Xác định điều kiện tối ưu trong sản xuất nấm trichoderma atroviride (karst )

i BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO TRƯỜNG ĐẠI HỌC VINH  XÁC ĐỊNH ĐIỀU KIỆN TỐI ƯU TRONG SẢN XUẤT NẤM Trichoderma atroviride (Karst.) TRÊN MƠI TRƯỜNG RẮN KHĨA LUẬN TỐT NGHIỆP KỸ SƯ NÔNG HỌC Sinh viên thực : Phạm Danh Toại Lớp : 49K – Nông học Người hướng dẫn : Th.S Hồ Thị Nhung Nghệ An, 05 / 2012 ii LỜI CAM ĐOAN Thực tập tốt nghiệp thời gian để người sinh viên có điều kiện rèn luyện tính tự lực, độc lập suy nghĩ, bổ sung kiến thức mẻ từ thực tiễn, nâng cao trình độ lý luận chun mơn Tiếp tục rèn luyện đạo đức tác phong, quan điểm phục vụ người cán khoa học kỹ thuật Để hoàn thành luận văn tơi xin cam đoan: Trong q trình nghiên cứu, thân ln nhiệt tình với cơng việc Số liệu kết nghiên cứu luận văn trung thực Kết nghiên cứu thân có nhờ giúp đỡ tận tình giảng viên hướng dẫn THs.Hồ Thị Nhung, Ts.Nguyễn Thị Thanh giảng viên tổ Bảo vệ thực vật Mọi giúp đỡ cho việc thực khóa luận cảm ơn thơng tin trich dẫn khóa luận rõ nguồn gốc Vinh, ,ngày tháng Tác giả luận văn Phạm Danh Toại năm iii LỜI CẢM ƠN Trong suốt q trình tiến hành làm khóa luận tốt nghiệp ngành kỹ sư Nông học, nhận nhiều giúp đỡ q báu từ phía thầy giáo, bạn bè, người thân… Với lòng chân thành biết ơn sâu sắc nhất, xin gửi lời cảm ơn Ts Nguyễn Thị Thanh, Ths Hồ Thị Nhung người dìu dắt hướng dẫn cho từ bước làm quen với nghiên cứu khoa học, người tận tâm nhiệt tình hướng dẫn tơi suốt thời gian làm đề tài khóa luận tốt nghiệp Tơi xin gửi lời cảm ơn chân thành đến thầy cô giáo tổ môn Bảo vệ thực vật, giáo viên phụ trách, kỹ thuật viên phịng thí nghiệm tạo điều kiện sở vật chất hướng dẫn, giúp đỡ góp ý kiến cho tơi suốt q trình làm đề tài Xin gửi lời cảm ơn đến người thân gia đình, họ hàng tất bạn bè, người có hỗ trợ thiết thực cho mặt tinh thần, vật chất công sức để tơi hồn thành tốt đề tài khóa luận Xin chân thành cảm ơn Vinh, ngày tháng năm Phạm Danh Toại iv MỤC LỤC MỞ ĐẦU i Tính cấp thiết đề tài ix Mục tiêu nghiên cứu xi Nội dung nghiên cứu xi Ý nghĩa thực tiễn khoa học đề tài xi CHƯƠNG I TỔNG QUAN TÀI LIỆU xii 1.1 Đặc điểm sinh học, sinh thái nấm Trichoderma xii 1.2 Ứng dụng Trichoderma phòng trừ bệnh hại trồng nấm mốc hại lạc A flavus xv 1.2.1 Tình hình nghiên cứu Trichoderma giới xv 1.2.2 Tình hình nghiên cứu Trichoderma Việt Nam xvi 1.3.Nhân sinh khối vi nấm Trichoderma xviii 1.3.1 Dinh dưỡng vi sinh vật xviii 1.3.2 Nhân nuôi sinh khối nấm môi trường lỏng xix 1.3.3 Nhân nuôi sinh khối nấm môi trường rắn xx CHƯƠNG II: ĐỐI TƯỢNG, VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU xxii 2.1 Quy trình nghiên cứu xxii Sơ đồ quy trình nghiên cứu xxii 2.2 Thời gian địa điểm nghiên cứu xxii 2.3 Đối tượng vật liệu nghiên cứu xxii 2.4 Phương pháp nghiên cứu xxiii 2.4.1 Bố trí thí nghiệm xxiii 2.4.2 Phương pháp xác định số lượng bào tử/gam chất môi trường rắn xxiv 2.4.2.1 Phương pháp pha loãng xxiv 2.4.2.2 Phương pháp đếm bào tử buồng đếm hồng cầu xxv 2.5.Phương pháp thu thập xử lý số liệu: xxv CHƯƠNG III KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU VÀ THẢO LUẬN xxvi v 3.1 Đặc điểm hình thái khả đối kháng chủng nấm T atroviride xxvi 3.1.1 Đặc điểm hình thái T atroviride xxvi 3.1.2 Khả đối kháng T atroviride (T2) với loài nấm bệnh xxvi 3.2 Ảnh hưởng tỷ lệ chất đến khả phát triển hình thành bào tử T atroviride xxvii 3.2.1 Ảnh hưởng tỷ lệ cám gạo đến khả phát triển hình thành bào tử T atroviride xxviii 3.2.2 Ảnh hưởng tỷ lệ cám vỏ lạc đến khả phát sinh bào tử T atroviride xxx 3.2.3 Ảnh hưởng tỷ lệ nước/cơ chất đến khả phát triển hình thành bào tử T atroviride xxxii 3.3 Ảnh hưởng yếu tố điều kiện ngoại cảnh đến khả phát triển hình thành bào tử T atroviride xxxv 3.3.1 Ảnh hưởng mức nhiệt độ đến khả phát triển T atroviridexxxv 3.3.1.1 Ảnh hưởng cảu mức nhiệt độ đến khả phát triển T atroviride môi trường PDA xxxv 3.3.1.2 Ảnh hưởng nhiệt độ đến khả phát triển hình thành bào tử T atroviride mơi trường rắn xxxvi 3.3.2 Ảnh hưởng thời gian chiếu sáng đến khả phát sinh bào tử T atroviride xxxix 3.3.3 Thời gian thu hồi sinh khối nấm tốt xli 3.4 Hồn thiện quy trình sản xuất sinh khối từ nấm đối kháng Trichoderma atroviride xlii CHƯƠNG IV.KẾT LUẬN VÀ KIẾN NGHỊ xliii 4.1 Kết luận xliii 4.2 Kiến nghị xliii TÀI LIỆU THAM KHẢO xliv vi CHỨ CÁI VIẾT TẮT PDA Potato dextrose agar PDB Potato dextrose broth TB Trung bình T atroviride Trichoderma atroviride YEA Yeast extract agar MEA Malt extract agar YMA Yeast malt agar PYG Peptone yeast glucose agar YEB Yeast extract broth MEB Malt extract broth YMB Yeast malt broth PYGB Peptone yeast glucose broth DCGRH Defatted Corn Germ - Rice Husk SSF Solid state fermentation vii DANH MỤC CÁC BẢNG Bảng 3.1 Khả đối kháng T atroviride loài nấm bệnh xxvi Bảng 3.2 Khả phát triển T atroviride mức cám gạo khác xxviii Bảng 3.3 Nồng độ bào tử T atroviride mức cám gạo khác xxix Bảng 3.4 Khả phát triển T atroviride mức cám vỏ lạc khác xxx Bảng 3.5 Nồng độ bào tử T.atroviride mức cám vỏ lạc khác xxxi Bảng 3.6 Khả phát triển nấm T atroviride tỷ lệ nước/cơ chất khác nhauxxxiii Bảng 3.7 Khả hình thành bào tử T atroviride xxxiii tỉ lệ nước khác xxxiii Bảng 3.8 Đường kính tản nấm T atroviride môi trường PDA mức nhiệt độ khác xxxv Bảng 3.9 Khả phát triển nấm T atroviride xxxvii mức nhiệt độ khác xxxvii Bảng 3.10 Nồng độ bào tử T atroviride môi trường rắn xxxvii mức nhiệt độ khác xxxvii Bảng 3.11 Khả phát triển T atroviride mức xxxix Bảng 3.12 Nồng độ bào tử T.atroviride mức chiếu sáng khác xxxix Bảng 3.13 Nồng độ bào tử T atroviride sau ngày nuôi cấy điều kiện tối ưu xli viii DANH MỤC CÁC HÌNH Hình 3.1 Khuẩn lạc (a), bào tử (b) cành bào tử phân sinh (c) T atroviride môi trường PDA sau ngày xxvi Hình 3.2 Khả đối kháng T atroviride loài nấm bệnh: A niger (a), A flavus (b), S rolfsii (c) sau ngày xxvii Hinh 3.3 Nồng độ bào tử T atroviride mức cám gạo khác xxix Hình 3.4 Nồng độ bào tử T.atroviride mức cám vỏ lạc khác xxxi Hình3.5 Khả hình thành bào tử T atroviride tỉ lệ nước khác nhauxxxiv Hình 3.6 Đường kính tản nấm T atroviride môi trường PDA mức nhiệt độ khác xxxv Hình 3.7 Sự phát triển T atroviride mức nhiệt độ khác xxxvi Hình 3.8 Nồng độ bào tử T atroviride môi trường rắn mức nhiệt độ khác xxxviii Hình 3.10 Nồng độ bào tử T atroviride sau ngày nuôi cấy điều kiện tối ưu xli Hình 3.11 Hồn thiện quy trình nhân sinh khối nấm đối kháng T atroviride môi trường xlii Hình 3.9 Nồng độ bào tử T atroviride mức chiếu sáng khác xl ix MỞ ĐẦU Tính cấp thiết đề tài Hiện nay, có khoảng 30% loài thực vật bị phá hủy tác nhân gây bệnh trồng (Merih KIVANÇ, 2002) [23] sản xuất nông nghiệp Trong đất, sinh vật gây bệnh đặc biệt nấm, gây thiệt hại nghiêm trọng Các tác nhân gây bệnh như: Aspergillus, Pythium, Phytopthora, Botrytis, Rhizoctonia, Fusarium Meloidogyne lây lan nhanh tác động có hại trồng có tầm quan trọng kinh tế Sự đời loại thuốc hóa học tác dụng nhanh đồng thời gây ô nhiễm môi trường ảnh hưởng 100 lồi sinh vật khơng phải sinh vật mục tiêu Mặt khác, số thuốc trừ sâu có hiệu bị cấm sử dụng nông nghiệp Do đó, để giảm bớt việc sử dụng hóa chất sản xuất nơng nghiệp biện pháp sinh học cần áp dụng tăng cường Trong đó, tận dụng khả đàn áp (đối kháng) số vi sinh vật cần đánh giá cao để đối kháng lại tác nhân gây bệnh truyền qua đất đến trồng mục tiêu, gọi tác nhân kiểm sốt sinh học (biocontrol) cơng thức thương mại chúng thuốc trừ bệnh sinh học (biopesticides) Việt Nam đất nước nhiệt đới có khí hậu nóng ẩm điệu kiện thuận lợi cho phát sinh, phát triển nấm mốc gây bệnh trồng Aspergillus độc tố Aflatoxin Aflatoxin độc tố vi nấm sản sinh tự nhiên số loài Aspergillus, đáng ý Aspergillus flavus Aspergillus parasiticus Aflatoxin độc tố tác nhân gây ung thư Sau thâm nhập vào thể, aflatoxin gan chuyển hóa thành dạng trung gian epoxit hoạt hóa thuỷ phân trở thành M1 độc Có loại Aflatoxin, độc Aflatoxin B1 (AFB1),nó có khả gây hại với liều lượng nhỏ, kg thức ăn cần nhiễm miligam đủ làm hỏng gan Độc chất lại bền vững với nhiệt, đem đun sơi 100oC nồi bình thường nhiệt độ cao nồi áp suất Aflatoxin khơng bị phân huỷ Nguy hiểm với điều kiện nóng ẩm nước ta nấm x mốc diện gần khắp nơi, nông sản (ngô, lạc, vừng, đậu tương…), thực phẩm khả tiết Aflatoxin cao Ở Việt Nam, tiêu chuẩn thực phẩm dùng cho người có hàm lượng aflatoxin không vượt 10ppb Theo điều tra Trung tâm y tế dự phòng TP HCM thấy hàm lượng Aflatoxin lạc cao gấp 263 lần ngưỡng cho phép Khảo sát Viện NC Dầu Thực vật cho kết 11 mẫu thử có mẫu nhiễm Aflatoxin với hàm lượng từ 20 – 112 mg/kg (gấp đến 11 lần ngưỡng cho phép) Theo Viện Vệ sinh Y tế công cộng TP HCM sau tiến hành kiểm nghiệm 115 mẫu thực phẩm lưu hành thị trường mẫu sở sản xuất mang tới kiểm nghiệm, kết cho thấy có 30% mẫu cafe, 43% mẫu nước tương, 67% mẫu đồ hộp chay, 68% mẫu lạc sản phẩm từ lạc chứa độc tố aflatoxin B1 Kết khảo sát phân tích 243 mẫu ngô, lạc sản phẩm chế biến thức ăn gia súc xã huyện Tân Kỳ, Nghệ An tháng 6/2002, phát mức độ nguy nhiễm aflatoxin cao, 90% mẫu lạc, ngơ lấy từ hộ gia đình bảo quản bị nhiễm độc tố tỷ lệ vượt giới hạn cho phép hàm lượng AF có thực phẩm Bộ Y tế 23% (56/ 243 mẫu) (Phan Thị Kim cs 2002) [2] Độc tố AF cịn rào cản an tồn lương thực, thực phẩm, nông sản xuất khẩu, Cộng đồng Châu Âu cho phép giới hạn tối đa 2ppb (aflatoxin B1) 4ppb (aflatoxin tổng số) Đây trở ngại lớn cho phát triển nơng nghiệp hàng hóa xuất lạc Việt Nam, đặc biệt Nghệ An Trên giới, nghiên cứu ứng dụng nấm đối kháng Trichoderma để kiểm soát Aspergillus spp cạnh tranh sinh học quan tâm Nấm Trichoderma spp diện gần tất loại đất số môi trường sống khác Chúng công, ký sinh lấy chất dinh dưỡng từ loài nấm khác Bởi Trichoderma phát triển tốt vùng nhiều rễ khỏe mạnh, Trichoderma sở hữu nhiều chế cho việc cơng lồi nấm gây bệnh chế cho đẩy mạnh sinh trưởng phát triển Trichoderma có khả loại trừ loại nấm bệnh cạnh tranh sinh học thong qua chế như: Ký sinh nấm, kháng sinh, cạnh tranh dinh dưỡng không gian; chịu đựng điều kiện bất lợi việc gia tăng phát lxxi 213.100A 111.200 B 3.100C Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.7572 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison1.7461 Error term used: CT*LL, DF All means are significantly different from one another SAU 11 NGAY: Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/3/2012, 1:20:47 PM Analysis of Variance Table for NDBT Source DFSSMS FP CT2 107.233 53.6167 61.87 0.0000 LL4 6.1671.54171.78 0.2262 Error 6.9330.8667 Total14 120.333 Grand Mean 5.6667CV 16.43 Tukey's Degree of Freedom Test for Nonadditivity Source DFSSMS FP Nonadditivity 1.71254 1.712542.30 0.1735 Remainder 5.22080 0.74583 Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/3/2012, 1:21:26 PM LSD All-Pairwise Comparisons Test of NDBT for CT CTMeanHomogeneous Groups 28.3000A 16.7000 B 32.0000C Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.5888 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison1.3577 Error term used: CT*LL, DF lxxii All means are significantly different from one another SAU 13 NGAY: Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/3/2012, 1:26:55 PM Analysis of Variance Table for NDBT Source DFSSMS FP CT2 53.6333 26.8167 84.68 0.0000 LL42.56670.64172.03 0.1834 Error 82.53330.3167 Total14 58.7333 Grand Mean 3.4667CV 16.23 Tukey's Degree of Freedom Test for Nonadditivity Source DFSSMS FP Nonadditivity 0.03908 0.039080.11 0.7502 Remainder 2.49425 0.35632 Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/3/2012, 1:28:44 PM LSD All-Pairwise Comparisons Test of NDBT for CT CTMeanHomogeneous Groups 25.4000A 14.1000 B 30.9000C Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.3559 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison0.8207 Error term used: CT*LL, DF All means are significantly different from one another 1.ket qua ngien cuu nhiet tren PDA: SAU NGAY: Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:29:20 AM Analysis of Variance Table for NDBT Source DFSSMS FP lxxiii CT2 1.37545 0.68773 43.50 0.0001 LL4 0.19684 0.049213.11 0.0804 Error 0.12648 0.01581 Total14 1.69877 Grand Mean 2.3587CV 5.33 Tukey's Degree of Freedom Test for Nonadditivity Source DFSSMS FP Nonadditivity 0.02142 0.021421.43 0.2712 Remainder 0.10506 0.0150 Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:30:23 AM LSD All-Pairwise Comparisons Test of NDBT for CT CTMeanHomogeneous Groups 22.6460A 32.4900A 11.9400 B Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.0795 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison0.1834 Error term used: CT*LL, DF There are groups (A and B) in which the means are not significantly different from one another SAU NGAY: Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:37:21 AM Analysis of Variance Table for NDBT Source DFSSMSFP CT2 31.1523 15.5762 145.01 0.0000 LL42.22070.5552 5.17 0.0235 Error 80.85930.1074 Total14 34.2323 Grand Mean 6.5367CV 5.01 lxxiv Tukey's Degree of Freedom Test for Nonadditivity Source DFSSMS FP Nonadditivity 0.01650 0.016500.14 0.7222 Remainder 0.84283 0.12040 Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:38:13 AM LSD All-Pairwise Comparisons Test of NDBT for CT CTMeanHomogeneous Groups 28.3000A 16.5400 B 34.7700C Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.2073 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison0.4780 Error term used: CT*LL, DF All means are significantly different from one another SAU NGAY: Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:42:33 AM Analysis of Variance Table for NDBT Source DFSSMS FP CT2 35.6123 17.8062 94.38 0.0000 LL41.16070.29021.54 0.2797 Error 81.50930.1887 Total14 38.2823 Grand Mean 7.0633CV 6.15 Tukey's Degree of Freedom Test for Nonadditivity Source DFSSMS FP Nonadditivity 1.16871 1.16871 24.02 0.0018 Remainder 0.34062 0.04866 Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:43:19 AM LSD All-Pairwise Comparisons Test of NDBT for CT lxxv CTMeanHomogeneous Groups 29.0000A 16.9600 B 35.2300C Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.2747 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison0.6335 Error term used: CT*LL, DF All means are significantly different from one another SAU NGAY: Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:47:19 AM Analysis of Variance Table for NDBT Source DFSSMS FP CT2 28.3963 14.1982 75.54 0.0000 LL41.09430.27361.46 0.3013 Error 81.50370.1880 Total14 30.9943 Grand Mean 7.3267CV 5.92 Tukey's Degree of Freedom Test for Nonadditivity Source DFSSMS FP Nonadditivity 1.28063 1.28063 40.19 0.0004 Remainder 0.22303 0.03186 Statistix - 30 Day Trial Version 9.0 5/4/2012, 4:48:22 AM LSD All-Pairwise Comparisons Test of NDBT for CT CTMeanHomogeneous Groups 29.0000A 17.3500 B 35.6300C lxxvi Alpha0.05 Standard Error for Comparison0.2742 Critical T Value2.306 Critical Value for Comparison0.6323 Error term used: CT*LL, DF All means are significantly different from one another 2.Phiếu theo dõi: Tỷ lệ cám gạo Công thức ngày CT1 0.5*10 1.5*107 3.5*107 4*107 ngày 11 ngày 13 ngày 6*107 5*107 107 7.5*107 6.5*107 2*107 80 cám gạo + 30 cám vỏ lạc + 30 g vỏ 1.5*107 2*107 trấu)  Cơ chất/Nước: 1/1,25  Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 30  TB CT2 1.5*107 2.5*107 2.5*107 6.5*107 6*107 1.5*107 2*107 1.5*107 3*107 5.5*107 6*107 2.5*107 2*107 3.5*107 7*107 7*107 3*107 3.3*107 6.5*107 6.1*107 2*107 4*107 6*107 6.5*107 6.5*107 6.5*107 2.5*107 5.5*107 *107 5*107 5*107 4.5*107 5*107 5.5*107 7.5*107 *107 2.5*107 6*107 5.5*107 4.5*107 4.5*107 2.5*107 6.5*107 7.5*107 6*107 2*107 1.5*10 1.4*107 1.9*107 1.5*10 60 cám gạo + 30 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  1.5*10 Cơ chất/Nước: 1/1,25  1.5*10 Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 30  3.5*10 15 ngày lxxvii 2.5*107 2.1*107 3.2*107 TB CT3 5.8*107 6.2*107 5.9*107 4*107 8*107 12*107 12.5*107 5*107 4*107 *107 15.5*107 14*107 3.5*107 6*107 17.5*107 15.5*107 2.5*107 4.5*107 8*107 16*107 15.5*107 3.5*107 3*107 8*107 18*107 15*107 3.8*107 7.8*107 107 4.2*107 (40 cám gạo + 30 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  2.5*10 Cơ chất/Nước: 1/1,25  1.5*10 Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 30  2.5*10 2.5*10 2*107 TB 15.8*10 5,5*107 5*107 14.5*107 4.3*107 Tỷ lệ cám vỏ lạc Công thức ngày CT1 ngày 11 ngày 13 ngày *107 *107 14*107 10 *107 *107 2.5*107 3*107 5.5*107 12.5*107 8.5*107 5*107 1.5*107 3.5*107 6*107 12*107 6.5*107 5.5*107 1.5 *10 40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  Cơ chất/Nước: 15 ngày lxxviii 1/1,25  Ánh sáng: 12 tối/12 2.5*107 5*107 4*107 13.5*107 9*107 5*107 2*107 5*107 8*107 13.5*107 7.5*107 5.5*107 2*107 4.1*107 6.3*107 13.1*107 8.3*107 5.4*107 3*107 3.5*107 8.5*107 6.5*107 6.5*107 2.5*107 5.5*107 *107 5*107 5*107 2.5*107 5*107 7.5*107 7.5*107 5.5 *107 2*107 4.5*107 9.5*107 4.5*107 4.5*107 1.5*107 6.5*107 11*107 6*107 3.5*107 sáng  Nhiệt độ: 30  TB CT2 0.5*10 40 cám gạo + 30 cám vỏ lạc + 30 g vỏ 1.5*10 trấu)  Cơ chất/Nước: 1/1,25  1.5*10 Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  0.5*10 Nhiệt độ: 30  2.5*10 TB 1.3*107 2.3*107 5*107 8.5*107 5.9*107 5*107 CT3 107 3.5*107 5.5*107 12*107 7.5*107 5*107 4*107 6.5 *107 13*107 6*107 5,5*107 3.5*107 6*107 10*107 5*107 2.5*107 (40 cám gạo + 20 cám vỏ lạc + 30 g vỏ 0.5*10 trấu)  Cơ chất/Nước: 1.5*10 lxxix 1/1,25  Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  4.5*107 6*107 11.5*107 7.5*107 3.5*107 3*107 5*107 15*107 5*107 5*107 3.7*107 5.8*107 12,3*107 6,2*107 4.3*107 2.5*10 Nhiệt độ: 30  TB 2.5*10 1.6*107 Nhiệt độ Công thức ngày CT1 ngày 11 ngày 13 ngày *107 *107 10*107 *107 4.5 *107 2*107 2.5*107 5*107 11.5*107 8.5*107 3.5*107 1*107 2*107 6*107 12*107 6.5*107 5.5*107 1*107 3.5*107 4*107 13.5*107 6*107 4*107 1*107 2.5*107 7.5*107 9*107 5.5*107 3*107 1.1*107 2.5*107 5.5*107 11.2*107 6.7*107 4.1*107 *107 *107 14*107 10 *107 *107 3*107 5.5*107 12.5*107 8.5*107 5*107 0.5 *10 40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu) Cơ chất/Nước: 1/1,25  Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 25 TB CT2 1.5 *10 40 cám gạo + 40cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu) 2.5*107 15 ngày lxxx Cơ chất/Nước: 1/1,25  Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 30  TB 1.5*107 3.5*107 6*107 12*107 6.5*107 5.5*107 2.5*107 5*107 4*107 13.5*107 9*107 5*107 2*107 5*107 8*107 13.5*107 7.5*107 5.5*107 2*107 4.1*107 6.3*107 13.1*107 8.3*107 5.4*107 0.5 *107 0.5*107 3.5*107 *107 107 107 1.5*107 107 3*107 2.5*107 0.5*107 0.5*107 0.5*107 107 3.5*107 2*107 107 1.5*107 2*107 3*107 1.5*107 1.5*107 0.5*107 1.5*107 2.5*107 2*107 0.5*107 0.9*107 1.2*107 3.1*107 2*107 0.9*107 CT3 v(40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu) Cơ chất/Nước: 1/1,25  Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 35 0.5*10 TB 0.4*107 lxxxi Ánh sáng Công thức CT1 ngày ngày 11 ngày 13 ngày *107 *107 7.5*107 15*107 10 *107 *107 107 2.5*107 8*107 14*107 8.5*107 4.5*107 1.5*107 4.5*107 6*107 13.5*107 6.5*107 5.5*107 2.5*107 3.5*107 6*107 11*107 9*107 3.5*107 2*107 3.5*107 6*107 10.5*107 7.5*107 5.5*107 1.8*107 3.4*107 6.7*107 12.8*107 8.3*107 5*107 2.5*107 7.5*107 11*107 13.5*107 9.5*107 7.5*107 4*107 8*107 10*107 17.5*107 7*107 7*107 8*107 14*107 15*107 9.5*107 6*107 6*107 12*107 11*107 9.5*107 4.5*107 40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  Cơ chất/Nước: 1/1,25  Ánh sáng: 24h tối Nhiệt độ: 30  TB CT2 v40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu) Cơ chất/Nước: 1/1,25  2.5*10 Ánh sáng: 12h sáng/12h tối  2*107 15 ngày lxxxii Nhiệt độ: 30  TB CT3 3.5*10 6*107 2.9*107 7.1*107 0.5*107 *107 2*107 1.5*107 14*107 12.5*107 11.5*10 5*107 13.9*107 9.4*107 6*107 *107 12*107 *107 *107 3*107 7.5*107 15*107 8.5*107 5*107 3.5*107 6*107 14*107 6.5*107 5.5*107 5*107 5.5*107 13.5*107 7.5*107 5*107 5*107 8*107 10*107 7.5*107 5.5*107 4.1*107 7*107 12.9*107 7.8*107 5.4*107 12.2*10 (40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  Cơ chất/Nước: 1/1,25  Ánh 0.5*107 sáng: 24h sáng  Nhiệt độ: 30  TB 1.5*10 1.2*107 Nước Công thức CT1 ngày ngày 11 ngày 13 ngày 2*107 7.5*107 15*107 20.5*107 12.5*107 8*107 3.5*107 9.5*107 14*107 21.5*107 15*107 3*107 16.5*107 22*107 40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 10*107 g vỏ trấu)  Cơ chất/Nước: 1/1  8.5*107 15.5*107 8.5*107 15 ngày lxxxiii Ánh sáng: 12 tối/12 4*107 7.5*107 14.5*107 23*107 11*107 6*107 7*107 13*107 13*107 9*107 8.2*107 14.6*107 22.4*107 13.4*107 8.3*107 4.5*107 9*107 15*107 7*107 9.5*107 13.5*107 9*107 7*107 4.5*107 7*107 12.5*107 7.5*107 6*107 3.5*10 6*107 8*107 13*107 9.5*107 4.5*107 2.5*10 5*107 8.5*107 14*107 10*107 5.5*107 5.4*107 8.4*107 13.6*107 9.2*107 5.9*107 *107 *107 14*107 10 *107 *107 2.5*107 3*107 5.5*107 12.5*107 8.5*107 5*107 1.5*107 3.5*107 6*107 12*107 6.5*107 5.5*107 sáng  Nhiệt độ: 30  TB CT2 2.5*10 3*107 1.5*10 1.5*10 25*107 10*107 6.5*107 40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  Cơ chất/Nước: 1*107 1/1,50 Ánh sáng: 12 tối/12 sáng  Nhiệt độ: 30  TB CT3 2*107 1.5 *10 (40 cám gạo + 40 cám vỏ lạc + 30 g vỏ trấu)  Cơ chất/Nước: lxxxiv 1/1,25 Ánh sáng: 12 tối/12 2.5*107 5*107 4*107 9*107 5*107 2*107 5*107 8*107 13.5*107 7.5*107 5.5*107 2*107 4.1*107 6.3*107 13.1*107 8.3*107 5.4*107 sáng  Nhiệt độ: 30  TB lxxxv ... đề: ? ?Xác định điều kiện tối ưu sản xuất nấm Trichoderma atroviride môi trường rắn” Mục tiêu nghiên cứu Đề tài nghiên cứu tiến hành nhằm tìm loại môi trường tối ưu, điều kiện ngoại cảnh tối ưu thời... xxvii (a ) (b ) (c ) Hình 3.2 Khả đối kháng T atroviride loài nấm bệnh: A niger (a), A flavus (b), S rolfsii (c) sau ngày Qua bảng số liệu 3.1ta thấy khả đối kháng T .atroviride (T 2) loài nấm bệnh... bảng 3.13 Bảng 3.13 Nồng độ bào tử T atroviride sau ngày nuôi cấy điều kiện tối ưu Nồng độ bào tử T .atroviride điều kiện tối ưu qua ngày theo dõi (đơn vị: cfu/g) 3,00x107 8,20x107 ngày 14,60x107