“Định lượng polyphenol, flavonoid và khảo sát hoạt tính ức chế enzym α – glucosidase, ức chế tế bào ung thư của hoa Mua (Melastoma candidum D. Don) và hoa Đậu biếc (Clitoria ternatea L.)

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC - ĐIỀU DƯỠNG -   - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƯỢC MÃ SỐ: 7720201 ĐỊNH LƯỢNG POLYPHENOL, FLAVONOID VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α − GLUCOSIDASE, ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÂY MUA (Melastoma candidum D Don) VÀ CÂY ĐẬU BIẾC (Clitoria ternatea L.) Cán hướng dẫn: ThS TRÌ KIM NGỌC Sinh viên thực hiện: NGUYỄN KHẢ VY MSSV: 15D720401300 LỚP: ĐẠI HỌC DƯỢC 10C Cần Thơ, 2020 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC - ĐIỀU DƯỠNG -   - KHÓA LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƯỢC MÃ SỐ: 7720201 ĐỊNH LƯỢNG POLYPHENOL, FLAVONOID VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α − GLUCOSIDASE, ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÂY MUA (Melastoma candidum D Don) VÀ CÂY ĐẬU BIẾC (Clitoria ternatea L.) Cán hướng dẫn: ThS TRÌ KIM NGỌC Sinh viên thực hiện: NGUYỄN KHẢ VY MSSV: 15D720401300 LỚP: ĐẠI HỌC DƯỢC 10C Cần Thơ, 2020 LỜI CẢM ƠN Trải qua hành trình năm gắn bó với giảng đường Đại học, em cảm thấy thật may mắn đến với Đại học Tây Đô Tại nơi em tiếp thu kiến thức từ thầy cô giỏi, hỗ trợ học tập với sở vật chất đại, gặp người bạn trải qua chuỗi ngày sinh viên đẹp Hơm nay, sau hồn thành đề tài khóa luận này, em học hỏi kiến thức kinh nghiệm để làm việc chuyên nghiệp, hết, em kết thúc khóa luận với lịng tràn đầy biết ơn Trước hết, em xin chân thành cảm ơn Nhà trường, thầy cô khoa Dược – Điều dưỡng tạo điều kiện cho em khơng q trình nghiên cứu khóa luận mà cịn từ thuở em chập chững bước vào năm Trường Em xin dành lời cảm ơn đến quý thầy cô Trung Tâm Sâm Dược Liệu - TP HCM, Trung Tâm Khoa Học - Cơng Nghệ Dược Sài Gịn tận tình hỗ trợ để em có liệu, kết xác Đặc biệt em xin gửi đến ThS Trì Kim Ngọc quý thầy cô khoa Dược lời cảm ơn sâu sắc Quý thầy cô tận tình hướng dẫn, hỗ trợ tạo điều kiện thuận lợi, dõi theo em từ ngày đầu nghiên cứu đến thời điểm Trong ngày qua, em không học hỏi quý thầy, cô mặt kiến thức nghiên cứu mà kĩ sống trách nhiệm cơng việc Bên cạnh em xin bày tỏ biết ơn người bạn hỗ trợ em trình thực khóa luận, suốt khoảng thời gian gắn bó mái trường Em xin cảm ơn cha mẹ người thân phía sau làm động lực nâng đỡ em vượt qua khó khăn Do kiến thức cịn hạn chế kinh nghiệm non trẻ, cịn phải học hỏi nhiều nên khơng thể tránh khỏi sai sót đề tài Kính mong q thầy chia sẻ, góp ý để khóa luận kết thúc thành công tốt đẹp Trước dừng đây, em xin chúc q thầy cơ, bạn bè có nhiều sức khỏe ngày thành công đường nghiệp phía trước Em xin chân thành cảm ơn Cần Thơ, ngày tháng năm 2020 Nguyễn Khả Vy i LỜI CAM ĐOAN Tôi cam đoan công trình nghiên cứu tơi cán hướng dẫn Các số liệu, kết hình ảnh luận văn trung thực, xác chưa cơng bố hình thức trước Mọi thơng tin trích dẫn luận văn rõ nguồn gốc ghi rõ phần tài liệu tham khảo Nếu phát có gian lận nào, tơi xin hồn tồn chịu trách nhiệm nội dung khóa luận Cần Thơ, ngày tháng năm 2020 Tác giả khóa luận Nguyễn Khả Vy ii TÓM TẮT Mua Đậu biếc hai loại dược liệu quen thuộc với người dân vùng nông thôn, biết đến với dạng trà dược liệu dùng để uống ngày, nhiên có nguồn tài liệu đào sâu giá trị tác dụng dược lý chúng Đề tài thực nhằm chứng minh tiềm chúng Đối tượng nghiên cứu: Hoa Đậu biếc (Clitoria ternatea L., Fabaceae) hoa Mua ( Melastoma candidum D Don, Melastomataceae) Phương pháp nghiên cứu: Mơ tả hình thái, vi học để xác định lồi Phân tích sơ thành phần hóa thực vật theo phương pháp Ciuley có hiệu chỉnh Chiết xuất dược liệu phương pháp chiết nóng Định lượng polyphenol phương pháp FolinCiocalteu Định lượng flavonoid phương pháp Aluminum Chlorid colorimetric (AlCl3) Khảo sát hoạt tính ức chế α – glucosidase theo phương pháp mô tả Hua Qiang Dong et al., 2012 Khảo sát hoạt tính ức chế tế bào ung thư phương pháp SRB (Sulforhodamin B) Kết quả: Đặc điểm vi phẫu gồm mô phận thân, lá, rễ Đậu biếc Mua Soi bột dược liệu hoa Đậu biếc hoa Mua có cấu tử: mảnh mơ mềm cánh hoa, hạt phấn, sợi mơ cứng, mảnh biểu bì mang lơng che chở đơn bào, Thành phần hóa học hoa Đậu biếc hoa Mua gồm: Triterpenoid tự thủy phân, polyphenol, flavonoid hợp chất polyuronic Hàm lượng polyphenol: Cao chiết E – CT (17,84 ± 0,40 mgGA/g dược liệu khô), W – CT (30,70 ± 0,07 mgGA/g dược liệu khô), E – MC (36,71 ± 1,87 mgGA/g dược liệu khô), W – MC (45,05 ± 0,36 mgGA/g dược liệu khô) Hàm lượng flavonoid: Cao chiết E – CT (19,43 ± 5,09 mgQE/g dược liệu khô), W – CT (13,18 ± 3,01 mgQE/g dược liệu khô), E – MC (17,86 ± 4,09 mgQE/g dược liệu khô), W – MC (25,47 ± 3,17 mgQE/g dược liệu khô) Hoạt tính ức chế α – glucosidase: Cao chiết E – MC (IC50 = 0,100 ± 0,004 μg/mL), W – MC (IC50 = 0,099 ± 0,004 μg/mL) Hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú MCF-7: Cao chiết E – CT (5,48 ± 4,33%), W – CT (4,10 ± 3,59%), E – MC (64,32 ± 6,46%), W – MC (69,06 ± 5,09%) Hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan Hep G2: Cao chiết E – MC (20,52 ± 4,19%), W – MC (19,63 ± 5,07%) Kết luận: Hoa Đậu biếc hoa Mua có hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú MCF-7, hoa Mua trội khả ức chế α – glucosidase tế bào ung thư gan Hep G2 Đề tài chứng minh cao chiết nước hai loại hoa cho hàm lượng polyphenol toàn phần cao cao chiết cồn 96% Điều mở nguồn tư liệu hữa ích đầy hứa hẹn việc nghiên cứu bào chế thuốc có tác dụng bệnh đái tháo đường, phịng tránh ung thư nói riêng bệnh lý khác nói chung hai loại dược liệu lạ iii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH MỤC BẢNG vii DANH MỤC HÌNH viii DANH MỤC TỪ VIẾT TẮT ix MỞ ĐẦU xii CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN THỰC VẬT HỌC 1.1.1 Tổng quan Đậu biếc 1.1.2 Tổng quan Mua 1.2 TỔNG QUAN VỀ POLYPHENOL 1.2.1 Giới thiệu 1.2.2 Phân loại 10 1.2.3 Cơ chế hoạt động chống oxy hóa hợp chất polyphenol 13 1.2.4 Ứng dụng polyphenol 14 1.3 TỔNG QUAN VỀ FLAVONOID 14 1.3.1 Nguồn gốc 15 1.3.2 Cấu trúc 15 1.3.3 Phân loại 15 1.3.4 Tính chất lý hóa 16 1.3.5 Phân bố flavonoid tự nhiên 17 1.3.6 Vai trò flavonoid 17 1.4 TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ 19 1.4.1 1.4.2 1.4.3 1.4.4 Giới thiệu 19 Tình hình chung bệnh ung thư 20 Nguyên nhân gây ung thư 20 Các loại ung thư thường gặp 21 1.4.5 Các phương pháp khảo sát hoạt tính kháng ung thư 23 1.5 TỔNG QUAN VỀ ĐÁI THÁO ĐƯỜNG VÀ α – GLUCOSIDASE 24 1.5.1 Giới thiệu 24 1.5.2 Tình hình chung bệnh ĐTĐ 25 1.5.3 Phân loại nguyên nhân ĐTĐ 25 1.5.4 Triệu chứng ĐTĐ 26 iv 1.5.5 Các biến chứng ĐTĐ 26 1.5.6 Enzym α – glucosidase 26 1.5.7 Các phương pháp khảo sát hoạt tính có lợi cho bệnh ĐTĐ 29 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 30 2.1.1 Nguyên liệu 30 2.1.2 Dung mơi hóa chất 30 2.1.3 Dụng cụ, trang thiết bị 30 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 31 2.2.1 Nghiên cứu thực vật học 31 2.2.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 32 2.2.3 Chiết xuất cao cồn 96% cao nước 32 2.2.4 Định lượng polyphenol cao cồn 96% cao nước 32 2.2.5 Định lượng flavonoid cao cồn 96% cao nước 34 2.2.6 Khảo sát hoạt tính ức chế α – glucosidase 35 2.2.7 Khảo sát hoạt tính ức chế tế bào ung thư 36 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 38 3.1 KẾT QUẢ 38 3.1.1 Kết nghiên cứu thực vật học 38 3.1.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 50 3.1.3 Chiết xuất cao cồn 96% cao nước 51 3.1.4 Định lượng polyphenol cao cồn 96% cao nước 52 3.1.5 Định lượng flavonoid cao cồn 96% cao nước 54 3.1.6 Khảo sát hoạt tính ức chế enzym α - glucosidase 55 3.1.7 Khảo sát hoạt tính ức chế tế bào ung thư 59 3.2 BÀN LUẬN 60 3.2.1 Kết nghiên cứu thực vật học 60 3.2.2 Kết nghiên cứu thành phần hóa thực vật 61 3.2.3 Kết định lượng polyphenol flavonoid cao cồn 96% cao nước 62 3.2.4 Kết khảo sát hoạt tính ức chế α – glucosidase 65 3.2.5 Kết khảo sát hoạt tính kháng ung thư 67 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 72 4.1 KẾT LUẬN 72 4.1.1 Khảo sát thực vật học 72 4.1.2 Thành phần hóa thực vật hoa Đậu biếc hoa Mua 72 4.1.3 Chiết xuất hoa Đậu biếc hoa Mua 73 4.1.4 Định lượng polyphenol flavonoid cao dược liệu 73 v 4.1.5 Khảo sát hoạt tính sinh học 73 4.2 ĐỀ XUẤT 74 TÀI LIỆU THAM KHẢO 75 DANH MỤC PHỤ LỤC 94 vi DANH MỤC BẢNG Bảng 1 Thành phần hóa học phận Mua Bảng Tổng lượng phenolic chứa phận khác Mua Bảng Tổng lượng flavonoid chứa phận khác Mua Bảng Các chất ức chế enzym tự nhiên 28 Bảng Quy trình dựng đường chuẩn acid gallic 33 Bảng 2 Quy trình dựng đường chuẩn quercetin 35 Bảng Kết phân tích thành phần hóa thực vật hoa Đậu biếc hoa Mua 51 Bảng Kết chiết xuất cao cồn 96% cao nước hoa Đậu biếc hoa Mua 52 Bảng 3 Độ hấp thu chất chuẩn acid gallic nồng độ 52 Bảng Lượng polyphenol có mẫu cao hoa Đậu biếc hoa Mua dung môi cồn 96% nước (mgGA/g dược liệu khô) 53 Bảng Độ hấp thu chất chuẩn quercetin nồng độ 54 Bảng Hàm lượng flavonoid cao cồn 96% cao nước hoa Đậu biếc hoa Mua (mgQE/g dược liệu khô) 55 Bảng Kết hoạt tính ức chế α – glucosidase mẫu cao E – CT, W – CT, E – MC, W – MC chứng dương acarbose nồng độ ban đầu 2000 µg/mL 55 Bảng Khả ức chế α – glucosidase mẫu chứng dương acarbose nồng độ 56 Bảng Khả ức chế α – glucosidase cao chiết E – MC nồng độ 57 Bảng 10 Khả ức chế α – glucosidase cao chiết W – MC nồng độ 58 Bảng 11 Khả ức chế 50% hoạt tính α – glucosidase cao cồn, cao nước hoa Mua chứng dương acarbose 58 Bảng 12 Khả ức chế tế bào ung thư vú MCF-7 hoa Đậu biếc hoa Mua (%) 59 Bảng 13 Khả ức chế tế bào ung thư gan Hep G2 hoa Đậu biếc hoa Mua (%) 60 Bảng 14 Tổng kết hàm lượng polyphenol flavonoid cao cồn 96% cao nước hoa Đậu biếc hoa Mua 62 Bảng 15 Lượng polyphenol flavonoid cao cồn cao nước hoa Đậu biếc 62 Bảng 16 Hàm lượng polyphenol flavonoid Mua cao chiết cồn cao chiết 63 Bảng 17 Khả ức chế tế bào ung thư vú ung thư gan cao Đậu biếc nước cao cồn 96% Đậu biếc (%) 67 Bảng 18 Giá trị IC50 dòng tế bào ung thư cao chiết hoa Đậu biếc mốc thời gian ngâm khác (µg/mL) 68 Bảng 19 Khả ức chế tế bào ung thư vú MCF-7 ung thư gan Hep G2 cao nước cao cồn 96% hoa Mua (%) 69 vii DANH MỤC HÌNH Hình 1 Cây Đậu biếc (caythuoc.org) Hình Cây Mua (caythuoc.org) Hình Khung sườn flavonoid .10 Hình Cấu trúc xanhthon .11 Hình Cấu trúc stillben 11 Hình Các nhóm flavonoid 16 Hình Sơ đồ nghiên cứu chung .31 Hình Tồn cây, cành mang hoa, hoa Đậu Biếc 38 Hình Lá, rễ Đậu biếc .38 Hình 3 Hình vi phẫu chi tiết Đậu biếc .40 Hình Hình vi phẫu thân Đậu Biếc .41 Hình Hình vi phẫu chi tiết rễ Đậu biếc .42 Hình Bột hoa Đậu biếc .43 Hình Các cấu tử tìm thấy bột hoa Đậu biếc 44 Hình Cành mang hoa, hoa Mua 44 Hình Một phần rễ, nhụy hoa Mua 45 Hình 10 Hình vi phẫu chi tiết Mua 47 Hình 11 Hình vi phẫu chi tiết thân Mua 48 Hình 12 Hình vi phẫu chi tiết rễ Mua 49 Hình 13 Bột hoa Mua 50 Hình 14 Các cấu tử tìm thấy bột hoa Mua 50 Hình 15 Đồ thị đường thẳng tuyến tính tương quan hàm lượng acid gallic độ hấp thu dung dịch 53 Hình 16 Đồ thị đường thẳng tuyến tính tương quan hàm lượng quercetin độ hấp thu dung dịch 54 Hình 17 Đồ thị đường thẳng tuyến tính tương quan nồng độ phản ứng phần trăm hoạt tính ức chế enzym mẫu chứng dương acarbose .56 Hình 18 Đồ thị đường thẳng tuyến tính tương quan nồng độ phản ứng phần trăm hoạt tính ức chế enzym cao E – MC .57 Hình 19 Đồ thị đường thẳng tuyến tính tương quan nồng độ phản ứng phần trăm hoạt tính ức chế enzym cao W – MC 58 viii PHỤ LỤC KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG POLYPHENOL TOÀN PHẦN Độ hấp thu chất chuẩn acid gallic nồng độ Các nồng độ 20 40 60 80 100 120 Lần Lần Lần 0,133 0,137 0,14 0,524 0,536 0,543 0,825 0,826 0,888 1,084 1,063 1,096 1,442 1,408 1,465 1,718 1,69 1,735 Trung bình 0,137 0,534 0,846 1,081 1,438 1,714 Trung bình 0,335 0,855 1,244 1,463 Bì Độ hấp thu mẫu cao chiết lần đo Mẫu Lần Lần Lần E – CT W – CT E – MC W – MC 0,333 0,856 1,192 1,445 0,348 0,852 1,198 1,470 0,323 0,857 1,343 1,473 0,005 0,005 0,001 0,016 Trung bình trừ bì 0,330 0,850 1,243 1,445 Hàm lượng polyphenol mẫu thử cao chiết cồn nước hoa Đậu biếc, hoa Mua lần đo (mgGA/g dược liệu khô) E – CT E – MC W – CT W – MC Lần Lần Lần 17,78 18,36 17,38 35,31 35,47 39,36 30,73 30,61 30,76 44,54 45,26 45,35 TB 17,84 36,71 30,70 45,05 Độ lệch chuẩn 0,40 1,87 0,07 0,36 Tên cao chiết Lượng polyphenol có mẫu cao hoa Đậu biếc hoa Mua dung môi cồn 96% nước (mgGA/g dược liệu khô) Tên cao chiết W – MC E – MC W – CT E – CT Hàm lượng polyphenol toàn phần 45,05 ± 0,36(a) 36,71 ± 1,87(b) 30,70 ± 0,07(c) 17,84 ± 0,40(d) Kết hàm lượng polyphenol thể kèm theo độ lệch chuẩn (với n = mẫu cao hoa thử) thực thử nghiệm Turkey (mức ý nghĩa p < 0,05) Đối với kết chứa chữ thường khác mang khác biệt có ý nghĩa thống kê với mức ý nghĩa p < 0,05 PL-4 PHỤ LỤC KHẢO SÁT HÀM LƯỢNG FLAVONOID TOÀN PHẦN Độ hấp thu chất chuẩn quercetin nồng độ Nồng độ quercetin 10 20 40 60 80 100 Lần Lần Lần 0,004 0,005 0,002 0,006 0,008 0,006 0,018 0,016 0,016 0,022 0,025 0,028 0,032 0,032 0,03 0,04 0,038 0,039 Trung bình 0,004 0,007 0,017 0,025 0,031 0,039 Độ hấp thu mẫu cao chiết lần đo Mẫu Lần Lần Lần E – CT W – CT E – MC W – MC 0,07 0,019 0,104 0,119 0,057 0,022 0,085 0,125 0,055 0,025 0,093 0,125 Trung bình 0,061 0,022 0,094 0,123 Bì 0,035 0,011 0,06 0,1 Trung bình trừ bì 0,025 0,011 0,034 0,023 Hàm lượng flavonoid mẫu thử cao chiết cồn nước hoa Đậu biếc, hoa Mua lần đo (mgQE/g dược liệu khô) E – CT E – MC W – CT W – MC Lần Lần Lần 26,58 16,62 15,09 23,10 13,14 17,33 9,49 13,18 16,87 20,98 27,71 27,71 TB 19,43 17,86 13,18 25,47 Độ lệch chuẩn 5,09 4,09 3,01 3,17 Tên cao chiết Hàm lượng flavonoid cao cồn 96% cao nước hoa Đậu biếc hoa Mua (mgQE/g dược liệu khô) Tên cao chiết E – MC W – MC E – CT W – CT Hàm lượng flavonoid toàn phần 17,86 ± 4,09(a) 25,47 ± 3,17(a) 19,43 ± 5,09(a) 13,18 ± 3,01(a) Kết hàm lượng flavonoid thể kèm theo độ lệch chuẩn (với n = mẫu cao hoa thử) thực thử nghiệm Turkey (mức ý nghĩa p < 0,05) Đối với kết chứa chữ thường khác mang khác biệt có ý nghĩa thống kê với mức ý nghĩa p < 0,05 PL-5 PHỤ LỤC KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ α – GLUCOSIDASE Khả ức chế α – glucosidase mẫu chứng dương acarbose nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/mL) Nồng độ phản ứng (µg/mL) Giá trị OD trung bình Hoạt tính ức chế (%) 50 100 250 500 1000 18,75 37,5 93,75 187,5 375 1,637 1,396 1,158 0,881 0,704 21,62 33,18 44,56 57,8 66,31 Khả ức chế α – glucosidase cao chiết cồn 96% hoa Đậu biếc Nồng độ ban đầu (µg/mL) Nồng độ phản ứng (µg/mL) Hoạt tính ức chế (%) 2000 750 22,95 Khả ức chế α – glucosidase cao chiết nước hoa Đậu biếc Nồng độ ban đầu (µg/mL) Nồng độ phản ứng (µg/mL) Hoạt tính ức chế (%) 2000 750 6,86 Khả ức chế α – glucosidase cao chiết cồn hoa Mua nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/mL) Nồng độ phản ứng (µg/mL) Giá trị OD trung bình Hoạt tính ức chế (%) 0,1 0,2 0,4 10 0,0375 0,075 0,15 0,375 1,875 3,75 1,87 1,57 1,47 1,08 0,45 0,15 37,85 48,80 52,25 65,91 87,99 99,30 PL-6 Khả ức chế α – glucosidase cao chiết nước hoa Mua nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/mL) Nồng độ phản ứng (µg/mL) Giá trị OD trung bình Hoạt tính ức chế (%) 0,1 0,0375 2,21 25,82 0,2 0,4 0,6 0,8 0,075 0,15 0,225 0,3 0,375 1,82 1,24 0,87 0,71 0,47 39,83 60,30 73,72 79,25 87,73 Khả ức chế 50% hoạt tính α – glucosidase cao cồn, cao nước hoa Mua chứng dương acarbose Tên mẫu Giá trị IC50 (μg/mL) W – MC E – MC Acarbose 0,099 ± 0,004(b) 0,100 ± 0,004(b) 122,210 ± 1,651(a) Kết khả ức chế 50% hoạt tính α – glucosidase thể kèm theo độ lệch chuẩn (với n = mẫu cao) thực thử nghiệm Turkey (p < 0,05) Đối với kết chứa chữ thường khác mang khác biệt có ý nghĩa thống kê với mức ý nghĩa p < 0,05 PL-7 PHỤ LỤC KHẢO SÁT HOẠT TÍNH KHÁNG TẾ BÀO UNG THƯ VÚ MCF-7 VÀ UNG THƯ GAN HEP G2 Khảo sát hoạt tính kháng tế bào ung thư vú MCF-7 Mẫu cao chiết E – CT W – CT E – MC W – MC Camptothecin Nồng độ (µg/mL) Phần trăm gây độc tế bào MCF-7 (%) Lần Lần Lần Trung bình 200 200 200 200 0,01 4,79 7,69 67,20 74,46 49,49 1,54 0,51 56,92 64,36 61,03 10,11 4,09 68,83 68,35 56,44 5,48 4,10 64,32 69,06 55,65 Độ lệch chuẩn 4,33 3,59 6,46 5,09 5,81 Tế bào Ung thư vú MCF-7 môi trường Tế bào Ung thư vú MCF-7 mơi trường có dung mơi tan DMSO PL-8 Tế bào Ung thư vú MCF-7 tác động E-CT Tế bào Ung thư vú MCF-7 tác động W-CT Tế bào Ung thư vú MCF-7 tác động E-MC PL-9 Tế bào Ung thư vú MCF-7 tác động W-MC Tế bào Ung thư vú MCF-7 tác động đối chứng dương Camptothecin Khảo sát hoạt tính kháng tế bào ung thư gan Hep G2 Nồng độ (µg/mL) Lần Lần Lần Trung bình E – CT W – CT E – MC W – MC 200 200 200 200 -4,95 -0,31 21,05 24,46 -6,35 -8,70 24,41 20,07 -6,52 -11,30 16,09 14,35 -5,94 -6,77 20,52 19,62 0,86 5,74 4,19 5,07 Camptothecin 0,07 48,90 55,93 49,59 51,47 3,88 Mẫu cao chiết Phần trăm gây độc tế bào Hep G2 (%) PL-10 Độ lệch chuẩn Tế bào Ung thư vú MCF-7 môi trường chất tan DMSO 0,25% Tế bào Ung thư vú MCF-7 môi trường chất tan DMSO 0,5% Tế bào Ung thư gan Hep G2 tác động E – CT PL-11 Tế bào Ung thư gan Hep G2 tác động W – CT Tế bào Ung thư gan Hep G2 tác động E – MC Tế bào Ung thư gan Hep G2 tác động W – MC PL-12 Tế bào Ung thư gan Hep G2 tác động đối chứng dương Camptothecin PL-13 PHỤ LỤC KẾT QUẢ PHÂN TÍCH SAI SỐ GIỮA CÁC SỐ LIỆU BẢNG PHẦN MỀM SPSS Kết phân tích sai số số liệu hàm lượng polyphenol flavonoid Mẫu So sánh mẫu Hàm lượng Polyphenol toàn phần Ý nghĩa khác biệt Khoảng tin cậy 95% Giới hạn Giới hạn E – CT W – CT W - CT E - MC W - MC -12,85924* -18,87327* -27,20924* E - CT 12,85924* E - MC -6,01403* * Hàm lượng flavonoid toàn phần Ý nghĩa khác biệt Khoảng tin cậy 95% Giới hạn Giới hạn -15,9838 -9,7347* -21,9978 -15,7488* -30,3338 -24,0847* 6,25581 1,57629 -6,03402 -6,3283 -11,0078 -18,6182 18,8399 14,1604 6,5501 9,7347 15,9838* -6,25581 -18,8399 6,3283 -9,1385 -2,8895* -4,67952 -17,2637 7,9046 -12,28983 -24,8740 ,2943 W - MC -14,35000 E – MC E - CT W - CT W - MC 18,87327* 6,01403* -8,33597* 15,7488 2,8895 -11,4605 21,9978* 9,1385* -5,2115* -1,57629 4,67952 -7,61030 -14,1604 -7,9046 -20,1944 11,0078 17,2637 4,9738 W– MC E - CT W - CT E - MC 27,20924* 14,35000* 8,33597* 24,0847 11,2255 5,2115 30,3338* 17,4745* 11,4605* 6,03402 12,28983 7,61030 -6,5501 -,2943 -4,9738 18,6182 24,8740 20,1944 ⁎ -17,4745 -11,2255 * : Khác biệt có ý nghĩa thống kê mức ý nghĩa 0,05 Kết phân tích sai số số liệu giá trị IC50 hoạt tính ức chế emzym So sánh mẫu Ý nghĩa khác biệt Giới hạn Giới hạn E - MC W - MC Acarbose ,00067 ,00167 -,0109 -,0099 ,0122 ,0132 W - MC E - MC Acarbose -,00067 ,00100 -,0122 -,0105 ,0109 ,0125 Acarbos e E - MC W - MC -,00167 -,00100 -,0132 -,0125 ,0099 ,0105 Mẫu ⁎ Khoảng tin cậy 95% : Khác biệt có ý nghĩa thống kê mức ý nghĩa 0,05 PL-14 Kết phân tích sai số số liệu khả ức chế tế bào ung thư vú MCF-7 Mẫu So sánh mẫu W - CT E - CT W - CT E - MC W - MC Camptotheci n ⁎ Ý nghĩa khác biệt Giới hạn Giới hạn 1,38333 -12,4725 15,2392 Khoảng tin cậy 95% -58,83667 * -72,6925 -44,9808 -63,57667 * -77,4325 -49,7208 Camptothecin -50,17333 * -64,0292 -36,3175 E - CT E - MC W - MC Camptothecin -1,38333 -60,22000* -64,96000* -51,55667* -15,2392 -74,0758 -78,8158 -65,4125 12,4725 -46,3642 -51,1042 -37,7008 E - CT W - CT 58,83667* 60,22000* 44,9808 46,3642 72,6925 74,0758 W - MC Camptothecin -4,74000 8,66333 -18,5958 -5,1925 9,1158 22,5192 E - CT W - CT 63,57667* 64,96000* 49,7208 51,1042 77,4325 78,8158 E - MC Camptothecin 4,74000 13,40333 -9,1158 -,4525 18,5958 27,2592 E - CT 50,17333* 36,3175 64,0292 W - CT 51,55667* 37,7008 65,4125 E - MC -8,66333 -22,5192 5,1925 W - MC -13,40333 -27,2592 0,4525 E - MC W - MC : Khác biệt có ý nghĩa thống kê mức ý nghĩa 0,05 PL-15 Kết phân tích sai số số liệu khả ức chế tế bào ung thư gan Hep G2 Mẫu So sánh Ý nghĩa khác mẫu biệt W - CT Giới hạn -11,1573 12,4039 -26,45667 -38,2373 -14,6761 -25,56667 * -37,3473 -13,7861 Camptothecin -57,41333 * -69,1939 -45,6327 W - CT E - CT E - MC W - MC Camptothecin -,62333 -27,08000* -26,19000* -58,03667* -12,4039 -38,8606 -37,9706 -69,8173 11,1573 -15,2994 -14,4094 -46,2561 E - MC E - CT W - CT W - MC Camptothecin 26,45667* 27,08000* ,89000 -30,95667* 14,6761 15,2994 -10,8906 -42,7373 38,2373 38,8606 12,6706 -19,1761 W - MC E - CT W - CT E - MC Camptothecin 25,56667* 26,19000* -,89000 -31,84667* 13,7861 14,4094 -12,6706 -43,6273 37,3473 37,9706 10,8906 -20,0661 E - CT 57,41333* 45,6327 69,1939 W - CT 58,03667* 46,2561 69,8173 E - MC 30,95667* 19,1761 42,7373 W - MC 31,84667* 20,0661 43,6273 Camptotheci n ⁎ Giới hạn * E - CT E - MC W - MC ,62333 Khoảng tin cậy 95% : Khác biệt có ý nghĩa thống kê mức ý nghĩa 0,05 PL-16 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐƠ Cộng hịa xã hội chủ nghĩa Việt Nam KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG Độc lập – Tự – Hạnh phúc XÁC NHẬN CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên: NGUYỄN KHẢ VY Sinh viên lớp: Đại học Dược 10C MSSV: 14D720401300 Chuyên ngành: Dược học Niên khóa: 2015 – 2020 Đã thực đề tài khóa luận tốt nghiệp “Định lượng polyphenol, flavonoid khảo sát hoạt tính ức chế enzym α- glucosidase, ức chế tế bào ung thư hoa Mua (Melastoma candidum D Don) hoa Đậu biếc (Clitoria ternatea L.)” hướng dẫn giảng viên ThS Trì Kim Ngọc Cần Thơ, ngày tháng 06 năm 2020 Xác nhận giảng viên hướng dẫn ThS TRÌ KIM NGỌC PL-17 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐƠ CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA DƯỢC - ĐIỀU DƯỠNG Độc lập - Tự - Hạnh Phúc GIẤY XÁC NHẬN ĐÃ BỔ SUNG, SỬA CHỮA KHÓA LUẬN THEO Ý KIẾN ĐÓNG GÓP CỦA HỘI ĐỒNG CHẤM KHÓA LUẬN Họ tên sinh viên: NGUYỄN KHẢ VY Lớp: Đại học Dược 10C Chuyên ngành: Dược học Niên khóa: 2015 – 2020 MSSV: 14D720401239 Tên đề tài khóa luận: “Định lượng polyphenol, flavonoid khảo sát hoạt tính ức chế enzym α- glucosidase, ức chế tế bào ung thư hoa Mua (Melastoma candidum D Don) hoa Đậu biếc (Clitoria ternatea L.)” Giảng viên hướng dẫn: Th.S TRÌ KIM NGỌC Khóa luận bổ sung sửa chữa điểm sau: Thay đổi tên đề tài Chỉnh sửa mục tiêu đề tài Chỉnh sửa quy trình chung sản xuất trà túi lọc Chỉnh sửa nghiên cứu nước Giảng viên hướng dẫn TP Cần Thơ, ngày tháng năm 2020 Họ tên sinh viên ThS TRÌ KIM NGỌC Thư ký hội đồng NGUYỄN KHẢ VY Chủ tịch Hội đồng ThS NGUYỄN PHÚ LỘC ThS ĐỖ VĂN MÃI PL-18 ... khóa luận: “Định lượng polyphenol, flavonoid khảo sát hoạt tính ức chế enzym α – glucosidase, ức chế tế bào ung thư hoa Mua (Melastoma candidum D Don) hoa Đậu biếc (Clitoria ternatea L.)? ?? thực... chiết hoa Đậu biếc hoa Mua Khảo sát hoạt tính sinh học hoa Đậu biếc hoa Mua gồm: hoạt tính ức chế α – glucosidase; hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú MCF-7 tế bào ung thư gan Hep G2 xii CHƯƠNG I... Bảng 12 Khả ức chế tế bào ung thư vú MCF-7 hoa Đậu biếc hoa Mua (%) 59 Bảng 13 Khả ức chế tế bào ung thư gan Hep G2 hoa Đậu biếc hoa Mua (%) 60 Bảng 14 Tổng kết hàm lượng polyphenol flavonoid