Nghiên cứu xác định các điều kiện thích hợp để nuôi trồng chủng tảo chaetoceros pseudo curvisetus

Tr-ờng đại học vinh Khoa NÔNG LÂM NGƯ === === HỒ SỸ KỶ KHãA LN tèt nghiƯp § Ị tµ i : NGHIÊN CỨU XÁC ĐỊNH CÁC ĐIỀU KIỆN THÍCH HỢP ĐỂ NI TRỒNG CHỦNG TẢO Chaetoceros - curvisetus ngµnh: NI TRỒNG THUỶ SẢN Líp: 49K NTTS Giảng viên hướng dẫn: ThS Lê Minh Hải VINH - 2012 LỜI CẢM ƠN Trong trình học tập làm đề tài nhận nhiều giúp đỡ từ phía nhà trường, Ngành Ni trồng Thuỷ sản – Khoa Nơng Lâm Ngư – Trường Đại học Vinh, phịng thí nghiệm plankton Cơng ty CP Chăn Ni C.P Việt Nam – Chi nhánh Bình Định 3, thầy cơ, gia đình bạn bè Qua cho phép tơi bày tỏ lời cảm ơn đến: Ban chủ nhiệm quý thầy cô thuộc Khoa Nông Lâm Ngư tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành chương trình học tập công tác tốt nghiệp Và trình làm đề tài tơi nhận hướng dẫn tận tình khoa học thầy Ths Lê Minh Hải, cho phép tơi bày tỏ lịng biết ơn sâu sắc tới thầy Xin chân thành cảm ơn tới anh chị phịng phịng thí nghiệm plankton Công ty CP Chăn Nuôi C.P Việt Nam – Chi nhánh Bình Định hướng đẫn tận tình, tạo điều kiện thuận lợi giúp tơi hồn thành đề tài Cuối cùng, xin gửi lời cảm ơn tới gia đình, bạn bè động viên, giúp đỡ tơi suốt trình học tập thực đề tài Vinh, tháng5 năm 2012 Sinh viên thực Hồ Sỹ Kỷ DANH MỤC CÁC CHỮ VIẾT TẮT PUSA: Polyunsaturated fatty acid (acid béo không sinh cholesterol) N: Môi Enriched Seawater Medium - kí hiệu N F2: Mơi trường f2 2XEM: Môi trường 2X Erdschreiber's Medium Tb/ml: Tế bào /ml mẫu MĐBĐ: Mật độ ban đầu MĐCĐ: Mật độ cực đại CTTN : Cơng thức thí nghiệm MỤC LỤC MỞ ĐẦU 1.Lý chọn đề tài 2.Mục tiêu đề tài Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm sinh học 1.1.1 Vị trí phân loại tảo Chaetoceros pseudo-curvisetus Hình 1.1 Hình thái chủng Chaetoceros pseudo-curvisetus .9 1.1.2 Đặc điểm sinh học phân bố 1.2 Ảnh hưởng yếu tố môi trường đến sinh trưởng phát triển tảo silic 11 1.2.1.Ảnh hưởng ánh sáng 11 1.2.2.Ảnh hưởng nhiệt độ 12 1.2.3.Ảnh hưởng pH 12 1.2.4.Ảnh hưởng thành phần dinh dưỡng 13 1.2.5.Ảnh hưởng chế độ sục khí 13 1.3 Nhu cầu dinh dưỡng 14 1.4 Giá trị dinh dưỡng vi tảo .16 1.4.1 Protein .17 1.4.2 Lipid thành phần acid béo 18 1.4.3 Hydratcarbon 19 1.4.4 Vitamin 19 1.4.5 Sắc tố .20 1.5 Các hình thức ni tảo .20 1.5.1 Ni thu sinh khối tồn (batch culture) .20 1.5.2 Nuôi bán liên tục (semi – continuous cultrure) .20 1.5.3 Nuôi tảo khuẩn (axenic culture) 21 1.6 Tình hình nghiên cứu ứng dụng tảo làm thức ăn cho động vật thủy sản giới Việt Nam 21 1.6.1 Trên giới 21 1.6.2 Việt Nam 22 Chương 2: VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 26 2.1 Vật liệu đối tượng nghiên cứu .26 2.1.1 Đối tượng nghiên cứu 26 2.1.2 Vật liệu nghiên cứu 26 2.2 Nội dung nghiên cứu 29 2.3 Phương pháp nghiên cứu 30 2.3.1 Phương pháp bố trí thí nghiệm 30 Hình 2.3.1 Các lơ thí nghiệm 31 2.3.1Sơ đồ khối nghiên cứu 33 Hình 2.3.1 Sơ đồ khối nghiên cứu thí nghiệm .33 Hình 2.3.1 Sơ đồ khối nghiên cứu thí nghiệm .34 Hình 2.3.3 Sơ đồ khối nghiên cứu thí nghiệm 35 2.4 Phương pháp xác định tiêu 35 2.4.1 Đếm tế bào 35 2.4.2 Phương pháp xác định số môi trường 36 2.5 Xử lý số liệu .36 2.6 Thời gian địa điểm nghiên cứu 36 Chương 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN 36 3.1 Nghiên cứu xác định môi trường dinh dưỡng thích hợp để ni cấy tảo C pseudo-curvisetus (TN1) 37 Hình 3.1 Sự sinh trưởng chủng tảo C pseudo-curvisetus môi trường 38 Bảng 3.1.2 Mật độ cực đại công thức thực nghiệm 39 Hình 3.1.2 Mật độ tế bào cực đại chủng C pseudo-curvisetus mơi trường có độ mặn khác 39 3.2 Xác định nồng độ muối thích hợp lên phát triển tảo C pseudo-curvisetus (TN2) 40 Bảng 3.2.1 Ảnh hưởng độ mặn lên phát triển tảo C pseudo-curvisetus 40 Hình 3.2.1 Sự sinh trưởng chủng C pseudo-curvisetus mơi trường .41 có độ mặn khác 41 Bảng 3.2.2 Mật độ cực đại cơng thức thí nghiệm 41 Hình 3.2.2 Mật độ tế bào cực đại chủng C pseudo-curvisetus môi trường có độ mặn khác 42 3.3 Xác định điều kiện pH thích hợp lên phát triển tảo C pseudo-curvisetus (TN3) 42 Bảng 3.3.1 Ảnh hưởng pH lên phát triển tảo C pseudo-curvisetus .43 Hình 3.3.2 Sự sinh trưởng chủng C pseudo-curvisetus môi trường có pH khác 44 Bảng 3.3.2 Mật độ cực đại cơng thức thí nghiệm 44 Hình 3.3.2 Mật độ tế bào cực đại chủng C pseudo-curvisetus môi trường có độ pH khác .45 3.4 Ảnh hưởng mật độ nuôi ban đầu lên phát triển tảo C pseudocurvisetus (TN4) 45 Kết thí nghiệm trình bày bảng 3.1.1, bảng 3.1.2 hình 3.1.1, hình 3.1.2 45 Bảng 3.4.1 Ảnh hưởng mật độ cấy ban đầu lên phát triển tảo .45 Hình 4.1.1 Sự phát triển tảo C pseudo-curvisetusở MĐBĐ khác .46 Bảng 4.1.2 Thời gian đạt MĐCĐ MĐCĐ CTTN 47 Hình 3.4.2 Mật độ tế bào cực đại chủng C pseudo-curvisetus CT khác 47 KẾT LUẬN VÀ ĐỀ XUẤT Ý KIẾN .49 Kết luận 49 Đề xuất ý kiến .49 MỞ ĐẦU Lý chọn đề tài Thức ăn tự nhiên đóng vai trị quan trọng, định thành cơng ương ni nhiều lồi động vật thuỷ sản, đặc biệt giai đoạn ấu trùng Các đối tượng chủ yếu quan tâm nghiên cứu, sử dụng làm thức ăn cho thuỷ sản nuôi: vi tảo, luân trùng, Artemia, Copepoda… vi tảo nguồn thức ăn tự nhiên có ý nghĩa lớn Vì chúng thức ăn thay cho giai đoạn ấu trùng suốt giai đoạn trưởng thành động vật thân mềm Đối với ấu trùng giáp xác cá bột số loài cá, tảo thức ăn bắt buộc giai đoạn bắt đầu ăn ngồi Vi tảo nguồn thức ăn có giá trị dinh dưỡng cao, tính theo khối lượng khơ có hàm lượng protein dao động từ 29-57%, lipid 7-25%, carbohydrate 5-32%, khoáng chất khác 6-39% (Lương Văn Thịnh 1999) [14] Thành phần amino acid tảo gần giống với thành phần amino acid trứng nên dễ tiêu hoá có giá trị dinh dưỡng cao (Brown ctv, 1989) [4] Ở hầu hết loài vi tảo biển, hàm lượng amino acid không thay tương đương cao hàm lượng chúng ấu trùng số đối tượng thủy sản có giá trị kinh tế Điều khẳng định thêm giá trị dinh dưỡng vi tảo biển Vi tảo biển nguồn cung cấp acid béo cần thiết cho hệ động vật biển Đặc biệt acid béo không no cần thiết cho trình sinh trưởng giai đoạn ấu trùng non động vật biển Theo Pohl (1982), Olssen (1989), trích theo Reitan, 1994 [16], q trình tổng hợp acid béo chưa no nhiều nối đôi (n-3 PUFA) xảy tế bào thực vật, cịn loại acid béo khơng no (3-n PUFA) mạch dài thấy có hàm lượng cao loài tảo biển Hàm lượng vitamin vi tảo biển nhiều, phong phú: vitamin thường gặp tảo nuôi gồm Thiamin (B1), Riboflavin (B2), Pyridoxine (B6), Cyanocobalamin (B12), Biotin, Ascorbic acid (C), Nicotinic acid, Pantothenic acid, Choline, Inositol, Tocopherol (E) & β carotene (Provitamin A) (Brown ctv, 1989) [7] Ngồi vai trị cung cấp thức ăn cho ln trùng cá bột, tảo cịn có tác dụng làm ổn định môi trường cung cấp oxy hoà tan hấp thụ NH (sản phẩm thải động vật) bể ương ấu trùng Hiện nay, giới khoảng 40 loài vi tảo sử dụng phổ biến NTTS (Couteau,1996) như: Skeletonema costatum, Chaetoceros sp , Isochrysis galbana, Tetraselmis suecica, Platymonas sp, Nannochloris atomus, Nannochloropsis oculata Trong năm gần đây, trại sản xuất giống thương phẩm phát triển kỹ thuật ni trồng đại trà nhiều lồi vi tảo thuộc chi như: Dunaliella, Tetraselmis, Isochrysis, Chlorella, Spirulina Phaeodactylum Ở Việt Nam, tảo Silic chủ yếu phân lập số giống vi tảo thuộc loài Skeletonema costatum Chaetoceros sp làm thức ăn cho thủy sản Ngoài ra, số nhóm nghiên cứu nổ lực khai thác nhóm tảo Silic sống bám đáy chúng có thành phần dinh dưỡng tương đối cao nguồn thức ăn tốt cho ấu trùng non loài sinh vật sống đáy [28] Mặt khác, nước ta việc chủ động sản xuất thức ăn vi tảo biển phục vụ cho đối tượng NTTS cịn gặp nhiều khó khăn Ngun nhân đa số giống vi tảo biển sử dụng nguồn gốc nhập ngoại nên chưa có phương pháp lưu giữ giống quy trình cơng nghệ ni chưa thích hợp với điều kiện khí hậu Việt Nam Vì thế, hiệu đem lại chưa cao, sinh khối đạt thấp, bị tạp nhiễm nhiều, nguồn giống sơ cấp không chủ động Do vậy, chưa khai thác hết tiềm vai trò vi tảo chưa đáp ứng nhu cầu thực tế vi tảo nuôi trồng thủy sản Do lồi có ý nghĩa quan trọng NTTS nên vấn đề nghiên cứu để đánh giá mức độ ảnh hưởng yếu tố sinh thái lên phát triển để nuôi trồng đối tượng điều kiện Việt Nam cần thiết Xuất phát từ thực tiễn tiến hành đề tài “Nghiên cứu xác định điều kiện thích hợp để nuôi trồng chủng tảo Chaetoceros pseudocurvisetus” Mục tiêu đề tài Xác định môi trường nuôi, độ mặn, pH, mật độ ban đầu, thời gian tảo phát triển môi trường tảo Chaetoceros pseudo-curvisetus Từ làm sở góp phần hồn thiện qui trình nuôi tảo silic Chương 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Đặc điểm sinh học 1.1.1 Vị trí phân loại tảo Chaetoceros pseudo-curvisetus Phân loại: Ngành: silic-Bacillariophyta Lớp: Coscinodiscophyceae Phân lớp: Chaetocerotophycidae Bộ: Chaetocerotales Round & Crawford 1990 Họ: Chaetocerotaceae Ralfs in Prichard 1861 Chi: Chaetoceros Ehrenberg 1844 Loài: Chaetoceros pseudo-curvisetus L.A Mangin Hình 1.1 Hình thái chủng Chaetoceros pseudo-curvisetus 1.1.2 Đặc điểm sinh học phân bố - Đặc điểm chung ngành tảo Silic: Tảo Silic bao gồm số lớn cá thể màu vàng nâu, hầu hết chúng sống đơn độc gắn với thành chuỗi tế bào hay tập đoàn, cạn nước Màu chúng pha trộn chlorophyl a, c1 c2 với sắc tố vàng nâu fucoxanthin β-caroten Sản phẩm dự trữ chrysolaminarin (β1,3-linked glucan), số có diện lipid Tế bào bao phủ vách tế bào làm chất silic, có hình dáng rõ ràng, thể cấu trúc hay trang trí khác nhau, mà dùng đặc điểm để phân loại Vỏ bao gồm hai nửa gắn với vành đai, nửa vỏ (epitheca) dài rộng gắn với nửa vỏ (hypotheca) hẹp hơn, tạo thành cấu trúc hộp Tế bào chứa hai lục lạp, nhân nằm đối xứng hai bên hay trung tâm, đơi có pyrenoid (hạt tạo tinh bột) Một số loài tảo silic có rãnh trung tâm, tảo có rãnh có chuyển động trượt Có hai nhóm tảo Silic tảo Silic lơng chim có đối xứng hai bên tảo Silic trung tâm có đối xứng tỏa tia Nhóm tảo Silic trung tâm phổ biến mơi trường nước biển đóng vai trị quan trọng chuỗi thức ăn Tảo Silic có lối quang tự dưỡng, hỗn dưỡng hay khơng màu dị dưỡng [4],[27] Trầm tích tảo Silic, mà biết lớp vỏ tảo Silic, có nhiều ứng dụng cơng nghiệp (q trình lọc hấp phụ), ứng dụng kinh tế tế bào sống phần lớn liên quan đến ni trồng thủy sản, số lồi tảo Silic chứa lượng lớn đáng kể PUFA, đặc biệt eicosap entaenoic acid (Pohl, 1982) Tảo silic sinh sản vơ tính hình thức phân đơi tế bào, phương pháp phổ biến Kết lần phân bào tạo nên tế bào có kích thước tế bào mẹ tế bào có kích thước nhỏ Hình thức sinh sản giúp tảo phát triển nhanh số lượng cá thể quần thể, ước tính quần thể tảo nhân đôi số lượng từ 0,5 đến lần ngày tùy theo lồi Do có nửa số tế bào giảm kích thước sau phân chia, thường khoảng 1/3 kích thước lớn nhất, nên quần thể tảo Silic có tượng khơi phục kích thước cách hình thành tế bào sinh trưởng (auxospore) thơng qua sinh sản hữu tính Bào tử sinh trưởng lớn dần lên tế bào có kích thước tế bào ban đầu Ngồi ra, tảo silic hình thành bào tử nghỉ điều kiện môi trường không thuận lợi, điều kiện mơi trường thích hợp, chất tế bào nhân chui khỏi bào tử nghỉ dùng lại vỏ cũ Nhờ có dưỡng chất mà tế bào tồn trầm tích nhiều năm, có đến thập kỉ [25],[27] 10 Tot al 6,8200E2 1,00000 ,57735 679,5159 684,4841 681,00 683,00 18 1,2652E3 692,74888 1,63282E2 920,7263 1609,7181 681,00 2538,00 7,2467E2 2,51661 1,45297 718,4151 730,9183 722,00 727,00 11 1,4363E3 6,65833 3,84419 1419,7931 1452,8735 1432,00 1444,00 3 2,2170E3 6,24500 3,60555 2201,4866 2232,5134 2212,00 2224,00 4,5600E2 1,00000 ,57735 453,5159 458,4841 455,00 457,00 5,3300E2 2,64575 1,52753 526,4276 539,5724 530,00 535,00 4,2233E2 ,57735 ,33333 420,8991 423,7676 422,00 423,00 18 9,6489E2 675,75795 1,59278E2 628,8424 1300,9354 422,00 2224,00 Tot al 4,2000E2 2,00000 1,15470 415,0317 424,9683 418,00 422,00 13 1,0283E3 6,11010 3,52767 1013,1550 1043,5117 1023,00 1035,00 3 1,5357E3 1,52753 ,88192 1531,8721 1539,4612 1534,00 1537,00 2,4667E2 1,52753 ,88192 242,8721 250,4612 245,00 248,00 4,2467E2 1,52753 ,88192 420,8721 428,4612 423,00 426,00 2,2267E2 2,08167 1,20185 217,4955 227,8378 221,00 225,00 18 6,4633E2 492,85411 1,16167E2 401,2427 891,4239 221,00 1537,00 Tot al ANOVA Sum of Squares Ngay3 Between Groups 8351,022 32,667 12 2,722 41787,778 17 132470,444 26494,089 62,000 12 5,167 132532,444 17 Between Groups 1,833E7 3665104,456 Within Groups 122,000 12 10,167 Total 1,833E7 17 8158273,111 1631654,622 44,000 12 3,667 8158317,111 17 Total Between Groups Within Groups Total Ngay7 Ngay9 Mean Square 41755,111 Within Groups Ngay5 df Between Groups Within Groups Total 68 F 3,068E3 ,000 5,128E3 ,000 3,605E5 ,000 4,450E5 ,000 Sig Ngay11 Between Groups 7762833,778 1552566,756 196,000 12 16,333 Total 7763029,778 17 Between Groups 4129282,667 825856,533 105,333 12 8,778 4129388,000 17 Within Groups Ngay13 Within Groups Total 9,506E4 ,000 9,408E4 ,000 Multiple Comparisons (I) (J) 95% Confidence Interval 1=ct1,2= 1=ct1,2= ct2,3=ct ct2,3=ct 3,4=CT4 3,4=CT4 Mean Difference Dependent Variable ,5=CT5 ,5=CT5 (I-J) ngay3 -110,66667* 1,19257 ,000 -113,3239 -108,0095 -33,66667* 1,19257 ,000 -36,3239 -31,0095 -180,66667* 1,19257 ,000 -183,3239 -178,0095 1,19257 ,588 -1,9905 3,3239 LSD 5 ngay5 LSD Std Error ,66667 Sig Lower Bound Upper Bound 110,66667* 1,19257 ,000 108,0095 113,3239 77,00000* 1,19257 ,000 74,3428 79,6572 -70,00000* 1,19257 ,000 -72,6572 -67,3428 111,33333* 1,19257 ,000 108,6761 113,9905 33,66667* 1,19257 ,000 31,0095 36,3239 -77,00000* 1,19257 ,000 -79,6572 -74,3428 -147,00000* 1,19257 ,000 -149,6572 -144,3428 34,33333* 1,19257 ,000 31,6761 36,9905 180,66667* 1,19257 ,000 178,0095 183,3239 70,00000* 1,19257 ,000 67,3428 72,6572 147,00000* 1,19257 ,000 144,3428 149,6572 181,33333* 1,19257 ,000 178,6761 183,9905 -,66667 1,19257 ,588 -3,3239 1,9905 -111,33333* 1,19257 ,000 -113,9905 -108,6761 -34,33333* 1,19257 ,000 -36,9905 -31,6761 -181,33333* 1,19257 ,000 -183,9905 -178,6761 -746,66667* 2,00000 ,000 -751,1229 -742,2104 69 ngay7 LSD 232,00000* 2,00000 ,000 227,5437 236,4563 156,00000* 2,00000 ,000 151,5437 160,4563 7,33333* 2,00000 ,004 2,8771 11,7896 746,66667* 2,00000 ,000 742,2104 751,1229 978,66667* 2,00000 ,000 974,2104 983,1229 902,66667* 2,00000 ,000 898,2104 907,1229 754,00000* 2,00000 ,000 749,5437 758,4563 -232,00000* 2,00000 ,000 -236,4563 -227,5437 -978,66667* 2,00000 ,000 -983,1229 -974,2104 -76,00000* 2,00000 ,000 -80,4563 -71,5437 -224,66667* 2,00000 ,000 -229,1229 -220,2104 -156,00000* 2,00000 ,000 -160,4563 -151,5437 -902,66667* 2,00000 ,000 -907,1229 -898,2104 76,00000* 2,00000 ,000 71,5437 80,4563 -148,66667* 2,00000 ,000 -153,1229 -144,2104 -7,33333* 2,00000 ,004 -11,7896 -2,8771 -754,00000* 2,00000 ,000 -758,4563 -749,5437 224,66667* 2,00000 ,000 220,2104 229,1229 148,66667* 2,00000 ,000 144,2104 153,1229 -550,33333* 8,03603 ,000 -568,2387 -532,4279 -359,33333* 8,03603 ,000 -377,2387 -341,4279 -300,33333* 8,03603 ,000 -318,2387 -282,4279 350,33333* 8,03603 ,000 332,4279 368,2387 550,33333* 8,03603 ,000 532,4279 568,2387 191,00000* 8,03603 ,000 173,0946 208,9054 250,00000* 8,03603 ,000 232,0946 267,9054 900,66667* 8,03603 ,000 882,7613 918,5721 359,33333* 8,03603 ,000 341,4279 377,2387 -191,00000* 8,03603 ,000 -208,9054 -173,0946 59,00000* 8,03603 ,000 41,0946 76,9054 709,66667* 8,03603 ,000 691,7613 727,5721 300,33333* 8,03603 ,000 282,4279 318,2387 -250,00000* 8,03603 ,000 -267,9054 -232,0946 -59,00000* 8,03603 ,000 -76,9054 -41,0946 70 ngay9 LSD ngay11 LSD 650,66667* 8,03603 ,000 632,7613 668,5721 -350,33333* 8,03603 ,000 -368,2387 -332,4279 -900,66667* 8,03603 ,000 -918,5721 -882,7613 -709,66667* 8,03603 ,000 -727,5721 -691,7613 -650,66667* 8,03603 ,000 -668,5721 -632,7613 -991,00000* 2,33809 ,000 -996,2096 -985,7904 -266,66667* 2,33809 ,000 -271,8763 -261,4571 254,66667* 2,33809 ,000 249,4571 259,8763 -3,33333 2,33809 ,184 -8,5429 1,8763 991,00000* 2,33809 ,000 985,7904 996,2096 724,33333* 2,33809 ,000 719,1237 729,5429 1245,66667* 2,33809 ,000 1240,4571 1250,8763 987,66667* 2,33809 ,000 982,4571 992,8763 266,66667* 2,33809 ,000 261,4571 271,8763 -724,33333* 2,33809 ,000 -729,5429 -719,1237 521,33333* 2,33809 ,000 516,1237 526,5429 263,33333* 2,33809 ,000 258,1237 268,5429 -254,66667* 2,33809 ,000 -259,8763 -249,4571 -1245,66667* 2,33809 ,000 -1250,8763 -1240,4571 -521,33333* 2,33809 ,000 -526,5429 -516,1237 -258,00000* 2,33809 ,000 -263,2096 -252,7904 3,33333 2,33809 ,184 -1,8763 8,5429 -987,66667* 2,33809 ,000 -992,8763 -982,4571 -263,33333* 2,33809 ,000 -268,5429 -258,1237 258,00000* 2,33809 ,000 252,7904 263,2096 -626,00000* 24,04348 ,000 -679,5722 -572,4278 63,33333* 24,04348 ,025 9,7611 116,9055 274,00000* 24,04348 ,000 220,4278 327,5722 178,00000* 24,04348 ,000 124,4278 231,5722 626,00000* 24,04348 ,000 572,4278 679,5722 689,33333* 24,04348 ,000 635,7611 742,9055 900,00000* 24,04348 ,000 846,4278 953,5722 804,00000* 24,04348 ,000 750,4278 857,5722 -63,33333* 24,04348 ,025 -116,9055 -9,7611 71 ngay13 LSD -689,33333* 24,04348 ,000 -742,9055 -635,7611 210,66667* 24,04348 ,000 157,0945 264,2389 114,66667* 24,04348 ,001 61,0945 168,2389 -274,00000* 24,04348 ,000 -327,5722 -220,4278 -900,00000* 24,04348 ,000 -953,5722 -846,4278 -210,66667* 24,04348 ,000 -264,2389 -157,0945 -96,00000* 24,04348 ,003 -149,5722 -42,4278 -178,00000* 24,04348 ,000 -231,5722 -124,4278 -804,00000* 24,04348 ,000 -857,5722 -750,4278 -114,66667* 24,04348 ,001 -168,2389 -61,0945 96,00000* 24,04348 ,003 42,4278 149,5722 -436,00000* 3,64539 ,000 -444,1224 -427,8776 -97,00000* 3,64539 ,000 -105,1224 -88,8776 120,66667* 3,64539 ,000 112,5442 128,7891 98,66667* 3,64539 ,000 90,5442 106,7891 436,00000* 3,64539 ,000 427,8776 444,1224 339,00000* 3,64539 ,000 330,8776 347,1224 556,66667* 3,64539 ,000 548,5442 564,7891 534,66667* 3,64539 ,000 526,5442 542,7891 97,00000* 3,64539 ,000 88,8776 105,1224 -339,00000* 3,64539 ,000 -347,1224 -330,8776 217,66667* 3,64539 ,000 209,5442 225,7891 195,66667* 3,64539 ,000 187,5442 203,7891 -120,66667* 3,64539 ,000 -128,7891 -112,5442 -556,66667* 3,64539 ,000 -564,7891 -548,5442 -217,66667* 3,64539 ,000 -225,7891 -209,5442 -22,00000* 3,64539 ,000 -30,1224 -13,8776 -98,66667* 3,64539 ,000 -106,7891 -90,5442 -534,66667* 3,64539 ,000 -542,7891 -526,5442 -195,66667* 3,64539 ,000 -203,7891 -187,5442 22,00000* 3,64539 ,000 13,8776 30,1224 * The mean difference is significant at the 0.05 level 72 PHỤ LỤC 5: Ảnh hưởng mật độ ban đầu lên phát triển tảo Chaetoceros pseudo-curvisetus Descriptives 95% Confidence Interval for Mean N ngay2 35,3333 ,57735 57,0000 2,00000 3 61,0000 76,3333 ,57735 80,3333 15 62,0000 1,2167E2 3 ngay6 Upper Bound Minimum Maximum 35,00 36 52,0317 61,9683 55,00 59 1,00000 ,57735 58,5159 63,4841 60,00 62 ,33333 74,8991 77,7676 76,00 77 1,52753 ,88192 76,5388 84,1279 79,00 82 52,8142 71,1858 35,00 82 1,52753 ,88192 117,8721 125,4612 120,00 123 2,9567E2 1,15470 ,66667 292,7982 298,5351 295,00 297 3,5300E2 2,64575 346,4276 359,5724 350,00 355 4,6433E2 1,15470 ,66667 461,4649 467,2018 463,00 465 4,5800E2 1,00000 ,57735 455,5159 460,4841 457,00 459 15 3,3853E2 266,3968 410,6699 120,00 465 3,0167E2 1,52753 ,88192 297,8721 305,4612 300,00 303 5,5300E2 1,73205 1,00000 548,6973 557,3027 552,00 555 3 7,5233E2 2,51661 1,45297 746,0817 758,5849 750,00 755 8,9533E2 2,08167 1,20185 890,1622 900,5045 893,00 897 9,8400E2 2,64575 1,52753 977,4276 990,5724 982,00 987 15 6,9727E2 254,30844 65,66216 556,4353 838,0980 300,00 987 7,4933E2 7,63763 4,40959 730,3604 768,3062 741,00 756 8,5400E2 5,00000 2,88675 841,5793 866,4207 849,00 859 3 1,0137E3 2,08167 1,20185 1008,4955 1018,8378 1012,00 1016 1,3427E3 3,05505 1,76383 1335,0775 1350,2558 1340,00 1346 1,4563E3 ,57735 1454,8991 1457,7676 1456,00 1457 Total ,33333 Lower Bound 36,7676 Total ngay5 Std Error 33,8991 Total ngay4 Std Deviation Total ngay3 Mean 16,58743 130,26175 1,15470 4,28286 1,52753 33,63344 ,33333 15 1,0832E3 283,64369 73,23649 926,1234 1240,2766 741,00 1457 8,5533E2 2,51661 1,45297 849,0817 861,5849 853,00 858 1,5640E3 4,00000 2,30940 1554,0634 1573,9366 1560,00 1568 3 1,9877E3 1,15470 ,66667 1984,7982 1990,5351 1987,00 1989 2,3170E3 5,00000 2304,5793 2329,4207 2312,00 2322 2,88675 73 2,5330E3 2,64575 1,52753 2526,4276 2539,5724 2531,00 2536 15 1,8514E3 616,68153 1,59226E2 1509,8931 2192,9069 853,00 2536 1,6550E3 2,00000 1,15470 1650,0317 1659,9683 1653,00 1657 2,2147E3 2,08167 1,20185 2209,4955 2219,8378 2213,00 2217 3 2,6737E3 5,77350 3,33333 2659,3245 2688,0088 2667,00 2677 4,0167E3 5,03322 2,90593 4004,1634 4029,1699 4012,00 4022 4,0227E3 1,52753 ,88192 4018,8721 4026,4612 4021,00 4024 15 2,9165E3 990,33954 2,55705E2 2368,1016 3464,9651 1653,00 4024 2,3507E3 5,13160 2,96273 2337,9191 2363,4143 2345,00 2355 3,8193E3 1,52753 ,88192 3815,5388 3823,1279 3818,00 3821 3 4,3377E3 5,03322 2,90593 4325,1634 4350,1699 4333,00 4343 3,8237E3 5,03322 2,90593 3811,1634 3836,1699 3819,00 3829 3,2160E3 5,00000 2,88675 3203,5793 3228,4207 3211,00 3221 15 3,5095E3 703,51118 1,81646E2 3119,8752 3899,0582 2345,00 4343 2,2173E3 5,77350 3,33333 2202,9912 2231,6755 2214,00 2224 3,2323E3 1,52753 ,88192 3228,5388 3236,1279 3231,00 3234 3 3,8770E3 2,64575 1,52753 3870,4276 3883,5724 3874,00 3879 3,2373E3 5,77350 3,33333 3222,9912 3251,6755 3234,00 3244 2,4350E3 2,00000 1,15470 2430,0317 2439,9683 2433,00 2437 15 2,9998E3 623,00197 1,60858E2 2654,7930 3344,8070 2214,00 3879 1,9923E3 5,03322 2,90593 1979,8301 2004,8366 1987,00 1997 2,4430E3 6,08276 3,51188 2427,8896 2458,1104 2436,00 2447 3 2,5400E3 5,29150 3,05505 2526,8552 2553,1448 2534,00 2544 2,8963E3 2,08167 1,20185 2891,1622 2901,5045 2894,00 2898 2,1237E3 3,05505 1,76383 2116,0775 2131,2558 2121,00 2127 15 2,3991E3 330,71772 85,39095 2215,9213 2582,2120 1987,00 2898 1,7727E3 5,03322 2,90593 1760,1634 1785,1699 1768,00 1778 2,0167E3 4,50925 2,60342 2005,4651 2027,8683 2012,00 2021 3 2,1223E3 1,52753 ,88192 2118,5388 2126,1279 2121,00 2124 2,2133E3 1,52753 ,88192 2209,5388 2217,1279 2212,00 2215 1,9860E3 2,64575 1,52753 1979,4276 1992,5724 1983,00 1988 15 2,0222E3 153,67275 39,67813 1937,0989 2107,3011 1768,00 2215 Total ngay7 Total ngay8 Total ngay9 Total ngay10 Total ngay11 Total 74 ANOVA Sum of Squares ngay2 Between Groups 959,000 16,000 10 1,600 3852,000 14 237527,733 59381,933 26,000 10 2,600 Total 237553,733 14 Between Groups 905372,933 226343,233 46,000 10 4,600 905418,933 14 1126157,733 281539,433 194,667 10 19,467 Total 1126352,400 14 Between Groups 5324034,267 1331008,567 111,333 10 11,133 5324145,600 14 Between Groups 1,373E7 3432668,767 Within Groups 138,667 10 13,867 Total 1,373E7 14 6928783,067 1732195,767 208,667 10 20,867 Total 6928991,733 14 Between Groups 5433680,400 1358420,100 160,000 10 16,000 Total 5433840,400 14 Between Groups 1531030,933 382757,733 208,000 10 20,800 1531238,933 14 330499,733 82624,933 114,667 10 11,467 330614,400 14 Total Between Groups Within Groups ngay4 Within Groups Total ngay5 Between Groups Within Groups ngay6 Within Groups Total ngay7 ngay8 Between Groups Within Groups ngay9 Within Groups ngay10 Within Groups Total ngay11 Mean Square 3836,000 Within Groups ngay3 df Between Groups Within Groups Total 75 F 599,375 ,000 2,284E4 ,000 4,921E4 ,000 1,446E4 ,000 1,196E5 ,000 2,475E5 ,000 8,301E4 ,000 8,490E4 ,000 1,840E4 ,000 7,206E3 ,000 Sig Multiple Comparisons (I) (J) 95% Confidence Interval 1=ct1,2= 1=ct1,2= ct2,3=ct ct2,3=ct 3,4=ct4, 3,4=ct4, Mean Difference Dependent Variable 5=ct5 5=ct5 ngay2 -21,66667* 1,03280 ,000 -23,9679 -19,3655 -25,66667* 1,03280 ,000 -27,9679 -23,3655 -41,00000* 1,03280 ,000 -43,3012 -38,6988 -45,00000* 1,03280 ,000 -47,3012 -42,6988 21,66667* 1,03280 ,000 19,3655 23,9679 -4,00000* 1,03280 ,003 -6,3012 -1,6988 -19,33333* 1,03280 ,000 -21,6345 -17,0321 -23,33333* 1,03280 ,000 -25,6345 -21,0321 25,66667* 1,03280 ,000 23,3655 27,9679 4,00000* 1,03280 ,003 1,6988 6,3012 -15,33333* 1,03280 ,000 -17,6345 -13,0321 -19,33333* 1,03280 ,000 -21,6345 -17,0321 41,00000* 1,03280 ,000 38,6988 43,3012 19,33333* 1,03280 ,000 17,0321 21,6345 15,33333* 1,03280 ,000 13,0321 17,6345 -4,00000* 1,03280 ,003 -6,3012 -1,6988 45,00000* 1,03280 ,000 42,6988 47,3012 23,33333* 1,03280 ,000 21,0321 25,6345 19,33333* 1,03280 ,000 17,0321 21,6345 4,00000* 1,03280 ,003 1,6988 6,3012 -174,00000* 1,31656 ,000 -176,9335 -171,0665 -231,33333* 1,31656 ,000 -234,2668 -228,3999 -342,66667* 1,31656 ,000 -345,6001 -339,7332 -336,33333* 1,31656 ,000 -339,2668 -333,3999 174,00000* 1,31656 ,000 171,0665 176,9335 LSD ngay3 LSD (I-J) Std Error 76 Sig Lower Bound Upper Bound ngay4 LSD -57,33333* 1,31656 ,000 -60,2668 -54,3999 -168,66667* 1,31656 ,000 -171,6001 -165,7332 -162,33333* 1,31656 ,000 -165,2668 -159,3999 231,33333* 1,31656 ,000 228,3999 234,2668 57,33333* 1,31656 ,000 54,3999 60,2668 -111,33333* 1,31656 ,000 -114,2668 -108,3999 -105,00000* 1,31656 ,000 -107,9335 -102,0665 342,66667* 1,31656 ,000 339,7332 345,6001 168,66667* 1,31656 ,000 165,7332 171,6001 111,33333* 1,31656 ,000 108,3999 114,2668 6,33333* 1,31656 ,001 3,3999 9,2668 336,33333* 1,31656 ,000 333,3999 339,2668 162,33333* 1,31656 ,000 159,3999 165,2668 105,00000* 1,31656 ,000 102,0665 107,9335 -6,33333* 1,31656 ,001 -9,2668 -3,3999 -251,33333* 1,75119 ,000 -255,2352 -247,4314 -450,66667* 1,75119 ,000 -454,5686 -446,7648 -593,66667* 1,75119 ,000 -597,5686 -589,7648 -682,33333* 1,75119 ,000 -686,2352 -678,4314 251,33333* 1,75119 ,000 247,4314 255,2352 -199,33333* 1,75119 ,000 -203,2352 -195,4314 -342,33333* 1,75119 ,000 -346,2352 -338,4314 -431,00000* 1,75119 ,000 -434,9019 -427,0981 450,66667* 1,75119 ,000 446,7648 454,5686 199,33333* 1,75119 ,000 195,4314 203,2352 -143,00000* 1,75119 ,000 -146,9019 -139,0981 -231,66667* 1,75119 ,000 -235,5686 -227,7648 593,66667* 1,75119 ,000 589,7648 597,5686 342,33333* 1,75119 ,000 338,4314 346,2352 143,00000* 1,75119 ,000 139,0981 146,9019 -88,66667* 1,75119 ,000 -92,5686 -84,7648 682,33333* 1,75119 ,000 678,4314 686,2352 431,00000* 1,75119 ,000 427,0981 434,9019 231,66667* 1,75119 ,000 227,7648 235,5686 77 ngay5 LSD ngay6 LSD 4 88,66667* 1,75119 ,000 84,7648 92,5686 -104,66667* 3,60247 ,000 -112,6935 -96,6399 -264,33333* 3,60247 ,000 -272,3601 -256,3065 -593,33333* 3,60247 ,000 -601,3601 -585,3065 -707,00000* 3,60247 ,000 -715,0268 -698,9732 104,66667* 3,60247 ,000 96,6399 112,6935 -159,66667* 3,60247 ,000 -167,6935 -151,6399 -488,66667* 3,60247 ,000 -496,6935 -480,6399 -602,33333* 3,60247 ,000 -610,3601 -594,3065 264,33333* 3,60247 ,000 256,3065 272,3601 159,66667* 3,60247 ,000 151,6399 167,6935 -329,00000* 3,60247 ,000 -337,0268 -320,9732 -442,66667* 3,60247 ,000 -450,6935 -434,6399 593,33333* 3,60247 ,000 585,3065 601,3601 488,66667* 3,60247 ,000 480,6399 496,6935 329,00000* 3,60247 ,000 320,9732 337,0268 -113,66667* 3,60247 ,000 -121,6935 -105,6399 707,00000* 3,60247 ,000 698,9732 715,0268 602,33333* 3,60247 ,000 594,3065 610,3601 442,66667* 3,60247 ,000 434,6399 450,6935 113,66667* 3,60247 ,000 105,6399 121,6935 -708,66667* 2,72438 ,000 -714,7370 -702,5964 -1132,33333* 2,72438 ,000 -1138,4036 -1126,2630 -1461,66667* 2,72438 ,000 -1467,7370 -1455,5964 -1677,66667* 2,72438 ,000 -1683,7370 -1671,5964 708,66667* 2,72438 ,000 702,5964 714,7370 -423,66667* 2,72438 ,000 -429,7370 -417,5964 -753,00000* 2,72438 ,000 -759,0703 -746,9297 -969,00000* 2,72438 ,000 -975,0703 -962,9297 1132,33333* 2,72438 ,000 1126,2630 1138,4036 423,66667* 2,72438 ,000 417,5964 429,7370 -329,33333* 2,72438 ,000 -335,4036 -323,2630 -545,33333* 2,72438 ,000 -551,4036 -539,2630 1461,66667* 2,72438 ,000 1455,5964 1467,7370 78 ngay7 LSD ngay8 LSD 2 753,00000* 2,72438 ,000 746,9297 759,0703 329,33333* 2,72438 ,000 323,2630 335,4036 -216,00000* 2,72438 ,000 -222,0703 -209,9297 1677,66667* 2,72438 ,000 1671,5964 1683,7370 969,00000* 2,72438 ,000 962,9297 975,0703 545,33333* 2,72438 ,000 539,2630 551,4036 216,00000* 2,72438 ,000 209,9297 222,0703 -559,66667* 3,04047 ,000 -566,4413 -552,8921 -1018,66667* 3,04047 ,000 -1025,4413 -1011,8921 -2361,66667* 3,04047 ,000 -2368,4413 -2354,8921 -2367,66667* 3,04047 ,000 -2374,4413 -2360,8921 559,66667* 3,04047 ,000 552,8921 566,4413 -459,00000* 3,04047 ,000 -465,7746 -452,2254 -1802,00000* 3,04047 ,000 -1808,7746 -1795,2254 -1808,00000* 3,04047 ,000 -1814,7746 -1801,2254 1018,66667* 3,04047 ,000 1011,8921 1025,4413 459,00000* 3,04047 ,000 452,2254 465,7746 -1343,00000* 3,04047 ,000 -1349,7746 -1336,2254 -1349,00000* 3,04047 ,000 -1355,7746 -1342,2254 2361,66667* 3,04047 ,000 2354,8921 2368,4413 1802,00000* 3,04047 ,000 1795,2254 1808,7746 1343,00000* 3,04047 ,000 1336,2254 1349,7746 -6,00000 3,04047 ,077 2367,66667* 3,04047 ,000 2360,8921 2374,4413 1808,00000* 3,04047 ,000 1801,2254 1814,7746 1349,00000* 3,04047 ,000 1342,2254 1355,7746 6,00000 3,04047 ,077 -,7746 12,7746 -1468,66667* 3,72976 ,000 -1476,9771 -1460,3562 -1987,00000* 3,72976 ,000 -1995,3104 -1978,6896 -1473,00000* 3,72976 ,000 -1481,3104 -1464,6896 -865,33333* 3,72976 ,000 -873,6438 -857,0229 1468,66667* 3,72976 ,000 1460,3562 1476,9771 -518,33333* 3,72976 ,000 -526,6438 -510,0229 -4,33333 3,72976 ,272 -12,6438 3,9771 79 -12,7746 ,7746 ngay9 LSD ngay10 LSD 603,33333* 3,72976 ,000 595,0229 611,6438 1987,00000* 3,72976 ,000 1978,6896 1995,3104 518,33333* 3,72976 ,000 510,0229 526,6438 514,00000* 3,72976 ,000 505,6896 522,3104 1121,66667* 3,72976 ,000 1113,3562 1129,9771 1473,00000* 3,72976 ,000 1464,6896 1481,3104 4,33333 3,72976 ,272 -3,9771 12,6438 -514,00000* 3,72976 ,000 -522,3104 -505,6896 607,66667* 3,72976 ,000 599,3562 615,9771 865,33333* 3,72976 ,000 857,0229 873,6438 -603,33333* 3,72976 ,000 -611,6438 -595,0229 -1121,66667* 3,72976 ,000 -1129,9771 -1113,3562 -607,66667* 3,72976 ,000 -615,9771 -599,3562 -1015,00000* 3,26599 ,000 -1022,2771 -1007,7229 -1659,66667* 3,26599 ,000 -1666,9437 -1652,3896 -1020,00000* 3,26599 ,000 -1027,2771 -1012,7229 -217,66667* 3,26599 ,000 -224,9437 -210,3896 1015,00000* 3,26599 ,000 1007,7229 1022,2771 -644,66667* 3,26599 ,000 -651,9437 -637,3896 -5,00000 3,26599 ,157 -12,2771 2,2771 797,33333* 3,26599 ,000 790,0563 804,6104 1659,66667* 3,26599 ,000 1652,3896 1666,9437 644,66667* 3,26599 ,000 637,3896 651,9437 639,66667* 3,26599 ,000 632,3896 646,9437 1442,00000* 3,26599 ,000 1434,7229 1449,2771 1020,00000* 3,26599 ,000 1012,7229 1027,2771 5,00000 3,26599 ,157 -2,2771 12,2771 -639,66667* 3,26599 ,000 -646,9437 -632,3896 802,33333* 3,26599 ,000 795,0563 809,6104 217,66667* 3,26599 ,000 210,3896 224,9437 -797,33333* 3,26599 ,000 -804,6104 -790,0563 -1442,00000* 3,26599 ,000 -1449,2771 -1434,7229 -802,33333* 3,26599 ,000 -809,6104 -795,0563 -450,66667* 3,72380 ,000 -458,9638 -442,3695 80 ngay11 LSD -547,66667* 3,72380 ,000 -555,9638 -539,3695 -904,00000* 3,72380 ,000 -912,2971 -895,7029 -131,33333* 3,72380 ,000 -139,6305 -123,0362 450,66667* 3,72380 ,000 442,3695 458,9638 -97,00000* 3,72380 ,000 -105,2971 -88,7029 -453,33333* 3,72380 ,000 -461,6305 -445,0362 319,33333* 3,72380 ,000 311,0362 327,6305 547,66667* 3,72380 ,000 539,3695 555,9638 97,00000* 3,72380 ,000 88,7029 105,2971 -356,33333* 3,72380 ,000 -364,6305 -348,0362 416,33333* 3,72380 ,000 408,0362 424,6305 904,00000* 3,72380 ,000 895,7029 912,2971 453,33333* 3,72380 ,000 445,0362 461,6305 356,33333* 3,72380 ,000 348,0362 364,6305 772,66667* 3,72380 ,000 764,3695 780,9638 131,33333* 3,72380 ,000 123,0362 139,6305 -319,33333* 3,72380 ,000 -327,6305 -311,0362 -416,33333* 3,72380 ,000 -424,6305 -408,0362 -772,66667* 3,72380 ,000 -780,9638 -764,3695 -244,00000* 2,76486 ,000 -250,1605 -237,8395 -349,66667* 2,76486 ,000 -355,8272 -343,5062 -440,66667* 2,76486 ,000 -446,8272 -434,5062 -213,33333* 2,76486 ,000 -219,4938 -207,1728 244,00000* 2,76486 ,000 237,8395 250,1605 -105,66667* 2,76486 ,000 -111,8272 -99,5062 -196,66667* 2,76486 ,000 -202,8272 -190,5062 30,66667* 2,76486 ,000 24,5062 36,8272 349,66667* 2,76486 ,000 343,5062 355,8272 105,66667* 2,76486 ,000 99,5062 111,8272 -91,00000* 2,76486 ,000 -97,1605 -84,8395 136,33333* 2,76486 ,000 130,1728 142,4938 440,66667* 2,76486 ,000 434,5062 446,8272 196,66667* 2,76486 ,000 190,5062 202,8272 91,00000* 2,76486 ,000 84,8395 97,1605 81 5 227,33333* 2,76486 ,000 221,1728 233,4938 213,33333* 2,76486 ,000 207,1728 219,4938 -30,66667* 2,76486 ,000 -36,8272 -24,5062 -136,33333* 2,76486 ,000 -142,4938 -130,1728 -227,33333* 2,76486 ,000 -233,4938 -221,1728 * The mean difference is significant at the 0.05 level 82 ... để ni cấy chủng tảo Chaetoceros pseudo- curvisetus 29 - Nghiên cứu xác định độ mặn thích hợp để ni cấy chủng tảo Chaetoceros pseudo- curvisetus - Nghiên cứu điều kiện pH thích hợp để nuôi cấy chủng. .. đề tài ? ?Nghiên cứu xác định điều kiện thích hợp để nuôi trồng chủng tảo Chaetoceros pseudocurvisetus” Mục tiêu đề tài Xác định môi trường nuôi, độ mặn, pH, mật độ ban đầu, thời gian tảo phát... hợp để nuôi cấy chủng tảo Chaetoceros pseudocurvisetus - Nghiên cứu xác định mật độ ban đầu thích hợp để ni cấy chủng tảo Chaetoceros pseudo- curvisetus 2.3 Phương pháp nghiên cứu 2.3.1 Phương pháp