Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa của cây Hồ Đằng rễ mành (Cissus verticillata, Họ Nho Vitaceae)

TRƢỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƢỢC – ĐIỀU DƢỠNG KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƢỢC MÃ SỐ: 52720401 THỬ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA CỦA CAO HỒ ĐẰNG RỄ MÀNH (Cissus verticillata, Họ Nho Vitaceae) GVHD: PGS.TS TRẦN CƠNG LUẬN DS TRÌ KIM NGỌC SVTT: NGUYỄN LÝ THẢO MSSV: 12D720401163 LỚP: ĐH DƢỢC 7B Cần Thơ, năm 2017 TRƢỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƢỢC – ĐIỀU DƢỠNG KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƢỢC MÃ SỐ: 52720401 THỬ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA CỦA CAO HỒ DẰNG RỄ MÀNH (Cissus verticillata, họ Nho Vitaceae) GVHD: PGS.TS TRẦN CƠNG LUẬN DS TRÌ KIM NGỌC SVTT: NGUYỄN LÝ THẢO MSSV: 12D720401163 LỚP: ĐH DƢỢC 7B Cần Thơ, năm 2017 i LỜI CẢM ƠN Trên thực tế khơng có thành cơng mà khơng gắn liền với hỗ trợ, giúp đỡ dù hay nhiều Trong thời gian năm gắn bó với giảng đƣờng đại học, em nhận đƣợc nhiều giúp đỡ từ thầy cơ, gia đình bạn bè Với biết ơn sâu sắc em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến tất thầy cô khoa Dƣợc – Điều dƣỡng với tri thức, tâm huyết để truyền đạt tất vốn kiến thức quý báu cho chúng em suốt thời gian học tập trƣờng Thầy cô dạy cho chúng em tri thức mà dạy cho chúng em cách làm ngƣời để chúng em có đủ hành trang bƣớc vào đời Đó điều vơ q báu mà khơng có thứ so sánh đƣợc Em xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy Trần Cơng Luận Trì Kim Ngọc, ngƣời tận tình hƣớng dẫn để em hồn thành luận văn tốt nghiệp Do kiến thức hạn chế nên khơng thể tránh khỏi sai sót trình làm luận văn báo cáo, em mong nhận đƣợc ý kiến đóng góp quý báu q thầy để em học hỏi đƣợc nhiều hồn thiện báo cáo khóa luận tốt Sau cùng, em xin kính chúc thầy khoa Dƣợc – Điều dƣỡng nhƣ toàn thầy cô giáo trƣờng Đại học Tây Đô thật nhiều sức khỏe niềm tin để tiếp tực thực hiện sứ mệnh cao đẹp truyền đạt kiến thức cho hệ mai sau Trân trọng ii LỜI CAM ĐOAN Em cam đoan cơng trình nghiên cứu em Các số liệu, kết quả, hình ảnh nêu luận văn trung thực xác Sinh viên thực Nguyễn Lý Thảo iii TÓM TẮT Đặt vấn đề HĐRM loại Việt Nam, đƣợc di thực từ châu Mỹ Mọi ngƣời biết dùng để làm cảnh mà biết đƣợc, đem lại nhiều công dụng trị bệnh nhƣ: tăng huyết áp, đái tháo đƣờng,…Đề tài góp phần tìm hiểu thêm giá trị mà thuốc đem lại với nội dung: mô tả định danh, khảo sát vi học, định tính sơ thành phần hóa học khảo sát tác dụng sinh học chống oxy hóa Đối tƣợng phƣơng pháp nghiên cứu Dƣợc liệu HĐRM thu hái vào tháng 10/2016 tỉnh Bạc Liêu Sau phơi khô, sử dụng bột dƣợc liệu để mô tả định danh, khảo sát vi học, định tính sơ thành phần hóa học Từ kg dƣợc liệu HĐRM, sử dụng 1,6 lít cồn 96 % để làm ẩm dƣợc liệu 33 lít cồn 96O chiết ngấm kiệt với tốc độ xả 10 – 15 giọt/ phút Sau đó, đem tồn dịch chiết thu đƣợc lắc phân bố lần lƣợt với dung môi hữu cơ: PE, EtOAc để đƣợc cao phân đoạn Thử hoạt tính chống oxy hóa cao phân đoạn SKLM quang phổ UV – Vis Kết kết luận Định danh xác tên khoa học mẫu thực vật thu hái đƣợc dùng nghiên cứu Cissus verticilla (L.) Nicolson & C.E.Jarvis, họ Nho (Vitaceae) Qua khảo sát sơ thành phần hóa học, xác định có flavonoid số thành phần hóa học khác: carotenoid, tinh dầu, tannin, saponin, chất khử hợp chất polyuronid Chiết đƣợc 330 g cao tổng Tiến hành lắc phân bố lần lƣợt thu đƣợc cao với khối lƣơng nhƣ sau: 47,15 g cao PE; 19,43 g cao EtOAc; 27,53 g cao cồn lại Kết thử nghiệm tác dụng chống oxy hóa sắc ký lớp mỏng cho thấy cao có tác dụng chống oxy hóa sơ kết luận cao EtOAc cho kết rõ Tiến hành thăm dị khả chống oxy hóa cao phƣơng pháp đo điểm máy quang phổ UV – Vis giúp khẳng định cao EtOAc chống oxy hóa mạnh (64,98 %) cao iv MỤC LỤC DANH SÁCH BẢNG vii DANH SÁCH HÌNH viii DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT ix CHƢƠNG ĐẶT VẤN ĐỀ CHƢƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 2.1 Thực vật học 2.1.1 Vị trí phân loại 2.1.2 Đặc điểm họ Nho (Vitaceae) 2.1.3 Sơ lƣợc chi Cissus 2.1.4 Cissus verticillata (L.) Nicolson & C.E.Jarvis 2.1.4.1 Mơ tả hình thái 2.1.4.2 Phân bố, sinh thái 2.1.4.3 Cách trồng 2.1.4.4 Thu hái, chế biến 2.2 Thành phần hóa học 2.3 Một số tác dụng dƣợc lý HĐRM 2.3.1 Tác dụng hạ đƣờng huyết 2.3.2 Tác dụng chống dị ứng chống viêm 2.4 Nghiên cứu tác dụng chống oxy hóa thuốc 2.4.1 Khái niệm gốc tự 2.4.2 Chất chống oxy hóa 2.4.3 Sự hình thành gốc tự oxy thể 2.4.3.1 Sự hình thành gốc tự trao đổi bình thƣờng 2.4.3.2 Sự hình thành gốc tự ngẫu nhiên 2.4.4 Ảnh hƣởng yếu tố ngoại sinh đến hình thành gốc tự 2.4.4.1 Ảnh hƣởng xenobiotic 2.4.4.2 Ảnh hƣởng tác nhân viêm hoại tử gan 2.4.4.3 Ảnh hƣởng tác nhân tiêu máu bầm huyết 2.4.4.4 Ảnh hƣởng điều kiện sống v 2.4.5 Sự phòng vệ thể chống lại gốc tự 10 2.4.5.1 Hệ thống phòng vệ gốc tự thể 10 2.4.5.2 Hệ thống enzym chống oxy hóa gan 11 2.4.6 Các phƣơng pháp thử hoạt tính chống oxy hóa 12 2.4.6.1 Phƣơng pháp ức chế gốc tự DPPH 12 2.4.6.2 Phƣơng pháp ức chế gốc tự NO 13 2.4.6.3 Phƣơng pháp xác định hàm lƣợng MDA 14 2.4.6.4 Phƣơng pháp đánh giá khả kết hợp với ion sắt II 15 2.4.6.5 Phƣơng pháp ức chế enzym Xanthine oxidase (XO) 15 CHƢƠNG PHƢƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 16 3.1 Đối tƣợng nghiên cứu 16 3.1.1 Nguyên liệu 16 3.1.2 Dung mơi, hóa chất 16 3.1.3 Trang thiết bị nghiên cứu 16 3.2 Phƣơng pháp nghiên cứu 16 3.2.1 Mô tả định danh 16 2.2.1.1 Hình thái 16 2.2.1.2 Vi học 16 3.2.2 Khảo sát sơ thành phần hóa học 18 3.2.3 Chiết xuất dƣợc liệu 19 3.2.4 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa phân đoạn 20 3.2.4.1 Chuẩn bị thuốc thử mẫu thử 20 3.2.4.2 Thử hoạt tính chống oxy hóa cao SKLM 20 3.2.4.3 Xác định khả chống oxy hóa cao quang phổ UV – Vis 20 CHƢƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 22 4.1 Mô tả định danh 22 4.1.1 Hình thái 22 4.1.2 Vi học 23 4.1.2.1 Vi phẫu 23 4.1.2.2 Soi bột 33 vi 4.2 Khảo sát sơ thành phần hóa học 36 4.3 Chiết xuất dƣợc liệu 38 4.4 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa phân đoạn 38 4.4.1 Thử hoạt tính chống oxy hóa cao SKLM 38 4.4.2 Xác định khả chống oxy hóa cao quang phổ UV – Vis 39 4.5 Bàn luận 42 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 43 5.1 Kết luận 43 5.1.1 Thực vật học 43 5.1.2 Hóa học 43 5.1.3 Thử nghiệm tác dụng dƣợc lý 43 5.2 Kiến nghị 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO 44 vii DANH SÁCH BẢNG Bảng 2.1 Các ROS RNS thể sinh học Bảng 3.1 Phản ứng thử nghiệm DPPH 21 Bảng 4.1 Kết khảo sát sơ thành phần hóa học 37 Bảng 4.2 Kết xác định độ ẩm 38 Bảng 4.3 Kết thăm dị khả chống oxy hóa cao nồng độ mg/ml 39 Bảng 4.4 Kết đo độ hấp thu cao EtOAc nồng độ 39 Bảng 4.5 Kết đo độ hấp thu chất đối chứng vitamin C nồng độ 40 Bảng 4.6 Kết xác định giá trị IC50 mẫu 41 viii DANH SÁCH HÌNH Hình 2.1 Sơ đồ vị trí phân loại thực vật HĐRM Hình 3.1 Sơ đồ chuẩn bị dịch chiết 18 Hình 3.2 Sơ đồ quy trình chiết xuất dƣợc liệu HĐRM 19 Hình 4.1 Các phận HĐRM 22 Hình 4.2 Vi phẫu phiến HĐRM sơ đồ kèm theo 23 Hình 4.3 Chi tiết phận phiến 24 Hình 4.4 Vi phẫu cuống HĐRM sơ đồ kèm theo 25 Hình 4.5 Chi tiết phận cuống 26 Hình 4.6 Vi phẫu thân già HĐRM sơ đồ kèm theo 27 Hình 4.7 Chi tiết phận thân già 28 Hình 4.8 Vi phẫu thân non HĐRM sơ đồ kèm theo 29 Hình 4.9 Chi tiết phận thân non 29 Hình 4.10 Vi phẫu rễ già bất định HĐRM sơ đồ kèm theo 30 Hình 4.11 Chi tiết phận rễ già bất định HĐRM 31 Hình 4.12 Vi phẫu rễ non bất định HĐRM sơ đồ kèm theo 32 Hình 4.13 Chi tiết phận rễ non 32 Hình 4.14 Bột 33 Hình 4.15 Các cấu tử bột HĐRM 33 Hình 4.16 Bột thân 34 Hình 4.17 Các cấu tử bột thân HĐRM 34 Hình 4.18 Bột rễ 35 Hình 4.19 Các cấu tử bột rễ HĐRM 35 Hình 4.20 SKLM thăm dị hoạt tính chống oxy hóa 38 Hình 4.21 Biểu đồ đƣờng chuẩn cao EtOAc 40 Hình 4.22 Biểu đồ đƣờng chuẩn vitamin C 40 Hình 4.12 Vi phẫu rễ non bất định HĐRM sơ đồ kèm theo Rễ non: lớp bần gồm – lớp tế bào, vách mỏng Mô mềm khuyết vỏ tủy có nhiều lớp, kích thƣớc to nhỏ khác Bó libe – gỗ gồm bó libe khơng phát triển xen kẽ bó gỗ, đặc biệt gỗ phát triển Khơng có tinh thể calci oxalat Bần Bó libe Mơ mềm tủy Bó gỗ Mơ mềm vỏ 32 phận rễ non Hình 4.13 Chi tiết 4.1.2.2 Soi bột Bột có màu xanh đậm, mịn, có mùi thơm nhẹ Soi kính hiển vi: - Tinh thể calci oxalat nhiều bao gồm dạng: hình cầu gai, hình kim hình hạt xuất rời rạc tụ thành bó, đám - Lỗ khí - Mạch có nhiều dạng: mạch vạch, mạch xoắn - Lông che chở đa bào bị gãy Hình 4.14 Bột Tinh thể calci oxalat hình cầu gai Mạch xoắn Đám tinh thể calci oxalat hình hạt Lơng đa bào Lỗ khí 33 Mạch vạch Tinh thể calci oxalat hình kim hình cầu gai Sợi Hình 4.15 Các cấu tử bột HĐRM Bột thân có màu nâu, mịn có dạng sợi, mùi thơm nhẹ Soi kính hiển vi: - Hạt tinh bột nhiều nằm rải rác khắp nơi - Tinh thể calci oxalat nhiều bao gồm dạng: hình cầu gai, hình kim xuất rời rạc tụ thành bó - Mạch xoắn, mạch vạch - Xuất khối màu có màu cam - Bần Tinh thể calci oxalat hình kim Hình 4.16 Bột thân Tinh thể calci oxalat hình cầu gai tinh bột Mạch vạch, khối màu tinh bột Mạch xoắn Bần Hình 4.17 Các cấu tử bột thân HĐRM 34 Bột rễ bất định có màu nâu nhạt, mịn có sợi, mùi thơm nhẹ Soi kính hiển vi: - Trong sợi có tinh thể calci oxalat hình cầu gai - Tinh thể calci oxalat nhiều bao gồm dạng: hình cầu gai, hình kim xuất rời rạc tụ thành bó - Bần dày Hình 4.18 Bột rễ Bần Sợi Tinh thể calci oxalat hình kim Tinh thể calci oxalat hình cầu gai 35 Hình 4.19 Các cấu tử bột rễ HĐRM 4.2 Khảo sát sơ thành phần hóa học Nhận xét: Qua khảo sát sơ thành phần hóa học theo phƣơng pháp Ciulei, ta nhận thấy HĐRM có hợp chất: carotenoid, tinh dầu, flavonoid, tannin, saponin, chất khử hợp chất polyuronid Trong đó, hợp chất flavonid nhiều thành phần quan trọng có 36 Bảng 4.1 Kết khảo sát sơ thành phần hóa học Nhóm hợp chất Thuốc thử cách thực Chất béo Carotenoid Nhỏ dung dịch lên giấy Carr – price H2SO4 Tinh dầu Triterpennoid tự Alkaloid Coumarin Anthraquinon Flavonoid Glycoside tim Bốc đến cắn Liebermann - burchard TT chung alkaloid Phát quang kiềm NaOH 10% Mg/HCl đậm đặc TT vòng lacton Phản ứng hóa học Vết mờ Xanh chuyển sang đỏ Xanh dƣơng hay xanh lục ngả sang xanh dƣơng Có mùi thơm Đỏ nâu – tím, lớp có màu xanh lục Kết tủa Phát quang mạnh Dd kiềm có màu hồng đến đỏ Dd có màu hồng đến đỏ Tím Kết định tính dịch chiết Dịch Dịch chiết cồn Dịch chiết nƣớc chiết Không Thủy Không Thủy ether thủy phân phân thủy phân phân + + - Đỏ mận Tannin Xanh rêu hay xanh đen (polyphenol) Tủa bơng trắng (tannin) Triterpenoid Đỏ nâu – tím, lớp có màu xanh thủy phân lục Saponin TT Liebermann Có vịng tím nâu Lắc mạnh dung dịch nƣớc Bọt bền 15 phút Acid hữu Na2CO3 Sủi bọt Chất khử TT Fehling Tủa đỏ gạch Hơp chất Pha lỗng với cồn 90% Tủa bơng trắng – vàng nâu polyuronid Ghi chú: ( ): không thực phản ứng (-): âm tính (+): dƣơng tính (++): dƣơng tính mạnh + + - - - ++ - TT Baljet Dd FeCl3 Dd gelatin muối Liebermann – burchard 37 Kết luận chung - + - + + + + + + + + + + - (+++): dƣơng tính mạnh 4.3 Chiết xuất dƣợc liệu Từ kg dƣợc liệu HĐRM, sử dụng 1,6 lít cồn 96 % để làm ẩm dƣợc liệu 33 lít cồn 96 % chiết ngấm kiệt với tốc độ xả 10 – 15 giọt/ phút Rút đƣợc lít dịch chiết, sau cạn bếp cách thủy thu đƣợc 330 g cao tổng Tiến hành lắc phân bố lần lƣợt thu đƣợc:  47,15 g cao PE  19,43 g cao EtOAc  27,53 g cao cồn lại Bảng 4.2 Kết xác định độ ẩm Bột dƣợc liệu Cao PE Cao EtOAc Cao cồn Khối lƣợng trung bình (g) Độ ẩm trung bình (%) 1,003 0,521 0,522 0,514 4,7 0,74 1,27 1,36 4.4 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa phân đoạn 4.4.1 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa cao SKLM UV 254 nm UV 365nm Nhúng với TT DPPH Hình 4.20 SKLM thăm dị hoạt tính chống oxy hóa 38 Nhận xét: cao phân đoạn đƣợc thử tác dụng chống oxy hóa, nhận thấy cao làm màu tím thuốc thử DPPH màu vàng sáng tím Tuy nhiên, có cao EtOAc màu vàng nhiều nên cao EtOAc có tác dụng chống oxy hóa cao 4.4.2 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa cao quang phổ UV – Vis Để khẳng định xác khả chống oxy hóa cao, tiến hành đánh giá hoạt tính chống oxy hóa dựa gía trị IC50 Khảo sát cao thu đƣợc nồng độ mg/ml Tính HTCO (%) trung bình cao Sau đó, chọn cao có HTCO (%) cao nhất, tiến hành xây dựng đƣờng chuẩn tính IC50 nồng độ khác So sánh kết với IC50 chất đối chứng vitamin C Bảng 4.3 Kết thăm dị khả chống oxy hóa cao nồng độ mg/ml Cao PE Cao EtOAc Cao cồn Abs trung bình HTCO (%) 1,03 0,853 1,245 0,436 1,192 1,158 17,18% Ống chứng Ống thử Ống chứng Ống thử Ống chứng Ống thử 64,98% 2,85% Bảng 4.4 Kết đo độ hấp thu cao EtOAc nồng độ Abs trung bình Ống chứng Nồng độ mg/ml Nồng độ 0,8 mg/ml Nồng độ 0,5 mg/ml Nồng độ 0,4 mg/ml Nồng độ 0,2 mg/ml 0,918 0,115 0,222 0,575 0,664 0,773 39 HTCO (%) 87,47% 75,82% 37,36% 27,67% 15,8% Độ hấp thu HTCO (%) 100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 y = 0.0967x - 7.2489 R² = 0.9799 độ hấp thu Linear (độ hấp thu) 500 1000 1500 nồng độ (µg/ml) Hình 4.21 Biểu đồ đƣờng chuẩn cao EtOAc Bảng 4.5 Kết đo độ hấp thu chất đối chứng vitamin C nồng độ Abs trung bình Ống chứng Nồng độ 0,05 mg/ml Nồng độ 0,04 mg/ml Nồng độ 0,03 mg/ml Nồng độ 0,02 mg/ml Nồng độ 0,01 mg/ml 0,918 0,038 0,074 0,154 0,338 0,581 HTCO (%) 95,86% 91,94% 83,22% 63,18% 36,71% Độ hấp thu HTCO (%) 120 y = 1.4706x + 30.064 R² = 0.9041 100 80 độ hấp thu 60 Linear (độ hấp thu) 40 20 0 20 40 60 nồng độ (µg/ml) 40 Hình 4.22 Biểu đồ đƣờng chuẩn vitamin C Nhận xét: Qua thông số bảng 3.4 bảng 3.5, vẽ vào phần mềm Excel ta có phƣơng trình tuyến tính hoạt tính dạng y = ax + b Thay y = 50 ta đƣợc kết IC50 nhƣ bảng sau: Bảng 4.6 Kết xác định giá trị IC50 mẫu Mẫu Vitamin C Cao EtOAc Phƣơng trình hồi quy y = 1,4706x + 30,064 y = 0,0967x – 7,2489 IC50 (µg/ml) 13,55 592,03 Kết luận: giá trị IC50 cao EtOAc 592,03 (µg/ml) (< mg/ml) Từ cho thấy cao EtOAc có hoạt tính chống oxy hóa tƣơng đối cao 41 4.5 Bàn luận Trên giới, có nhiều viết nghiên cứu HĐRM Tuy nhiên, Việt Nam, loại nên tài liệu nghiên cứu Dựa theo tài liệu tham khảo, xác định đặc điểm hình thái vi học để phân biệt với khác chi học Trên thực tế, xác định đƣợc tên khoa học đặc điểm thực vật học nhƣ tài liệu tham khảo Điểm đáng ý tinh thể calci oxalat hình cầu gai hình kim xuất hầu hết phận cây: lá, rễ thân Điều đặc biệt giới thực vật Theo tài liệu (Barbosa et al, 2002; Beltrame et al, 2001) HĐRM có flavonoid với cấu trúc là: kaemferol – – O – rhamnosid quercetin – – O – rhamnosid Luteolin, kaempferol, luteonin – – sulfat đƣợc chiết từ dung dịch nƣớc sau thủy phân Thực tế, làm khảo sát sơ thành phần hóa thực vật nhận thấy HĐRM có hợp chất flavonoid Ngồi ra, cịn có hợp chất khác nhƣ: carotenoid, tinh dầu, tannin, saponin, chất khử hợp chất polyuronid Mặc dù khơng tiến hành xác định cấu trúc hóa học chất có đƣợc khảo sát đất nƣớc khác nhƣng xác định đƣợc flavonoid thành phần hóa học Có nhiều tài liệu cho thấy giới thử tác dụng hạ đƣờng huyết kháng viêm HĐRM Tuy nhiên, chƣa tìm đƣợc tài liệu nghiên cứu hoạt tính chống oxy Đây thử nghiệm hoạt tính sinh học hay cần thiết Kết thử nghiệm cho thấy có hoạt tính chống oxy hóa tƣơng đối cao (64,98 %) 42 CHƢƠNG KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ 5.1 Kết luận 5.1.1 Thực vật học Đã tiến hành khảo sát đặc điểm hình thái, so sánh với tài liệu tham khảo, định danh xác tên khoa học mẫu thực vật thu hái đƣợc dùng nghiên cứu Cissus verticilla (L.) Nicolson & C.E.Jarvis, họ Nho (Vitaceae) 5.1.2 Hóa học Mẫu dƣợc liệu đƣợc sơ chế kiểm tra độ ẩm trƣớc sơ chế Khảo sát thành phần hóa thực vật cho thấy diện hợp chất: flavonoid, carotenoid, tinh dầu, tannin, saponin, chất khử hợp chất polyuronid Từ kg dƣợc liệu khô chiết đƣợc 330 g cao tổng Tiến hành lắc phân bố thu đƣợc cao phân đoạn nhƣ sau: 47,15 g cao PE; 19,43 g cao EtOAc 27,53 g cao cồn lại 5.1.3 Thử nghiệm tác dụng dược lý Kết thử nghiệm tác dụng chống oxy hóa sắc ký lớp mỏng cho thấy cao có tác dụng chống oxy hóa sơ kết luận cao EtOAc cho kết rõ Tiến hành thăm dị khả chống oxy hóa cao phƣơng pháp đo điểm máy quang phổ UV – Vis giúp khẳng định cao EtOAc chống oxy hóa mạnh (64,98 %) cao tính đƣợc giá trị IC50 cách xây dựng đƣờng chuẩn cao EtOAc nồng độ khác (IC50 = 592,03 µg/ml) 5.2 Kiến nghị - Chiết xuất, phân lập thêm thành phần hóa học cao EtOAc - Tiến hành thêm thử nghiệm dƣợc lý khác thử nghiệm tác dụng chống oxy hóa in vivo nhằm góp phần chứng minh giá trị trị liệu - Thử nghiệm lâm sàng để sản xuất chế phẩm phục vụ việc điều trị bệnh thời đại 43 TÀI LIỆU THAM KHẢO Almeida E.R., Oliveira J.R.G., Lucena F.RS, Silva C.V.N.S., Soares R.P.F., Cavalcanti J.B and Couto G.B.L.(2007) Embriofetotoxic effect and offspring postnatal development exposed to hydroalcoholic fraction extract of Cissus sicyoides L during wistar rats pregnancy Journal of Medicinal Plants Research Vol 1(5), pp 109-112 Barbosa, W.L.R., W.R.A.S Santos, L.N Pinto and I.C.C Tavares (2002) Flavonóides de Cissus verticillatae a atividade hipoglicemiante chá de suas folhas Rev Bras Farmacogn., v 12, pp 13 – 15 Beltrame, F.L., J.L sartoretto, R.B Bazotte, R.N Cuman and D.A.G Cortez (2001) Estudo fitoquímico e avaliaỗóo potencial antidiabộtico Cissus sicyoides L (Vitaceae) Química Nova,Vol 24, pp 783 – 785 Favier A (2003) Le stress oxydant: Intéréte conceptuel et expérimental dans la compréhension des mécanismes des maladies et potentiel thérapeutique L’actualité chimique, novembre – décembre 2003, pp 108 – 115 Gardès – Albert M., Bonnefont – Rousselot D., Abedinzadeh Z et Jore D (2003) Espèces réactives de l’oxygène Comment l’oxygène peut – il devenir toxique? L’actualité chimique, pp 91 – 96 Jovanovic S V and Simic M G (2000) Antioxidants in nutrition Annals of the New York Academy of Sciences, 899, pp 326 – 334 Lachman J., Hamouz K., Orsak M and Pivec V (2000) Potato tuber as a significant source of antioxidants in human nutrition Rostlinna vyroba, 46, pp 231 – 236 Lê Thanh Tâm (2010) Nghiên cứu hoạt tính chống oxy hóa độc tính tế bào số hợp chất lignin stilbene Luận văn thạc sĩ ngành Hóa phân tích, trƣờng Đại học Khoa học Tự nhiên Thành phố Hồ Chí Minh Niki E., Noguchi N., Tsuchihashi H and Gotoh N (1995) Interaction among vitamin C, vitamin E, and beta – carotene American Journal of Nutrition, 62, pp 1322 – 1326 10 Pepato M.T.A.M, Baviera R., Vendramine M.P., Perez M.D.A.P., Kettelhut Ido C (2003) Cissus sicyoides (princess vine) in the longterm treatment of streptozotocin diabetic rats Biotechnol Appl Biochem 37, pp 15 – 20 11 Phạm Hoàng Hộ (2000) Cây cỏ Việt Nam, Nhà xuất trẻ, tr 464 – 467 12 Pincemail J., Dafraigne, Meurisse M et Limet R (1998) Antioxydants et prévention des maladies cardiovasculaires, lère partie: la vitamine C Médi – Sphere, 89, pp 27 – 30 13 Proctor P H (1989) Free radicals and human disease CRC handbook of free radicals and antioxidants, 1, pp 209 – 221 44 14 Quilez A.M., Saenz M.T., Garcia M.D and R de la Puerta (2004) Phytochemical analysis and anti – allergicstudy of Agave intermixta Trel and Cissus sicyoides L JPP, 56, pp 1185 – 1189 15 Rolland Y (2004) Antioxydants naturels végétaux OCL, 11 (6), pp 419 – 424 16 Singh N and Rajini P S (2004) Free radical scavenging activity of an aqueous extract of potato peel Food chemistry, 85, pp 611 – 616 17 Takhtalan A (2009) Flowering Plants Springer, pp 316 18 Trƣơng Thị Đẹp (2007) Thực vật dược Bộ môn Thực vật, khoa Dƣợc, Đại học Y Dƣợc Thành phố Hồ Chí Minh, tr.354 19 Vansant G., Pincemail J., Defraigne J O., Van Camp J., Goyens P et Hercberg S (2004) Antioxidants et alimentation Institut Danone, pp 67 20 Viana G.S.B., Medeiros A.C.C., Lacerda A.M.R (2004) Hypoglycemic and antilipemic effects of the aqueous extract from Cissus sicyoides BMC Pharmacology, pp – 21 Viện Dƣợc liệu (2006) Phương pháp nghiên cứu tác dụng dược lý thuốc từ dược thảo Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, tr 279 – 292 22 Võ Văn Chi (1997) Từ điển thuốc Việt Nam Nhà xuất Khoa học Kỹ thuật, Hà Nội, tr 1131 – 1133 TRANG WEB 23 Công ty TNHH Cảnh quan Ý tƣởng Cây Liêm hồ đằng http://caycanhsanvuon.vn/products/cay-liem-ho-dang/92.html Truy cập ngày 10 tháng 02 năm 2017 45 Ý KIẾN CỦA GIÁO VIÊN HƢỚNG DẪN ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… ……………………………………………………………………………………………… Cần Thơ, ngày 12 tháng 06 năm 2017 GVHD GVHD DS Trì Kim Ngọc PGS.TS Trần Công Luận 46 ... 1,27 1,36 4.4 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa phân đoạn 4.4.1 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa cao SKLM UV 254 nm UV 365nm Nhúng với TT DPPH Hình 4.20 SKLM thăm dị hoạt tính chống oxy hóa 38 Nhận... phân đoạn vết chất thể hoạt tính chống oxy hóa 3.2.4.3 Khảo sát hoạt tính chống oxy hóa cao quang phổ UV – Vis Đây phƣơng pháp giúp khẳng định xác hoạt tính chống oxy hóa cao phân đoạn Quy trình...TRƢỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƢỢC – ĐIỀU DƢỠNG KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH DƢỢC MÃ SỐ: 52720401 THỬ HOẠT TÍNH CHỐNG OXY HĨA CỦA CAO HỒ DẰNG RỄ MÀNH (Cissus verticillata, họ Nho Vitaceae)