ĐỊNH LƯỢNG POLYPHENOL, FLAVONOID VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ ENZYM α − GLUCOSIDASE, ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÂY ỔI, CÀ NA

TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG    - KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC HỌC MÃ SỐ: 7720201 ĐỊNH LƯỢNG POLYPHENOL, FLAVONOID VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ α-GLUCOSIDASE, ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÂY ỔI (PSIDIUM GUAJAVA L.) VÀ CÂY CÀ NA (ELAEOCARPUS HYGROPHILUS KURZ) GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN ThS TRÌ KIM NGỌC SINH VIÊN THỰC HIỆN THÁI NGUYỄN NGỌC TRÂN MSSV: 15D720401290 LỚP: ĐẠI HỌC DƯỢC 10C Cần Thơ, 2020 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐÔ KHOA DƯỢC – ĐIỀU DƯỠNG    - KHOÁ LUẬN TỐT NGHIỆP ĐẠI HỌC CHUYÊN NGÀNH: DƯỢC HỌC MÃ SỐ: 7720201 ĐỊNH LƯỢNG POLYPHENOL, FLAVONOID VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ α-GLUCOSIDASE, ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÂY ỔI (PSIDIUM GUAJAVA L.) VÀ CÂY CÀ NA (ELAEOCARPUS HYGROPHILUS KURZ) GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN ThS TRÌ KIM NGỌC SINH VIÊN THỰC HIỆN THÁI NGUYỄN NGỌC TRÂN MSSV: 15D720401290 LỚP: ĐẠI HỌC DƯỢC 10C Cần Thơ, 2020 LỜI CẢM ƠN Trải qua năm học tập rèn luyện mái trường Đại học Tây Đô em tiếp thu, học hỏi nhiều kiến thức quý báu cần thiết cho thân công việc sau Trong suốt trình thực đề tài nghiên cứu, em xin chân thành gởi lời biết ơn sâu sắc đến ThS Trì Kim Ngọc tận tình hướng dẫn, chỉnh sửa sai sót để em hồn thành khóa luận Em xin gởi lời cám ơn chân thành đến quý thầy cô trường Đại học Tây Đô, quý thầy cô khoa Dược-Điều dưỡng, người trực tiếp giảng dạy, truyền đạt cho em kiến thức bổ ích kinh nghiệm q báu, tảng bản, hành trang vô quý giá để em bước vào nghiệp tương lai Em xin gởi lời cảm ơn chân thành đến quý thầy cô Trung tâm Sâm Dược liệu-TP HCM, Trung Tâm Khoa Học-Cơng Nghệ Dược Sài Gịn đặc biệt q thầy phịng thí nghiệm trường Đại Học Tây Đô tạo điều kiện cho em hồn thành nghiên cứu Do kiến thức cịn hạn chế nên khơng tránh khỏi thiếu sót, mong nhận thơng cảm, dẫn đóng góp ý kiến q thầy cơ, để khóa luận hoàn thiện Xin chân thành cảm ơn! Tp Cần Thơ, ngày 20 tháng năm 2020 Sinh viên thực Thái Nguyễn Ngọc Trân i LỜI CAM ĐOAN Em xin cam đoan cơng trình nghiên cứu thân Các số liệu, kết trình bày khóa luận trung thực chưa cơng bố cơng trình khóa luận trước Nếu phát có gian lận nào, em xin hoàn toàn chịu trách nhiệm nội dung khóa luận Tp Cần Thơ, ngày 20 tháng năm 2020 Sinh viên thực Thái Nguyễn Ngọc Trân ii TÓM TẮT Hiện nay, chất lượng sống dần nâng cao, người quan tâm đến sức khỏe, trọng việc sử dụng dược chất có nguồn gốc từ thiên nhiên Ở Việt Nam, Ổi Cà na gần gũi quen thuộc Đây nguồn nguyên liệu có tiềm năng, chưa khai thác sử dụng mức Đối tượng nghiên cứu: Cây Ổi (Psidium guajava L., Myrtaceae) Cà na (Elaeocarpus hygrophilus Kurz, Elaeocarpaceae) Phương pháp nghiên cứu: Mô tả hình thái, vi học để xác định lồi Phân tích sơ thành phần hóa thực vật theo phương pháp Ciuley cải tiến Chiết xuất dược liệu phương pháp chiết nóng Định lượng polyphenol phương pháp Folin-Ciocalteu Định lượng flavonoid phương pháp Aluminum Chlorid colorimetric (AlCl3) Khảo sát hoạt tính ức chế α-glucosidase theo phương pháp mô tả Hua Qiang Dong et al., 2012 Khảo sát hoạt tính ức chế dịng tế bào ung thư phương pháp SRB (Sulforhodamin B) Kết Đặc điểm vi phẫu gồm mô phận thân, lá, rễ Ổi Cà na Soi bột dược liệu Ổi Cà na có cấu tử: Tinh thể calci oxalat hình cầu gai, biểu bì có lỗ khí, lơng che chở đơn bào, mạch vòng, mạch mạng, mạch vạch, mạch xoắn… Thành phần hóa thực vật Ổi Cà na: Flavonoid, tannin, polyphenol, saponin acid hữu Trong đó: Hàm lượng polyphenol: Cao chiết W-PG (18,97 mg GA/g dược liệu khô), E-PG (23,60 mg GA/g dược liệu khô), W-EH (28,48 mg GA/g dược liệu khô), E-EH (35,5 mg GA/g dược liệu khô) Hàm lượng flavonoid: Cao chiết W-PG (77,51 mg QE/g dược liệu khô), E-PG (51,21 mg QE/g dược liệu khô), W-EH (9,33 mg QE/g dược liệu khô), E-EH (22,94 mg QE/g dược liệu khô) Hoạt tính ức chế α-glucosidase: Cao chiết W-PG (IC50 = 0,29 µg/mL), E-PG (IC50 = 0,91 µg/mL), W-EH (IC50 = 0,27 µg/mL), E-EH (IC50 = 0,30 µg/mL) Hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan (Hep G2): Cao chiết W-PG (25,57%), E-PG (37,05%), W-EH (25,28%), E-EH (17,24%) Hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú (MCF-7): Cao chiết W-PG (44,46%), E-PG (63,95%) Hoạt tính ức chế tế bào ung thư cổ tử cung (HeLa): Cao chiết W-EH (12,44%), E-EH (35,72%) Kết luận: Kết nghiên cứu cho thấy Ổi Cà na nguồn nguyên liệu có tác dụng ức chế α-glucosidase, có tiềm hỗ trợ điều trị bệnh đái tháo đường Ngoài ra, Ổi cịn có hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú (MCF-7) tương đối cao, hứa hẹn nhiều tiềm phát triển có ứng dụng mạnh mẽ Y học, đặc biệt điều trị bệnh ung thu vú iii MỤC LỤC LỜI CẢM ƠN i LỜI CAM ĐOAN ii TÓM TẮT iii MỤC LỤC iv DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT vii DANH MỤC BẢNG ix DANH MỤC HÌNH xi MỞ ĐẦU xiii CHƯƠNG TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU ỔI 1.1.1 Vị trí phân loại 1.1.2 Tổng quan thành phần hóa học 1.1.3 Tác dụng dược lý 1.1.4 Công dụng y học cổ truyền 1.2 TỔNG QUAN VỀ DƯỢC LIỆU CÀ NA 1.2.1 Vị trí phân loại 1.2.2 Tổng quan thành phần hóa học 10 1.2.3 Tác dụng dược lý 12 1.2.4 Công dụng y học cổ truyền 12 1.3 TỔNG QUAN VỀ HỢP CHẤT POLYPHENOL 13 1.3.1 Giới thiệu 13 1.3.2 Phân loại 13 1.3.3 Tác dụng sinh học polyphenol 15 1.4 TỔNG QUAN VỀ HỢP CHẤT FLAVONOID 17 1.4.1 Giới thiệu 17 1.4.2 Phân loại 17 1.4.3 Tác dụng sinh học Flavonoid 19 1.5 TỔNG QUAN VỀ UNG THƯ 21 1.5.1 Ung thư vú 21 1.5.2 Ung thư cổ tử cung 22 1.5.3 Ung thư gan 22 1.5.4 Phương pháp khảo sát hoạt tính ức chế tế bào ung thư 22 1.6 TỔNG QUAN BỆNH ĐÁI THÁO ĐƯỜNG VÀ α-GLUCOSIDASE 23 1.6.1 Bệnh đái tháo đường 23 iv 1.6.2 Alpha-glucosidase 23 1.6.3 Phương pháp khảo sát hạ đường huyết hoạt tính ức chế α-glucosidase 24 1.7 TÌNH HÌNH NGHIÊN CỨU HIỆN TẠI CỦA DƯỢC LIỆU 24 1.7.1 Các nghiên cứu dược liệu Ổi 24 1.7.2 Các nghiên cứu dược liệu Cà na 27 CHƯƠNG ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 29 2.1 ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 29 2.1.1 Nguyên liệu 29 2.1.2 Dung mơi hóa chất 29 2.1.3 Dụng cụ, trang thiết bị 29 2.2 PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 30 2.2.1 Nghiên cứu thực vật học 30 2.2.2 Phân tích sơ thành phần hóa thực vật 31 2.2.3 Chiết xuất cao cồn 96%, cao nước xác định hiệu suất, độ ẩm cao 32 2.2.4 Định lượng Polyphenol cao cồn 96% cao nước 33 2.2.5 Định lượng Flavonoid cao cồn 96% cao nước 34 2.2.6 Khảo sát hoạt tính ức chế α-glucosidase 36 2.2.7 Khảo sát hoạt tính ức chế tế bào ung thư 36 CHƯƠNG KẾT QUẢ VÀ BÀN LUẬN 38 3.1 KẾT QUẢ 38 3.1.1 Nghiên cứu thực vật học 38 3.1.2 Kết khảo sát sơ thành phần hóa thực vật 48 3.1.3 Chiết xuất cao cồn 96% cao nước Ổi Cà na 48 3.1.4 Kết định lượng polyphenol cao cồn 96% cao nước cao chiết Ổi Cà na 49 3.1.5 Kết định lượng flavonoid cao cồn 96% cao nước cao chiết Ổi Cà na 50 3.1.6 Kết hoạt tính ức chế α-glucosidase cao chiết Ổi Cà na 51 3.1.6 Kết hoạt tính ức chế tế bào ung thư 57 3.2 BÀN LUẬN 58 3.2.1 Nghiên cứu thực vật học 58 3.2.2 Về khảo sát sơ thành phần hóa thực vật 59 v 3.2.3 Về định lượng polyphenol cao cồn 96% cao nước Ổi Cà na 59 3.2.4 Về định lượng flavonoid cao cồn 96% cao nước Ổi Cà na 60 3.2.5 Về hoạt tính ức chế α-glucosidase cao chiết Ổi Cà na 61 3.2.6 Về hoạt tính ức chế tế bào ung thư cao chiết 63 CHƯƠNG KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT 66 4.1 KẾT LUẬN 66 4.2 ĐỀ XUẤT 66 TÀI LIỆU THAM KHẢO 67 DANH MỤC PHỤ LỤC 77 vi DANH MỤC CHỮ VIẾT TẮT Chữ tắt Chữ nguyên Ý nghĩa Akt Protein Kinase B Kinase điều hòa chức tế bào nội mô ATCC American Type Culture Collection Bảo tàng giống chuẩn vi sinh vật Mỹ DĐVN V Dược điển Việt Nam V DMSO Dimethyl Sulfoxyt DPPH 2,2-diphenyl-1picrylhydrazyl E Coli Escherichia coli Trực khuẩn lỵ Ethanol-Elaeocarpus hygrophilus Endothelia Nitri Oxyd Synthase Cao chiết cồn (96%) Cà na E-PG Ethanol-Psidium guajava Cao chiết cồn (96%) Ổi FRAP Feric Reducing Antioxidant Power Thử nghiệm đánh giá khả khử ion sắt III HBV Hepatitis B Virus Viêm gan siêu vi B HCV Hepatitis C Virus Viêm gan siêu vi C HDL High Density Lipoprotein Lipoprotein tỷ trọng cao HeLa Henrietta Lacks Tế bào ung thư cổ tử cung HPLC High Performance Liquid Chromatography Sắc ký lỏng hiệu cao HPV Human Papilloma Virus Vi rút gây bệnh người HSV-2 Herpes Simplex Virus HTCO Hoạt tính chống oxy hóa IC50 Inhibitory Concentration 50% GA Acid gallic E-EH eNOS vii Tế bào nội mô Khả đánh bắt 50% gốc tự Chữ tắt Chữ nguyên Ý nghĩa IDF International Diabetes Federation Liên đoàn Đái tháo đường giới KB Human Epidemoid Carcinoma Tế bào ung thư biểu mô người LDL Low Density Lipoprotein Lipoprotein tỷ trọng thấp MCF-7 Michigan Cancer Foundation-7 Tế bào ung thư vú Tế bào ung thư vú không thuộc hormon MDA-MB-231 MeOH Methanol Tế bào ung thư xương MG-63 MIC Minimal Inhibitory Concentration Nồng độ ức chế tối thiểu MTT 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl) -2,5-diphenyltetrazolium bromide Phương pháp tetrazolium NO Nitrit Oxid NOS Nitrit Oxid Synthase Enzym tổng hợp Nitrit Oxid OD Optical Density Mật độ quang P388 Lymphocytic Leukemia Tế bào ung thư máu lympho PTP1B Protein Tyrosin Phosphatase 1B QE Quercetin RUT Rutin SPSS Statistical Package for the Social Sciences SRB Sulforhodamin B UV-Vis Ultraviolet and Visible Tử ngoại khả kiến W-EH Water-Elaeocarpus hygrophilus Cao chiết nước Cà na WHO World Health Organization Tổ chức Y tế giới W-PG Water-Psidium guajava Cao chiết nước Ổi viii Phần mềm thống kê PHỤ LỤC HIỆU SUẤT CHIẾT CAO VÀ ĐỘ ẨM CAO Hiệu suất chiết cao Dược liệu W-PG E-PG W-EH E-EH Khối lượng bột dược liệu (g) 100 80 100 80 Khối lượng cao (g) 20,32 g 14,81 g 24,17 g 16,10 g Độ ẩm cao (%) 11,90% 15,87% 2,47% 15,43% Hiệu suất chiết cao (%) 22,71% 20,69% 26,71% 22,24% Độ ẩm dược liệu khô Lần Mẫu cao chiết Lần Lần Trung bình Cân nặng (g) Độ ẩm (%) Cân nặng (g) Độ ẩm (%) Cân nặng (g) Độ ẩm (%) Cân nặng (g) Độ ẩm (%) W-PG E-PG W-EH 1,05 1,05 1,06 9,56 9,56 8,13 1,06 1,06 1,07 10,43 10,43 10,23 1,07 1,07 1,08 11,59 11,59 10,20 1,06 1,06 1,07 10,53 10,53 9,52 E-EH 1,06 8,13 1,07 10,23 1,08 10,20 1,07 9,52 Độ ẩm cao chiết Lần Mẫu cao chiết Lần Lần Trung bình Cân nặng (g) Độ ẩm (%) Cân nặng (g) Độ ẩm (%) Cân nặng (g) Độ ẩm (%) Cân nặng (g) Độ ẩm (%) W-PG 0,55 13,96 0,57 9,85 0,59 11,79 0,57 11,90 E-PG W-EH E-EH 0,56 0,53 0,54 15,93 1,22 14,81 0,56 0,52 0,55 13,27 4,16 14,81 0,57 0,55 0,53 18,42 2,04 16,67 0,56 0,53 0,54 15,87 2,47 15,43 PL-3 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG HÀM LƯỢNG POLYPHENOL TOÀN PHẦN TRONG CÁC CAO CHIẾT LÁ ỔI VÀ LÁ CÀ NA Bảng kết đo độ hấp thu chất chuẩn acid gallic nồng độ Các nồng độ (µg/ml) 20 40 60 80 100 120 Lần 0,133 0,524 0,825 1,084 1,442 1,718 Lần 0,137 0,536 0,826 1,063 1,408 1,690 Lần 0,140 0,543 0,888 1,096 1,465 1,735 Trung bình 0,137 0,534 0,846 1,438 1,438 1,714 Độ hấp thu quang phổ mẫu cao chiết nước cồn 96% Ổi, Cà na Mẫu Lần Lần Lần Trung bình Bì Trung bình trừ bì W-PG 1,480 1,455 1,473 1,469 0,111 1,358 E-PG 0,912 0,910 1,018 0,947 0,021 0,926 W-EH 1,679 1,676 1,598 1,651 0,061 1,590 E-EH 1,365 1,335 1,340 1,347 0,008 1,338 Hàm lượng polyphenol (mg AG/g dược liệu khô) mẫu cao chiết nước cồn 96% Ổi, Cà na Lần Lần Lần Trung bình Độ lệch chuẩn W-PG 19,11 18,79 19,02 18,97 0,13 E-PG 22,82 22,78 25,20 23,60 1,13 W-EH 28,95 28,90 27,60 28,48 0,62 E-EH 35,95 35,23 35,35 35,51 0,32 Mẫu PL-4 PHỤ LỤC KẾT QUẢ ĐỊNH LƯỢNG HÀM LƯỢNG FLAVONOID TOÀN PHẦN TRONG CÁC CAO CHIẾT LÁ ỔI VÀ LÁ CÀ NA Bảng kết đo độ hấp thu chất chuẩn quercetin nồng độ Các nồng độ (µg/ml) 10 Lần 0,004 0,006 0,018 0,022 0,032 0,040 Lần 0,005 0,008 0,016 0,025 0,032 0,038 Lần 0,002 0,007 0,016 0,028 0,030 0,039 Trung bình 0,004 0,007 0,017 0,025 0,031 0,039 20 40 60 80 100 Độ hấp thu quang phổ mẫu cao chiết nước cồn 96% Ổi, Cà na Mẫu Lần Lần Lần Trung bình Bì Trung bình trừ bì W-PG 0,235 0,229 0,211 0,225 0,070 0,155 E-PG 0,220 0,217 0,200 0,212 0,096 0,116 W-EH 0,068 0,067 0,058 0,064 0,050 0,014 E-EH 0,177 0,163 0,157 0,166 0,117 0,049 Hàm lượng flavonoid (mg QE/g dược liệu khô) mẫu cao chiết nước cồn 96% Ổi, Cà na Mẫu Lần Lần Lần Trung bình Độ lệch chuẩn W-PG 82,50 79,51 70,51 77,51 5,10 E-PG 54,57 53,25 45,80 51,21 3,86 W-EH 11,71 11,06 5,22 9,33 2,92 E-EH 28,31 21,67 18,83 22,94 3,97 PL-5 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ α-GLUCOSIDASE Hoạt tính ức chế α-glucosidase đối chứng dương acarbose nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/ml) 50 100 250 500 1000 Nồng độ phản ứng (µg/ml) 18,75 37,50 93,75 187,50 375,00 OD Trung bình 1,637 1,396 1,158 0,881 0,704 Hoạt tính ức chế (%) 21,62 33,18 44,56 57,80 66,31 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao chiết nước Ổi nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/ml) Nồng độ phản ứng (µg/ml) OD Trung bình Hoạt tính ức chế (%) 0,2 0,4 0,6 0,8 0,075 0,150 0,225 0,300 0,375 1,875 2,11 2,12 1,88 1,62 1,27 0,27 29,60 29,02 37,76 46,90 59,51 94,53 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao chiết cồn Ổi nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/ml) Nồng độ phản ứng (µg/ml) OD Trung bình Hoạt tính ức chế (%) 0,4 0,6 0,8 10 0,150 0,225 0,300 0,375 1,875 3,750 2,32 2,13 2,00 1,86 1,26 0,95 22,16 28,84 33,52 38,64 60,09 71,04 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao chiết nước Cà na nồng độ Nồng độ ban đầu (μg/ml) Nồng độ phản ứng (μg/ml) OD Trung Bình Hoạt tính ức chế (%) 0,2 0,4 0,6 0,8 0,075 0,150 0,225 0,300 0,375 1,875 2,06 1,96 1,77 1,38 1,27 0,56 31,45 34,76 41,84 55,47 59,53 84,21 PL-6 Hoạt tính ức chế α-glucosidase cao chiết cồn Cà na nồng độ Nồng độ ban đầu (µg/ml) Nồng độ phản ứng (µg/ml) OD Trung bình Hoạt tính ức chế (%) 0,2 0,4 0,6 0,8 0,075 0,15 0,225 0,3 0,375 1,875 2,17 2,04 1,70 1,45 1,28 0,68 27,19 31,96 44,02 52,93 58,79 80,56 PL-7 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ GAN (Hep G2) Kết hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan (Hep G2) mẫu cao chiết đối chứng dương camptothecin Mẫu cao chiết Nồng độ (µg/mL) W-PG E-PG W-EH E-EH Camptothecin 200 200 200 200 0,07 Phần trăm gây độc tế bào Hep G2 (%) Trung Lần Lần Lần bình 26,61 25,67 24,42 25,57 41,49 38,80 30,87 37,05 24,65 27,16 24,03 25,28 21,98 19,73 10,00 17,24 48,90 55,93 49,59 51,47 Độ lệch chuẩn 1,10 5,52 1,66 6,37 3,88 Tế bào ung thư gan (Hep G2) môi trường Tế bào ung thư gan (Hep G2) mơi trường có dung môi tan DMSO Tế bào ung thư gan (Hep G2) mơi trường có dung mơi nước Tế bào ung thư gan (Hep G2) tác động cao chiết W-PG Tế bào ung thư gan (Hep G2) tác động cao chiết W-EH Tế bào ung thư gan (Hep G2) tác động cao chiết E-PG PL-8 Tế bào ung thư gan (Hep G2) tác động cao chiết E-EH PL-9 Tế bào ung thư gan (Hep G2) tác động đối chứng dương camptothecin PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ VÚ (MCF-7) Kết hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú (MCF-7) mẫu cao chiết đối chứng dương camptothecin Phần trăm gây độc tế bào Hep G2 (%) Mẫu cao chiết Nồng độ (µg/mL) Lần Lần Lần W-PG E-PG Camptothecin 200 200 0,01 43,33 63,43 49,49 40,78 59,23 61,03 49,26 69,19 56,44 Trung bình 44,46 63,95 55,65 Độ lệch chuẩn 4,35 5,00 5,81 Tế bào ung thư vú (MCF-7) môi trường Tế bào ung thư vú (MCF-7) mơi trường có dung mơi DMSO Tế bào ung thư vú (MCF-7) mơi trường có dung môi nước Tế bào ung thư vú (MCF-7) tác động cao chiết W-PG Tế bào ung thư vú (MCF-7) tác động cao chiết E-PG Tế bào ung thư vú (MCF-7) tác động đối chứng dương camptothecin PL-10 PHỤ LỤC KẾT QUẢ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỔ TỬ CUNG (HELA) Kết hoạt tính ức chế tế bào ung thư cổ tử cung (HeLa) mẫu cao chiết đối chứng dương camptothecin Mẫu cao chiết Nồng độ (µg/mL) W-EH E-EH Camptothecin 200 200 Phần trăm gây độc tế bào Hep G2 (%) Trung Lần Lần Lần bình 15,32 11,58 10,42 12,44 30,43 34,42 42,30 35,72 53,87 47,79 47,48 49,71 Độ lệch chuẩn 2,56 6,04 3,60 Tế bào ung cổ tử cung (HeLa) môi trường Tế bào ung cổ tử cung (HeLa) mơi trường có dung mơi DMSO Tế bào ung cổ tử cung (HeLa) tác động cao chiết W-EH Tế bào ung cổ tử cung (HeLa) tác động cao chiết E-EH đối chứng dương camptothecin Tế bào ung cổ tử cung (HeLa) tác động đối chứng dương camptothecin PL-11 PHỤ LỤC 10 KẾT QUẢ PHÂN TÍCH SAI SỐ GIỮA CÁC SỐ LIỆU BẰNG PHẦN MỀM SPSS 20.0 Mẫu W-PG E-PG W-EH E-EH Hàm lượng polyphenol Khoảng tin cậy Ý nghĩa 95% khác biệt Giới hạn Giới hạn Hàm lượng flavonoid Khoảng tin cậy Ý nghĩa 95% khác biệt Giới hạn Giới hạn E-PG -4,62927* -2,4849 -6,7736 26,29926* 39,2309 13,3676 W-EH -9,51000* -7,3656 -11,6544 68,17374* 81,1054 55,2421 E-EH -16,53611* -14,3917 -18,6805 54,56816* 67,4998 41,6365 W-PG 4,62927* 6,7736 2,4849 -26,29926* -13,3676 -39,2309 W-EH -4,88073* -2,7364 -7,0251 41,87449* 54,8062 28,9428 E-EH -11,90684* -9,7625 -14,0512 28,26890* 41,2006 15,3372 W-PG 9,51000* 11,6544 7,3656 -68,17374* -55,2421 -81,1054 E-PG 4,88073* 7,0251 2,7364 -41,87449* -28,9428 -54,8062 E-EH -7,02611* -4,8817 -9,1705 -13,60558* -0,6739 -26,5373 W-PG 16,53611* 18,6805 14,3917 -54,56816* -41,6365 -67,4998 E-PG 11,90684* 14,0512 9,7625 -28,26890* -15,3372 -41,2006 W-EH 7,02611* 9,1705 4,8817 13,60558* 26,5373 0,6739 So sánh mẫu * Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,05 PL-12 Mẫu So sánh mẫu Giá trị IC50 Khoảng tin cậy 95% Ý nghĩa Giới hạn Giới hạn khác biệt E-PG -0,62333 1,8068 -3,0535 W-EH 0,02333 2,4535 -2,4068 E-EH -0,01000 2,4202 -2,4402 -121,92000* -119,4898 -124,3502 W-PG 0,62333 3,0535 -1,8068 W-EH 0,64667 3,0768 -1,7835 E-EH 0,61333 3,0435 -1,8168 -121,29667* -118,8665 -123,7268 W-PG -0,02333 2,4068 -2,4535 E-PG -0,64667 1,7835 -3,0768 E-EH -0,03333 2,3968 -2,4635 -121,94333* -119,5132 -124,3735 W-PG 0,01000 2,4402 -2,4202 E-PG -0,61333 1,8168 -3,0435 W-EH 0,03333 2,4635 -2,3968 Acarbose -121,91000* -119,4798 -124,3402 W-PG 121,92000* 124,3502 119,4898 E-PG 121,29667* 123,7268 118,8665 W-EH 121,94333* 124,3735 119,5132 E-EH 121,91000* 124,3402 119,4798 W-PG Acarbose E-PG Acarbose W-EH Acarbose E-EH Acarbose * Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,05 PL-13 So sánh mẫu Hoạt tính ức chế tế bào ung thư gan (Hep G2) Khoảng tin cậy Ý nghĩa 95% khác biệt Giới hạn Giới hạn E-PG -11,48667* -22,8871 -0,0863 W-EH 0,28667 -11,1137 11,6871 E-EH 8,33000 -3,0704 19,7304 Camptothecin -25,90667* -37,3071 -14,5063 W-PG 11,48667* 0,0863 22,8871 W-EH 11,77333* 0,3729 23,1737 E-EH 19,81667* 8,4163 31,2171 Camptothecin -14,42000* -25,8204 -3,0196 W-PG -0,28667 -11,6871 11,1137 E-PG -11,77333* -23,1737 -0,3729 E-EH 8,04333 -3,3571 19,4437 -26,19333* -37,5937 -14,7929 W-PG -8,33000 -19,7304 3,0704 E-PG -19,81667* -31,2171 -8,4163 W-EH -8,04333 -19,4437 3,3571 Camptothecin -34,23667* -45,6371 -22,8363 W-PG 25,90667* 14,5063 37,3071 Camptothe E-PG 14,42000* 3,0196 25,8204 cin W-EH 26,19333* 14,7929 37,5937 E-EH 34,23667* 22,8363 45,6371 Mẫu W-PG E-PG W-EH Camptothecin E-EH * Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,05 PL-14 Mẫu W-PG So sánh mẫu Hoạt tính ức chế tế bào ung thư vú (MCF-7) Khoảng tin cậy 95% Ý nghĩa Giới hạn Giới hạn khác biệt E-PG -19,49333* -6,7445 -32,2422 Camptothecin -11,19667 1,5522 -23,9455 W-PG 19,49333* 32,2422 6,7445 Camptothecin 8,29667 21,0455 -4,4522 W-PG 11,19667 23,9455 -1,5522 E-PG -8,29667 4,4522 -21,0455 E-PG Camptothecin * Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,05 Hoạt tính ức chế tế bào ung thư cổ tử cung (HeLa) Mẫu So sánh mẫu Ý nghĩa khác biệt W-EH E-EH Camptothecin Khoảng tin cậy 95% Giới hạn Giới hạn E-EH -23,27667* -12,2052 -34,3481 Camptothecin -36,94000* -25,8685 -48,0115 W-EH 23,27667* 34,3481 12,2052 Camptothecin -13,66333* -2,5919 -24,7348 W-EH 36,94000* 48,0115 25,8685 E-EH 13,66333* 24,7348 2,5919 * Sự khác biệt có ý nghĩa thống kê mức 0,05 PL-15 TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐƠ CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA DƯỢC - ĐIỀU DƯỠNG Độc lập - Tự - Hạnh Phúc XÁC NHẬN CỦA GIẢNG VIÊN HƯỚNG DẪN Họ tên sinh viên: THÁI NGUYỄN NGỌC TRÂN Lớp: Đại học Dược 10C Niên khóa: 2015 – 2020 Chuyên ngành: Dược học MSSV: 15D720401290 Đã thực hiên đề tài khóa luận tốt nghiệp “Định lượng polyphenol, flavonoid khảo sát hoạt tích ức chế α-glucosidase, ức chế tế bào ung thư Ổi (Psidium guajava L.) Cà na (Elaeocarpus hygrophilus Kurz)” hướng dẫn giảng viên ThS TRÌ KIM NGỌC Tp Cần thơ, ngày 20 tháng năm 2020 Xác nhận giảng viên hướng dẫn ThS TRÌ KIM NGỌC TRƯỜNG ĐẠI HỌC TÂY ĐƠ CỘNG HỊA XÃ HỘI CHỦ NGHĨA VIỆT NAM KHOA DƯỢC - ĐIỀU DƯỠNG Độc lập - Tự - Hạnh Phúc GIẤY XÁC NHẬN ĐÃ BỔ SUNG, SỬA CHỮA KHÓA LUẬN THEO Ý KIẾN ĐÓNG GÓP CỦA HỘI ĐỒNG CHẤM KHÓA LUẬN Họ tên sinh viên: THÁI NGUYỄN NGỌC TRÂN Lớp: Đại học Dược 10C Niên khóa: 2015 – 2020 Chuyên ngành: Dược học MSSV: 15D720401290 Tên đề tài khóa luận: Định lượng polyphenol, flavonoid khảo sát hoạt tích ức chế α-glucosidase, ức chế tế bào ung thư Ổi (Psidium guajava L.) Cà na (Elaeocarpus hygrophilus Kurz) Giảng viên hướng dẫn: ThS TRÌ KIM NGỌC Khóa luận bổ sung sửa chữa điểm sau: Điều chỉnh số lỗi tả Thay đổi tên đề tài Chỉnh sửa phần kết luận Giản lượt phần phụ lục Giảng viên hướng dẫn Tp Cần Thơ, ngày 20 tháng năm 2020 Họ tên sinh viên ThS TRÌ KIM NGỌC THÁI NGUYỄN NGỌC TRÂN Thư ký hội đồng Chủ tịch Hội đồng ThS NGUYỄN PHÚ LỘC ThS ĐỖ VĂN MÃI ... NGÀNH: DƯỢC HỌC MÃ SỐ: 7720201 ĐỊNH LƯỢNG POLYPHENOL, FLAVONOID VÀ KHẢO SÁT HOẠT TÍNH ỨC CHẾ α- GLUCOSIDASE, ỨC CHẾ TẾ BÀO UNG THƯ CỦA CÂY ỔI (PSIDIUM GUAJAVA L.) VÀ CÂY CÀ NA (ELAEOCARPUS HYGROPHILUS... lượng hàm lượng polyphenol tổng flavonoid tổng cao chiết Ổi Cà na Khảo sát hoạt tính ức chế α- glucosidase cao chiết Ổi Cà na Khảo sát hoạt tính ức chế dòng tế bào ung thư cao chiết Ổi Cà na xiv... ? ?Định lượng polyphenol, flavonoid khảo sát hoạt tính ức chế α- glucosidase, ức chế tế bào ung thư Ổi (Psidium guajava L.) Cà na (Elaeocarpus hygrophilus Kurz)” thực nhằm giải mục tiêu: Định lượng