760 nm Từ tương quan số mg axit gallic cường độ màu đo được, ta dựng đồ thị chuẩn axit gallic theo phương pháp thống kê 12 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 + Xác định hàm lượng polyphenol: Hút 1ml dịch chiết +0,5 ml thuốc thử Folin - Ciocalteau để khoảng phút Sau thêm vào 2,5 ml dung dịch Na2CO3 bão hòa, lắc nhẹ cho đều, định mức nước cất đến vạch, để bóng tối 30 phút tiến hành đo độ hấp thụ bước sóng 760 nm Từ kết so màu, dựa phương trình chuẩn axit gallic xác định nồng độ polyphenol Xác định hoạt tính oxy hóa theo phương pháp 2,2 – diphenyl – - picryl hydrazyl radical (DPPH) (Molyneux, P., 2004) - Nguyên tắc: Dựa vào khả bắt giữ gốc tự DPPH chất có tác dụng chống oxy hóa Khi dung dịch DPPH trộn với dung dịch chất có khả nhường nguyên tử hydro gốc tự vị trí ngun tử nitơ DPPH phản ứng với hợp chất có khả cho nguyên tử hydro làm màu tím ban đầu dung dịch, chuyển dần sang màu vàng nhạt Hàm lượng DPPH lại dung dịch sau phản ứng xác định phương pháp so màu bước sóng 517 nm - Hóa chất: Dung dịch DPPH mM methanol - Cách tiến hành: Cho dịch chiết với lượng khác vào bình định mức, sau thêm 1ml dung dịch DPPH 1mM, định mức đến vạch để nhiệt độ 4oC 30 phút Mẫu đối chứng mẫu chứa DPPH Sự thay đổi độ hấp thụ bước sóng 517 nm đo thiết bị đo quang UV-Vis lượng DPPH cịn lại tính tốn Hoạt lực thu dọn gốc tự thể tỷ lệ phần trăm ức chế tính theo cơng thức: %= A0 − A1 100 A0 Trong đó: A0 độ hấp thụ mẫu đối chứng A1 độ hấp thụ mẫu có dịch chiết Hoạt tính chống oxy hóa sau biểu thị quy đổi qua giá trị IC50 biểu diễn hàm lượng hợp chất có khả ức chế hay thu dọn 50% hàm lượng gốc tự có mặt Như vậy, mẫu có khả ức chế 50% hàm lượng gốc tự hàm lượng polyphenol nhỏ (hoặc dạng nghịch đảo (1/hàm lượng) cao) có hoạt tính kháng oxy hóa cao Tuy nhiên, hoạt tính kháng oxy hóa lại phụ thuộc vào hàm lượng polyphenol thu được, đó, nghiên cứu này, hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol quy hoạt tính kháng oxy hóa riêng (số đơn vị hoạt tính kháng oxy hóa/một đơn vị khối lượng) để thuận tiện cho việc xử lý số liệu, hoạt tính kháng oxy hóa thể dạng nghịch đảo 13 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 Phương pháp nghiên cứu Ảnh hưởng dung mơi đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol ± 0.03 g phụ phẩm hạt khơ (đã chọn) nghiền, đem trích ly qua dung môi nước, Ethanol/nước (v) (Jose Contreras, 2011), Acetone/nước (4v) (Atita Panyathep, 2012) methanol/nước (v) (Yean-Yean soong, 2004) 24 với tỷ lệ nguyên liệu/dung môi 1/20 (w/v) nhiệt độ phịng, đem quay nhiệt độ 40oC điều kiện chân không Kết thí nghiệm đánh giá qua: + Hàm lượng polyphenol (tính theo axit gallic) phương pháp so màu (Mục 2.2.1.1) + Khả kháng oxy hóa theo phương pháp 2,2 – diphenyl – - picryl hydrazyl radical (DPPH) (Mục 2.2.1.2) Từ kết trên, chọn dung mơi phù hợp cho q trình chiết trích (nhằm thu hợp chất có hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol cao) Ảnh hưởng tỷ lệ dung mơi/nước đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol ± 0.03 g phụ phẩm hạt khơ (đã chọn) nghiền, đem trích ly dung môi chọn với tỷ lệ dung môi/nước 25/75; 50/50; 75/25; 100/0 24 với tỷ lệ nguyên liệu/dung môi 1/20 (w/v) nhiệt độ phịng, đem quay nhiệt độ 40oC điều kiện chân khơng Kết thí nghiệm đánh giá qua: + Hàm lượng polyphenol (tính theo axit gallic) phương pháp so màu (Mục 2.2.1.1) + Khả kháng oxy hóa theo phương pháp 2,2 – diphenyl – – picryl hydrazyl radical (DPPH) (Mục 2.2.1.2) Từ kết quả, chọn tỷ lệ dung môi/nước phù hợp cho trình chiết trích (nhằm thu hợp chất có hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol cao) Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu so với dung mơi/nước đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol ± 0.03 g phụ phẩm hạt khơ (đã chọn) nghiền, đem trích ly dung môi chọn 24 với tỷ lệ nguyên liệu so với tỷ lệ dung môi/nước (w/v) 1/10; 1/20; 1/30; 1/40; nhiệt độ phòng, đem cô quay nhiệt độ 40oC điều kiện chân khơng Kết thí nghiệm đánh giá qua: + Hàm lượng polyphenol (tính theo axit gallic) phương pháp so màu (Mục 2.2.1.1) + Khả kháng oxy hóa theo phương pháp 2,2 – diphenyl – - picryl hydrazyl radical (DPPH) (Mục 2.2.1.2) Từ kết trên, chọn tỷ lệ nguyên liệu so với tỷ lệ dung mơi/nước phù hợp cho q trình chiết trích (nhằm thu hợp chất có hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol cao) 14 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 Ảnh hưởng thời gian tiếp xúc đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol ± 0.03 g phụ phẩm hạt khơ (đã chọn) nghiền, đem trích ly dung môi, tỷ lệ nguyên liệu so với tỷ lệ dung môi/nước tỷ lệ dung môi/nước chọn nhiệt độ phòng với thời gian giờ, giờ, 16 giờ, đem cô quay nhiệt độ 40oC điều kiện chân khơng Kết thí nghiệm đánh giá qua: + Hàm lượng polyphenol (tính theo axit gallic) phương pháp so màu (Mục 2.2.1.1) + Khả kháng oxy hóa theo phương pháp 2,2 – diphenyl – - picryl hydrazyl radical (DPPH) (Mục 2.2.1.2) Từ kết trên, chọn thời gian phù hợp cho trình chiết trích (tạo hợp chất có hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol cao) Phương pháp xử lý số liệu Tất thí nghiệm lặp lại lần Số liệu thí nghiệm trình bày dạng giá trị trung bình ( SD) Phân tích xác suất thống kê (phân tích ANOVA) ứng dụng để tìm khác biệt Đồ thị vẽ phần mềm Excel KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN Ảnh hưởng dung mơi đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol Với kỹ thuật trích ly rắn – lỏng việc lựa chọn dung mơi phù hợp quan trọng, có tính chất định đến hiệu suất q trình trích ly Ở khảo sát này, dung môi/nước gồm: methanol/nước (v) (Jose Contreras, 2011); Acetone/nước (4v) (Atita Panyathep, 2012); Ethanol/ nước (v) (Yean-Yean soong, 2004) lựa chọn để trích ly a a a b Hình 1: Ảnh hưởng dung mơi đến hiệu trích ly hàm lượng polyphenol (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) 15 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 a c b d Hình 2: Ảnh hưởng dung mơi đến hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) Với kết trên, trích ly nguyên liệu điều kiện giống (thời gian, tỷ lệ dung môi/nguyên liệu, nhiệt độ) cho kết hàm lượng polyphenol trích ly ba dung mơi ethanol, methanol acetone cao khơng khác biệt có ý nghĩa thống kê khoảng tin cậy 95% Trong đó, lượng polyphenol thu từ q trình trích ly sử dụng dung môi nước nhỏ khác biệt có ý nghĩa thống kê khoảng tin cậy 95% Điều giải thích dung mơi phân cực hịa tan hợp chất phân cực tốt dung môi không phân cực hịa tan hợp chất khơng phân cực tốt Q trình trích ly sử dụng dung mơi nước (có độ phân cực mạnh ethanol, methanol acetone), ngồi polyphenol trích ly lơi thêm nhiều hợp chất đại phân tử khác như: polysaccharide, protein…vào dịch chiết (Rostagno cộng sự, 2003), gây ảnh hưởng đến độ xác phép kiểm định hàm lượng hoạt tính riêng polyphenol (Jin Rusell, 2010) Ngồi ra, nhóm tác giả Lapornik cộng (2005) cho nguyên nhân dịch trích ly nước khơng tạo hiệu trích ly polyphenol mong muốn dịch chiết cịn có tham gia hoạt động enzyme polyphenol oxydase, làm giảm hàm lượng hoạt tính hợp chất polyphenol, hoạt động enzyme bị ức chế sử dụng dung môi hữu cho trích ly Như vậy, dung mơi thích hợp để trích ly polyphenol trường hợp ba loại dung môi ethanol, methanol acetone Tuy nhiên, so sánh hoạt tính kháng oxy hóa riêng loại dung mơi ethanol, methanol acetone lại có khác biệt có ý nghĩa thống kê khoảng tin cậy 95% Trong đó, hoạt tính kháng oxy hóa riêng dịch chiết trích ly từ dung mơi ethanol cho kết cao Vậy, chọn dung môi ethanol để khảo sát q trình trích ly Ảnh hưởng tỷ lệ dung môi/nước đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol Độ phân cực dung môi yếu tố có tính định đến hiệu trích ly polyphenol Việc điều chỉnh độ phân cực dung môi chọn cho phù hợp với q trình trích ly thực dễ dàng cách thay đổi tỷ lệ phối trộn dung môi với nước Các cách 16 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 phối trộn khác cho dung mơi trích ly với nồng độ khác Ở thí nghiệm khảo sát này, ethanol phối trộn nước với tỷ lệ ethanol/nước sau: 25/75; 50/50; 75/25; 100/0 b b b a Hình 3: Ảnh hưởng tỷ lệ dung mơi/nước đến hàm lượng polyphenol trích ly (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) b b a c Hình 4: Ảnh hưởng tỷ lệ dung mơi /nước đến hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol trích ly (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) Kết xử lý ANOVA cho giá trị P < 0.05, với tỷ lệ ethanol/nước khác thu lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa riêng chúng khác có ý nghĩa thống kê độ tin cậy 95% Từ kết thu cho thấy, tỷ lệ ethanol/nước so với nguyên liệu tăng tỷ lệ ethanol so với nước, hàm lượng polyphenol trích ly tăng đạt giá trị cao tỷ lệ ethanol/nước (ml/ml) 50/50, sau hàm lượng polyphenol có xu hướng giảm dần tăng tỷ lệ nước so với ethanol Đồng thời, tăng tỷ lệ ethanol vào nước hoạt tính kháng oxy hóa riêng có xu hướng giảm dần Như vậy, tỷ lệ ethanol/nước phù hợp để trích ly dung mơi ethanol nước với tỷ lệ 50/50 17 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 Kết khảo sát phù hợp với số tác giả, theo tác giả Rostango cộng (2004), thêm lượng nước định từ 30 – 40% vào dung môi cải thiện hiệu trích ly polyphenol ngun liệu thực vật có nhiều loại polyphenol, hợp chất chứa nhiều nhóm hydroxyl gốc đường phân tử ưa nước nên chúng tan tốt nước dung môi hữu nguyên chất Nhưng tăng hàm lượng nước mức (trên 60%) làm giảm hiệu trích ly số hợp chất polyphenol phổ biến khác isoflavone, flavanone flavone có số lượng methoxyl cao chất phân cực yếu, tan tốt dung môi phân cực yếu (Bradshaw cộng sự, 2001) Tóm lại, việc thêm nước vào ethanol với lượng vừa phải làm tăng hiệu trích ly polyphenol, đồng thời nồng độ ethanol thấp độ an tồn cao Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu so với dung môi/ nước đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol Tỷ lệ nguyên liệu: Dung môi/nước yếu tố cần thiết để đánh giá ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu: dung mơi/nước để tối ưu hóa điều kiện trích ly polyphenol từ loại nguyên liệu thực vật khảo sát Tỷ lệ nguyên liệu: Dung môi/nước định đến hiệu trích ly, đồng thời cịn mang đến lợi ích kinh tế Việc khảo sát đảm bảo khơng có thiếu hụt lẫn hao phí xẩy sử dụng q q nhiều dung mơi để trích ly, từ đó, giúp sử dụng lượng dung môi/nước cho hiệu giảm đến mức thấp việc thải loại hay xử lý dung mơi sau q trình trích ly c a c b Hình 5: Ảnh hưởng tỷ lệ nguyên liệu: dung mơi/nước đến hàm lượng trích ly polyphenol (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) 18 Hội nghị Khoa học An tồn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 b b a b Hình 6: Ảnh hưởng tỷ lệ ngun liệu: dung mơi/nước đến hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) Kết thu giá trị trung bình ba lần lặp Số liệu xử lý ANOVA để nhận xét khác biệt mẫu Giá trị P - value cho hàm lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa riêng chúng cho thấy có khác biệt có ý nghĩa mẫu thay đổi tỷ lệ dung mơi/nước trích ly so với nguyên liệu Kết cho thấy, tăng lượng dung môi/nước từ tỷ lệ nguyên liệu: dung môi/nước từ 1:10 lên đến tỷ lệ 1:30 hàm lượng polyphenol trích ly tăng theo đồng thời hoạt tính kháng oxy hóa chúng tăng Tuy nhiên, tăng tỷ lệ dung môi/nước so với nguyên liệu lên 40 độ tăng hàm lượng lẫn hoạt tính hợp chất polyphenol trích ly khơng khác biệt có ý nghĩa với tỷ lệ nguyên liệu: dung môi/nước 1:30 Từ đó, kết luận tỷ lệ nguyên liệu: dung môi/nước 1:30 tỷ lệ phù hợp để trích ly polyphenol cho loại ngun liệu Có kết lượng dung mơi/nước lớn lượng polyphenol thu cao tạo chênh lệch nồng độ cần thiết bên bên ngồi mơi trường, tức ln có động lực cho q trình Tuy nhiên, lượng polyphenol tăng ta tăng tỷ lệ dung mơi/nước điều khơng ln ln tỷ lệ thuận với lượng dung môi sử dụng Bởi lẽ, mối liên hệ hàm lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa riêng chúng phức tạp không tuân theo qui luật cụ thể Khả kháng oxy hóa khơng dựa vào hàm lượng chất chống oxy hóa mà cịn phụ thuộc vào cấu trúc tương tác chất Cấu trúc hợp chất phenolic yếu tố định khả loại trừ gốc tự Hoạt tính kháng oxy hóa phụ thuộc vào số lượng vị trí hydroxyl có liên quan với nhóm chức carboxyl (Balasumdram cộng sự, 2006) số chất khác carotenoid, vitamin, khoáng chất tương tác loại chất chống oxy hóa với (Ratnam cộng sự, 2006) Vì vậy, việc tăng tỷ lệ dung mơi/nước q trình trích ly khơng phải giải pháp hữu hiệu để cải thiện trình trích ly Bên cạnh đó, theo Kossah cộng (2010), sử dụng lượng dung mơi/nước lớn lượng oxy hòa tan vào lớn, làm giảm hàm lượng hoạt 19 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 tính chống oxy hóa polyphenol Ngược lại, lượng dung mơi/nước q khơng đủ để trích ly hết polyphenol nguyên liệu, gây thất thoát Ảnh hưởng thời gian tiếp xúc đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol Thời gian trích ly đóng vai trị định tồn q trình trích ly polyphenol Yếu tố thời gian sử dụng hợp lý khơng mang lại lợi ích hiệu suất trích ly mà cịn mang đến lợi ích không nhỏ mặt kinh tế Các mốc thời gian h, h, h, 16 h chọn để khảo sát b b b a Hình 7: Ảnh hưởng thời gian đến hàm lượng polyphenol trích ly (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) b a d c d d Hình 8: Ảnh hưởng thời gian đến hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol trích ly (Các số liệu có kí tự chung khác biệt khơng có ý nghĩa) Tương tự khảo sát trên, kết thu giá trị trung bình ba lần lặp Số liệu xử lý ANOVA để nhận xét khác biệt mẫu Giá trị P-value cho hàm lượng polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa riêng chúng cho thấy có khác biệt có ý nghĩa mẫu thay đổi thời gian trích ly 20 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 Khi tăng thời gian từ h lên h, hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng polyphenol trích ly tăng dần có khác biệt ý nghĩa Nếu tiếp tục tăng thời gian trích ly hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol có xu hướng giảm dần Với kết hiệu trích ly polyphenol cao thời gian trích ly h Sở dĩ có kết thời gian ngắn, không đủ để dung môi xâm nhập vào tế bào, hịa tan polyphenol trích ly ngồi lượng polyphenol thu thấp, ngược lại thời gian trích ly dài ảnh hưởng đến hoạt tính oxy hóa polyphenol KẾT LUẬN Qua kết khảo sát yếu tố độc lập, yếu tố: dung môi, dung môi/nước, tỷ lệ nguyên liệu: dung môi/nước thời gian tiếp xúc ảnh hưởng đến hiệu trích ly polyphenol (P-value < 0.05 hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng chúng) Điều kiện để trích ly polyphenol với hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa riêng cao từ hạt xồi Cát Chu sau: sử dụng dung môi ethanol; tỷ lệ ethanol/nước: 50/50 (v/v); tỷ lệ nguyên liệu: ethanol/nước 1: 30 (w/v), thời gian trích ly nhiệt độ phòng (oC) TÀI LIỆU THAM KHẢO [1] Sofri - Số liệu xoài vùng miền Nam Viện ăn miền Nam (2013) [2] Claudine Manach, Gary Williamson, Christine Morand, Augustin Scalbert, and Christian Rémésy - Bioavailability and bioefficacy of polyphenols in humans I Review of 97 bioavailability studies American Society for Clinical Nutrition 81(suppl) (2005) 230S– 42S [3] Pinelo, M., Rubilar, M., Jerez, M., Sineiro, J and Nunez, M J - Effect of solvent, temperature, and solvent-tosolid ratio on the total phenolic content and antiradical activity of extracts from different components of grape pomace Journal of Agricultural and Food Chemistry 53 (2005) 2111-2117 [4] Singleton, V.L., Orthofer, R., Lamuela-Raventos, R.M - Analysis of total phenols and other oxydation substrates and antioxydants by means of Folin-Ciocalteu reagent Methods Enzymol 299 (1999) 152-178 [5] Molyneux, P - The use of the stable free radical diphenylpicrylhydrazyl (DPPH) for estimating antioxydant activity Songklanakarin J Sci Technol 26(2) (2004) 211-219 [6] José Contreras-Calderón, Lilia Calderón-Jaimes, Eduardo Guerra-Hernández, Belén García-Villanova - Antioxydant capacity, phenolic content and vitamin C in pulp, peel and seed from 24 exotic fruits from Colombia Food Research International 44 (2011) 2047– 2053 [7] Atita Panyathepa, Teera Chewonarina, Khanittha Taneyhillb, Usanee Vinitketkumnuen Antioxydant and anti-matrix metalloproteinases activities of dried longan (Euphoria longana) seed extract ScienceAsia 39 (2012) 12–18 21 Hội nghị Khoa học An toàn dinh dưỡng An ninh lương thực lần năm 2018 [8] Yean-Yean Soong, Philip J Barlow - Antioxydant activity and phenolic content of selected fruit seeds Food Chemistry 88 (2004) 411-417 [9] Mauricio A Rostagno, Miguel Palma, Carmelo G Barroso - Ultrasound-assisted extraction of soy isoflavones Journal of Chromatography A 1012 (2003) 119–128 [10] Jin Dai and Russell J Mumper - Plant Phenolics: Extraction, analysis and Their Antioxydant and Anticancer Properties Molecules 15 (2010) 7313-7352, ISSN 1420-3049 [11] Lapornik B., Prosek M., Golc Wondra A - Comparison of extracts prepared from plant byproducts using different solvent and extraction time, Journal of polymerization J Agric Food Chemistry 47 (2005) 2719-2723 [12] Mauricio A Rostagno, Miguel Palma, Carmelo G Barroso - Pressurized liquid extraction of isoflavones from soybeans Analytica Chimica Acta 522 (2004) 169–177 [13] Bradshaw, M.P.; Prenzler, P.D.; Scollary, G.R J Agric - Ascorbic Acid-Induced Browning of (+)-Catechin In a Model Wine System Food Chemistry 49 (2001) 934-939 [14] Balasundaram N, Sundaram K and Samman - Phenolic compounds in plants and agriindustrial by-products: Antioxydant activity, occurrence and potential uses Food Chemistry 99 (2006) 191-203 [15] Ratnam D, Ankola D, Bhardwaj V, Sahana D, Kumar M - Role of antioxydants in prophylaxis and therapy: a pharmaceutical perspective J Controlled Release 113 (2006) 189-207 [16] Kossah, R., Nsabimana, C., Zhang, H., Chen, W - Optimization of extraction of polyphenols from Syrian sumac (Rhus coriaria L.) and Chinese sumac (Rhus typhina L.) fruits Research Journal of Phytochemistry (2010) ISSN 1819-3471 EFFECTS OF SOLVENT, SAMPLE TO SOLVENT RATIO AND EXTRACTION TIME ON EXTRACTION OF POLYPHENOL FROM (MANGIFERA INDICA) CAT CHU MANGO SEED ABSTRACT The objective of this study was to evaluate the effects of solvent (solvent type and solvent concentration), sample to solvent ratio and extraction time on total phenolic content and own antioxydant capacity of the extraction of phenolic compounds from (Mangifera indica) Cat chu mango seeds to find out the optimal conditions for polyphenolic extracts The results showed that, the optimal conditions for polyphenolic extracts: ethanol solvent; ethanol-to-water ratio of 50/50 (v/v); sample to solvent ratio of 1/30 (w/v) and extraction time of 4h Keywords: Polyphenol, extraction, Cat chu mango seed 22 ... Ảnh hưởng thời gian tiếp xúc đến hàm lượng hoạt tính kháng oxy hóa polyphenol ± 0.03 g phụ phẩm hạt khơ (đã chọn) nghiền, đem trích ly dung môi, tỷ lệ nguyên liệu so với tỷ lệ dung môi/ nước tỷ. .. sát ảnh hưởng loại dung mơi trích, nồng độ dung mơi, tỷ lệ ngun liệu so với dung môi thời gian đến trình trích ly hợp chất polyphenol hoạt tính kháng oxy hóa sản phẩm chiết từ hạt xồi Cát Chu (Mangifera. .. tính hợp chất polyphenol trích ly khơng khác biệt có ý nghĩa với tỷ lệ nguyên liệu: dung môi/ nước 1:30 Từ đó, kết luận tỷ lệ nguyên liệu: dung môi/ nước 1:30 tỷ lệ phù hợp để trích ly polyphenol cho