Nghiên cứu phối tạo công thức pha chế thuốc tiêm đông khô carboplatin 50mg lọ dùng điều trị ung thư

1 B GIÁO D C VÀ ĐÀO T O Đ I H C ĐÀ N NG LÊ NG C V NH NGHIÊN C U PH I T O CÔNG TH C PHA CH THU C TIÊM ĐÔNG KHÔ CARBOPLATIN 50MG/L DÙNG ĐI U TR UNG THƯ Chuyên ngành: Hóa h u Mã s : 60.44.27 TÓM T T LU N VĂN TH C SĨ KHOA H C Đà N ng - 2011 Cơng trình đư c hồn thành t i Đ I H C ĐÀ N NG - Ngư i hư ng d n khoa h c: GS.TS Đào Hùng Cư ng Ph n bi n 1: PGS.TS.Ph m Văn Hai Ph n bi n 2: PGS.TS.Tr n Văn Th ng Lu n văn s ñư c b o v trư c H i ñ ng b o v ch m Lu n văn t t nghi p Th c sĩ khoa h c h p t i Đ i h c Đà N ng vào ngày 27 tháng 08 năm 2011 Có th tìm hi u Lu n văn t i: - Trung tâm Thông tin - H c li u - Đ i h c Đà N ng - Thư vi n trư ng Đ i h c Sư ph m - Đ i h c Đà N ng M Đ U LÝ DO CH N Đ TÀI Đơng khơ (lyophilization) hay cịn g i làm khô thăng hoa, m t phương pháp làm khơ đư c áp d ng nhi u hi n lĩnh v c th c ph m dư c ph m Trong bào ch thu c, cơng ngh đơng khơ ph bi n t i m t s nư c, ñ c bi t ñ i v i s n ph m b n v i nhi t, s n ph m b n dung d ch b o qu n th i gian dài Vi t Nam hi n lĩnh v c dư c ph m ch có vài cơng ty cơng ty Dư c Phú Yên, công ty Dư c Vĩnh Phúc b t đ u tri n khai cơng ngh ñông khô s n xu t nên không ñ ñáp ng ñư c nhu c u s d ng ch ph m đơng khơ ngày m t tăng Các ch ph m paraplatin, carboplatin teva d ng thu c tiêm đơng khơ hi n đ u nh p t nư c Vi c tri n khai áp d ng cơng ngh đơng khơ vào nghiên c u s n xu t thu c nh m ñáp ng cho nhu c u ñi u tr nư c, thay th d n thu c nh p ngo i Do tơi ch n đ tài: “Nghiên c u ph i t o công th c pha ch thu c tiêm đơng khơ Carboplatin 50 mg/l dùng ñi u tr ung thư” M C ĐÍCH NGHIÊN C U Xác đ nh hàm lư ng thích h p nh t c a tá dư c ñ ph i t o v i ho t ch t nh m t o thu c tiêm đơng khơ Carboplatin ñ t tiêu chu n s dùng ñ ch a b nh ung thư Đ I TƯ NG VÀ PH M VI NGHIÊN C U 3.1 Đ i tư ng nghiên c u: Thu c tiêm ñông khô carboplatin, th c hi n t i Công ty Dư c trang thi t b Y t Bình Đ nh 3.2 Ph m vi nghiên c u: Nghiên c u ph i t o công th c pha ch thu c tiêm đơng khơ Carboplatin 50mg/l dùng ñi u tr ung thư PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN C U 4.1 Tham kh¶o tài li u có liên quan 4.2 Ch n thành ph n tá dư c d a th c nghi m Ý NGHĨA KHOA H C VÀ TH C TI N C A Đ TÀI T o công th c thu c tiêm đơng khơ Carboplatin dùng u tr b nh ung thư C U TRÚC C A LU N VĂN Ngồi ph n m đ u, k t lu n tài li u tham kh o, lu n văn g m có chương sau : Chương T NG QUAN TÀI LI U Chương NH NG NGHIÊN C U TH C NGHI M Chương K T QU Chương T NG QUAN TÀI LI U 1.1 T NG QUAN V K THU T ĐÔNG KHÔ 1.1.1 Khái ni m, ưu m h n ch 1.1.2 Q trình ñông khô 1.2 T NG QUAN V THU C TIÊM ĐÔNG KHÔ 1.2.1 Khái ni m 1.2.2 Các y u t nh hư ng ñ n ch t lư ng công th c * T l nư c dung môi: Nư c môi trư ng thu phân r t nhi u dư c ch t có liên k t hoá h c d b thu phân este, lacton, lactam, M t nh ng bi n pháp h n ch thu phân dư c ch t gi m t l nư c h n h p dung môi b ng vi c s d ng dung mơi khan đ ng tan v i nư c propylen glycol, ethanol, glycerin, ñ thay th m t ph n ho c toàn b lư ng nư c dung d ch Ngoài dùng h n h p tert-butanol nư c (20:80) c n tăng s hoà tan tr l i c a b t đơng khơ t o b m t ti p xúc l n sau q trình đơng khơ * Đ pH c a dung d ch đơng khơ: pH c a dung d ch hịa tan sau đơng khơ pH c a dung d ch đơng khơ thư ng tương t Kho ng giá tr pH ñư c l a ch n v i m c đích làm cho s n ph m có đ b n cao N u t i pH mà thu c n ñ nh nh t dư c ch t tan có th dùng h n h p dung mơi hay ch t trung gian t o ph c d tan hay ch t ñi n ho t ñ làm tăng ñ tan c a dư c ch t Trong trình b o qu n, pH c a thu c tiêm có th thay đ i ch t có thành ph n bao bì th y tinh hoà tan d n vào dung d ch t o s bi n ñ i c a dư c ch t Do v y, đ trì pH c a dung d ch thu c tiêm n đ nh giá tr thích h p c n dùng h ñ m * Đi u ki n pha ch : (a) Nhi t ñ dung d ch cao ho t ch t d tan nhiên làm gi m ñ n ñ nh c a ho t ch t (b) Th i gian pha ch dung d ch thu c ng n t t, nhiên có nhi u y u t khách quan nh hư ng ñ n th i gian pha ch như: c lô s n xu t, t c ñ l c dung d ch, t c ñ ñóng chai… * Bao bì: Bao bì ch a s n ph m có nh hư ng l n đ n ñ n ñ nh c a s n ph m trình pha ch su t th i gian b o qu n s n ph m Thư ng s d ng l th y tinh có th tích 2ml, 3ml, 5ml đ n 10ml Đáy l ph ng s giúp cho trình d n nhi t t t gia nhi t L th y tinh màu có tác d ng ngăn c n b c x t ngo i, giúp b o v thu c tiêm có dư c ch t nh y c m v i ánh sáng Song thành ph n c a th y tinh màu l i có s t oxyd hay mangan oxyd, v t ion kim lo i n ng có th hịa tan t b m t bao bì vào thu c xúc tác q trình oxy hóa dư c ch t nhanh L th y tinh có ưu m không ch a v t ion kim lo i n ng l i không ngăn c n b c x t ngo i Nút ñ y làm b ng cao su có x rãnh cho nư c ngồi q trình đơng khơ Cao su s d ng làm nút ñ y làm gi m thi u tương tác thu c ñ ñ ng, ch ng s xâm nh p nư c t mơi trư ng ngồi 1.3 CARBOPLATIN 1.3.1 C u trúc hóa h c 1.3.2 Tính ch t lý hóa 1.3.3 Ch đ nh 1.3.4 Ch ng ch ñ nh 1.4 CÁC TÁ DƯ C 1.4.1 nh hư ng c a tá dư c ñ n ch t lư ng s n ph m Các s n ph m thu đư c t q trình đơng khơ ph i ñ m b o: Đ m th p, th i gian n ñ nh dài; kh i s n ph m thu ñư c nguyên v n; d dàng hòa tan tr l i hòa tan v i dung mơi; tính ch t c a ho t ch t khơng thay đ i sau hịa tan tr l i Kh i s n ph m đơng khơ thư ng có đ x p thích h p giúp ho t ch t d dàng hòa tan tr l i có di n tích b m t l n Tuy nhiên kh i x p ph i có đ đ b n h c đ trì hình d ng su t q trình đơng khô su t th i gian b o qu n s n ph m M t khác n u ñ x p c a kh i s n ph m th p s làm c n tr s thăng hoa c a nư c q trình đơng khô s kéo dài ho c s n ph m s không khô Các y u t t ng h p s nh hư ng ñ n ch t lư ng c a khung x p: Là k t qu nh hư ng c a y u t thành ph n, tá dư c đ n t o khung; tá dư c ch ng oxi hóa; tá dư c n ñ nh pH…Vi c l a ch n tá dư c ñưa vào thành ph n c a dung d ch đem đơng khơ ph i ý t i kh hút m, tr ng thái v t lí c a tá dư c q trình đơng khơ chúng có th nh hư ng t i s thu phân c a dư c ch t Hàm lư ng nư c ch ph m đơng khơ khơng ch quy t đ nh b i thông s k thu t q trình đơng khơ mà cịn ph thu c l n vào tá dư c ñã s d ng Di n tích b m t chi u dày c a dung d ch đem đơng khơ: Dung d ch đem đơng khơ ch a d ng c ph i có di n tích b m t chi u dày thích h p đ thu n l i cho trình thăng hoa c a nư c Ngồi đ dày c u t o ñáy d ng c ch a nh hư ng ñ n trình truy n nhi t cho s n ph m su t q trình đơng khơ nên nh hư ng ñ n ch t lư ng khung 1.4.2 Các lo i tá dư c 1.4.2.1 Tá dư c ñ n t o khung 1.4.2.2 Tá dư c ch ng oxi hóa 1.4.2.3 Tá dư c n ñ nh pH 1.5 CÁC CH T T O DUNG MƠI 1.5.1 Ethanol 1.5.2 Đ c tính c a Tert–butanol 1.6 CƠ S LÝ THUY T PHÂN TÍCH PHƯƠNG SAI (ANOVA) 1.6.1 So sánh m t s giá tr trung bình 1.6.2 Bài tốn phân tích phương sai m t y u t (one-way ANOVA) Chương NH NG NGHIÊN C U TH C NGHI M 2.1 TH C NGHI M KH O SÁT CÁC THÔNG S CHO QUI TRÌNH ĐƠNG KHƠ CƠ B N 2.1.1 Th c nghi m kh o sát nhi t đ đơng l nh Khi nhi t xu ng ñ n nhi t eutecti, ñi n tr s tăng ñ t bi n ñ n ∞ H nhi t ñ dung d ch t t ghi l i giá tr ñi n tr theo giá tr nhi t ñ nh ng kho ng th i gian ng n Nhi t đơng l nh ñư c ch n ph i th p nhi t eutecti kho ng t 5°C ñ n 10°C 2.1.2 Th c nghi m kh o sát th i gian đơng l nh Th i gian đơng l nh kho ng th i gian đ tồn b dung d ch đơng k t hồn tồn ng v i ñư ng bi u di n ∞ c a q trình kh o sát nhi t đ eutecti h nhi t ñ dung d ch 2.1.3 Th c nghi m kh o sát th i gian đơng khơ Nư c ñá t o thành t giai ño n đơng l nh s thăng hoa tr c ti p ñi u ki n áp su t c a bu ng đơng khơ th p áp su t c a nư c ñá nhi t ñ c a giá ñ kho ng t -300C ñ n +100C Khi ti n hành đơng khơ, l p nư c ñá gi m, v ch phân cách xu ng ñ n ñi m th p nh t c a l th i ñi m k t thúc q trình đơng khơ sơ c p Tính th i gian cho ñ n m t phân cách h xu ng ñ n ñi m th p nh t c a l , ta xác ñ nh ñư c th i gian ñông khô 2.1.4 Th c nghi m kh o sát áp su t th i kỳ đơng khơ V i áp su t th p, th i gian đơng khơ s n ph m s rút ng n Càng ti n v th i kỳ s y khơ áp su t bu ng ph i th p 2.1.5 Th c nghi m kh o sát nhi t ñ th i gian s y khơ Theo ph n 1.1.2 c đ nh nhi t s y khô 300C, th i gian s y khơ s n ph m thay đ i kho ng 10, 15, 20 gi Ta ch n nhi t đ s y khơ 300C th i gian s y khô 20 gi 2.2 PHƯƠNG PHÁP PH I T O CÔNG TH C THU C TIÊM ĐƠNG KHƠ CARBOPLATIN 2.2.1 Các thí nghi m nghiên c u đ ph i t o cơng th c (1) Ch n tá dư c ñ n t o khung; (2) Ch n dung môi pha ch ; (3) Ch n tá dư c ch ng oxy hóa hi u qu cho s n ph m; (4) Ch n h đ m thích h p cho s n ph m; (5) Nghiên c u ch n ñi u ki n pha ch phù h p; (6) Ch n l a bao bì đóng gói phù h p cho s n ph m 2.2.2 Các tiêu chí đánh giá s n ph m * C m quan: Quan sát c m quan hình th c kh i b t ph i ñ t tiêu chu n: B t sau đơng khơ màu tr ng, khơng đóng l th y tinh, khơng teo vón khơng n t b kh i T th c nghi m, nh ng s n ph m thu ñư c t trình đơng khơ đư c mơ t : (1) Kh i s n ph m màu tr ng, x p, nguyên v n, hòa tan l i d dàng cho dung d ch trong; (2) Kh i s n ph m b teo, gi m th tích kh i; (3) S n ph m không khô, sau l y kh i máy m t ph n kh i s n ph m tan ch y tr l i; (4) S n ph m khơng hình thành kh i, ch t tan t o l p nh y *Đ ñáy chai m: Đ xác ñ nh ñ m ta ti n hành sau: (1) Cân m t lư ng b t thu c vào chén cân (m1: g m b t thu c chén, m: kh i lư ng chén); (2) S y nhi t ñ 1050C gi ; (3) L y ch ph m làm ngu i bình hút m Cân kh i lư ng thu c l i m2 (b t thu c l i chén cân); (4) Hàm m ñư c xác ñ nh: a% = (m1 − m ) x100 m1 − m Đ m t kh i lư ng s y khơ khơng đư c l n 2,0% Hàm lư ng: ñ t 90-110 % so v i hàm lư ng nhãn Đ xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin s n ph m ta dùng phương pháp s c ký l ng hi u cao (HPLC) 2.2.3 Các th c nghi m nghiên c u ph i t o công th c thu c tiêm ñông khô Carboplatin 50mg Th c nghi m 1: Nghiên c u ch n tá dư c ñ n t o khung B ng 2.1 Mơ hình thí nghi m nghiên c u tá dư c ñ n t o khung Thành ph n Công th c 1A 1B 1C 1D 1E 1F 1G Carboplatin (mg) 50 50 50 50 50 50 50 Manitol (mg) 50 75 100 C12H22O11 H2O (mg) 0 50 75 100 Nư c c t (ml) 5 5 5 Th c nghi m 2: Nghiên c u ch n h dung môi 10 B ng 2.2 Mơ hình thí nghi m nghiên c u ch n h dung môi Thành ph n Công th c 2A 2B Carboplatin (mg) 50 50 Manitol (mg) 50 50 Ethanol- nư c t l 1:4 v th tích (ml) Tert-butanol- nư c t l 1:4 v th tích (ml) Th c nghi m 3: Nghiên c u ch n tá dư c ch ng oxi hóa B ng 2.3 Mơ hình thí nghi m nghiên c u tá dư c ch ng oxi hóa Thành ph n Công th c 3A 3B 3C Carboplatin (mg) 50 50 50 Manitol (mg) 50 50 50 EDTA (mg) 2,5 2,5 S c khí N2 qui trình S c khí N2 S c khí N2 Nư c c t (ml) 5 Th c nghi m 4: Nghiên c u ch n tá dư c u ch nh pH B ng 2.4 Mơ hình thí nghi m nghiên c u tá dư c u ch nh pH Thành ph n Công th c 4A 4B 4C Carboplatin (mg) 50 50 50 Manitol (mg) 50 50 50 EDTA (mg) 2,5 2,5 2,5 Na2HPO412H2O (mg) 17,9 18,5 21 H3PO4 v a ñ pH = 5,5 pH = 6,0 pH = 6,5 Nư c c t (ml) 5 Th c nghi m 5: Nghiên c u ch n ñi u ki n pha ch phù h p 15 hai công th c có ý nghĩa M t khác cơng th c 1B có RSD% = 1,4314 < 2% cịn cơng th c 1D có RSD% =5,1833 > 2% K t lu n: Ch n công th c 1B v i tá dư c ñ n 50 mg Manitol 3.2.2 Ch n dung môi pha ch : Thành ph n công th c ta xem b ng 2.2; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2 * K t qu c m quan B ng 3.7 K t qu c m quan s n ph m c a công th c 1B, 2A 2B S l thu C m quan Công th c ñư c (1) (2) (3) 1B 36 35 2A 35 18 10 2B 36 20 8 Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) ñư c mô t 2.2.2 D a vào b ng ta th y: Dung mơi nư c s n ph m có hình th c đ t tiêu chu n c m quan cao nh t (công th c 1B có 36 l đ t tiêu chu n (1)) * K t qu ñ m s n ph m: Ta ti n hành đo đ cơng th c theo cách ño ñ B ng 3.8 K t qu ñ Tiêu chu n m m6l c ac 2.2.2 m s n ph m công th c 1B, 2A, 2B Công th c K t qu 1B 2A 2B 1,02 1,03 1,05 1,01 1,02 1,04 1,03 1,04 1,03 F = 1,0072 1,05 1,03 1,02 Fα = 3,6823 1,02 1,05 1,04 1,04 1,04 1,05 Trung bình 1,0283 1,0350 1,0383 SD 0,0147 0,0105 0,0117 RSD % 1,4314 1,0133 1,1259 Đ m (%) 16 -Đ m trung bình đ u < 2% - Tương t cách phân tích đ s đ ng ñ u m ph n 3.2.1 ta rút ñ mđ t c cơng th c 1B 2A 2B - K t qu phân tích ANOVA cho th y khơng có s khác bi t v đ m gi a công th c 1B, 2A 2B v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα) V y dung môi kh o không nh hư ng ñ n ñ m s n ph m * K t qu hàm lư ng: M i công th c 1B, 2A 2B ch n l v trí khác khơ đem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin theo cách xác ñ nh 2.2.2 B ng 3.9 K t qu hàm lư ng công th c 1B, 2A 2B Tiêu chu n Công th c K t qu 1B 2A 2B 92,21 93,01 92,32 92,35 92,68 92,65 Hàm lư ng 92,32 92,36 92,96 F = 2,3093 (%) 92,33 92,95 93,05 Fα = 92,87 92,73 93,06 3,6823 93,01 92,85 93,45 Trung bình 92,515 92,763 92,915 SD 0,3357 0,2341 0,3878 RSD % 0,3629 0,2523 0,4173 Cũng s phân tích k t qu ñ m 3.2.1 T giá tr RSD < 2% cho ta bi t hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u c ba công th c K t qu phân tích ANOVA cho th y khơng có s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα ) V y dung môi kh o sát không nh hư ng đ n hàm lư ng Carboplatin cơng th c 1B, 2A 2B ba 17 C công th c ñ u ñ t tiêu chu n ñ m, hàm lư ng Nhưng công th c 1B (dung mơi nư c) đ t tiêu chu n c m quan cao nh t K t lu n: Nư c dung môi phù h p nh t, ch n công th c 1B 3.2.3 Ch n tá dư c ch ng oxi hóa: Thành ph n cơng th c ta xem b ng 2.3; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2 * K t qu c m quan B ng 3.10 K t qu c m quan s n ph m công th c 1B, 3A, 3B , 3C Công th c S l thu C m quan ñư c (1) (2) (3) 1B 36 35 3A 37 35 1 3B 37 36 3C 36 36 0 Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) đư c mơ t 2.2.2 Theo b ng ta th y: Lư ng EDTA thêm vào dung d ch, s c khí nitơ hay nư c c t pha ch khơng nh hư ng đ n ch t lư ng khung s n ph m t o thành (s l ñ t tiêu chu n (1) * K t qu đ l cơng th c nhau) m s n ph m: M i công th c 3A, 3B 3C l y 6 nơi khác r i ño ñ m theo cách ño ñ m 2.2.2 B ng 3.11 K t qu đ m cơng th c 1B, 3A, 3B 3C Công th c Tiêu K t qu chu n 1B 3A 3B 3C 1,02 1,04 1,05 1,05 1,01 1,03 1,06 1,06 1,04 1,04 Đ m 1,03 1,03 F = 2,7559 (%) 1,05 1,01 1,02 1,06 Fα = 3,0984 1,02 1,02 1,03 1,03 1,04 1,01 1,05 1,02 Trung bình 1,028 1,023 1,042 1,043 SD 0,01 0,01 0,01 0,02 RSD % 1,431 1,183 1,413 1,565 18 Cũng s phân tích ñ m hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u 3.2.1, giá tr RSD < 2% cho th y c b n công th c K t qu ANOVA cho th y khơng có s khác bi t v đ m gi a cơng th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα ) V y lư ng EDTA thêm vào s c khí N2 vào nư c khơng nh hư ng ñ n ñ m c a s n ph m * K t qu hàm lư ng: M i công th c ch n l v trí khác đem ti n hành xác đ nh hàm lư ng Carboplatin theo 2.2.2 B ng 3.12 K t qu hàm lư ng công th c 1B, 3A, 3B 3C Tiêu chu n Công th c 1B 3A 3B 3C 92,21 94,01 95,67 95,92 92,35 94,05 95,43 96,24 Hàm lư ng 92,32 94,53 95,88 96,42 (%) 92,33 94,68 95,65 95,97 92,87 94,54 95,72 96,37 93,01 94,65 95,29 96,51 Trung bình 92,515 94,41 95,6067 96,2383 SD 0,3357 0,3005 0,2121 0,2439 RSD % 0,3629 0,3183 0,2218 0,2534 Cũng s phân tích k t qu đ m 3.2.1, t giá tr RSD < 2% cho bi t hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u công th c B ng 3.13 K t qu x lý s li u hàm lư ng công th c 3A 1B, 3B 1B, 3A 3B, 3C, 3B Công 3A 1B 3B 1B th c K t F = 106,1439 F= 363,6755 qu Fα = 4,9646 Fα = 4,9646 3A 3C 3C 3B F= 133,9115 F= 22,9129 Fα = 4,9646 Fα = 4,9646 19 D a vào k t qu b ng 3.13 ta so sánh ch n cơng th c đ t tiêu chu n cao nh t Các công th c 3A 1B; 3B 1A; 3A 1C; 3C 3B ñ u có s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα) Như v y cơng th c có hàm lư ng Carboplatin cao nh t ta ch n Theo k t qu b ng 3.12 ta ch n công th c 3C (96,2383%) K t lu n: N ng ñ EDTA s d ng 0,05% (g/ml) ti n hành s c khí Nitơ cho dung d ch trư c hịa tan Carboplatin đ n n ng đ oxy dung d ch < % cho hi u qu ch ng oxi hóa cao nh t Ta ch n cơng th c 3C cho thí nghi m ti p theo 3.2.4 Ch n tá dư c ñi u ch nh pH: Thành ph n công th c ta xem b ng 2.4; tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2 * K t qu c m quan B ng 3.14 K t qu c m quan công th c 3C, 4A, 4B 4C Công th c S l thu C m quan ñư c (1) (2) (3) 3C 36 36 0 4A 37 36 4B 36 35 4C 36 35 Các tiêu chu n (1), (2), (3), (4) ñư c mô t 2.2.2 D a vào b ng ta có nh n xét sau: Cơng th c 3C, 4A, 4B 4C đ u có s l đ t tiêu chu n (1) cao V y lư ng ch t ñ m s d ng dung d ch khơng nh hư ng đ n tiêu chu n c m quan kh i s n ph m * K t qu đ m: M i cơng th c ch n l v trí khác đem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin theo 2.2.2 20 B ng 3.15 K t qu ñ m công th c 4A, 4B 4C Công th c Tiêu chu n K t qu 4ª 4B 4C 1.09 1.05 1.06 1.08 1.06 1.09 1.07 1.08 1.08 F = 1,7687 1.06 1.09 1.09 Fα = 3,6823 1.07 1.06 1.09 1.06 1.07 1.08 Trung bình 1.071667 1.068333 1.081667 SD 0.01169 0.01472 0.01169 RSD % 1.090866 1.37781 1.080781 Đ m (%) Gi ng s phân tích k t qu ñ m 3.2.1, t giá tr RSD < 2% cho th y hàm lư ng ñ t ñư c s đ ng đ u c ba cơng th c K t qu phân tích ANOVA th y khơng có s khác bi t v đ m cơng th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα ) V y lư ng ch t ñ m ñưa vào dung d ch không nh hư ng ñ n ñ m kh i s n ph m * K t qu hàm lư ng: M i cơng th c ch n l v trí khác ñem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin theo cách xác ñ nh 2.2.2 K t qu hàm lư ng c a công th c 4A, 4B, 4C ñư c so sánh v i k t qu hàm lư ng c a công th c 3C 21 B ng 3.16 K t qu hàm lư ng công th c 4A, 4B, 4C 3C Tiêu chu n Công th c 4A 4B 4C 3C 99,36 97,98 97,13 95,92 98,86 98,01 96,89 96,24 Hàm lư ng 99,57 98,04 97,06 96,42 (%) 99,62 97,65 96,92 95,97 99,48 97,86 97,21 96,37 98,91 97,59 97,05 96,51 99,3 97,855 97,0433 96,2383 SD 0,3338 0,1930 0,122 0,2439 RSD % 0,3361 0,1972 0,1256 0,2534 Trung bình Gi ng s phân tích k t qu hàm lư ng cho ta bi t hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u 3.2.2, RSD < 2% c b n công th c B ng 3.17 K t qu x lý s li u hàm lư ng c a công th c 3C 4C; 4B 4C; 4A 4B Công th c K t qu 3C 4C 4B 4C 4A 4B F= 52,2858 F= 75,8747 F= 84,2909 Fα= 4,9646 Fα = 4,9646 Fα = 4,9646 D a vào k t qu b ng 3.17 ta so sánh ch n công th c ñ t tiêu chu n cao nh t Các công th c 3C 4C; 4B 4C; 4A 4B đ u có s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα) Như v y cơng th c có hàm lư ng Carboplatin cao nh t ta ch n Theo k t qu b ng 3.16 ta ch n công th c 4C (99,3%) K t lu n: Thành ph n h ñ m cho s n ph m Carboplatin 50mg 5ml dung d ch: Na2HPO4.12H2O 17,9 mg; Acid phosphoric v a ñ pH = 5,5 Thí nghi m ti p ta ch n cơng th c 4A 22 3.2.5 Ch n ñi u ki n pha ch làm tăng ñ n ñ nh * Đi u ki n đem pha ch : Các thí nghi m 3.2.4, th i gian t hòa tan Carboplatin đ n ch y máy đơng khơ gi Trong ph n này, th i gan gi gi ñ xác ñ nh th i gian n ñ nh c a Carboplatin dung d ch Thành ph n tá dư c nghiên c u ñi u ki n pha ch xem b ng 2.5 Tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2 * K t qu hàm lư ng: M i công th c ch n l v trí khác ñem ti n hành xác ñ nh hàm lư ng Carboplatin theo 2.2.2 B ng 3.18 K t qu hàm lư ng công th c 4A, 5A, 5B Công th c Tiêu chu n 5A 5B 4A 99,71 98,12 99,36 99,37 98,08 98,86 Hàm lư ng 98,92 97,94 99,57 (%) 99,34 97,86 99,62 99,61 98,21 99,48 99,48 97,92 98,91 Trung bình 99,4050 98,0217 99,3 SD 0,2762 0,1354 0,3338 RSD % 0,2778 0,1381 0,3361 Gi ng s phân tích k t qu hàm lư ng hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u c ba công th c 3.2.2 cho ta bi t 23 B ng 3.19 K t qu x lý s li u hàm lư ng công th c 5A 5B; 4A 5A Công th c K t qu 5A 5B F= 121,3621; Fα = 4,9646 4A 5A F= 0,3525; Fα = 4,9646 D a vào k t qu b ng 3.19 ta so sánh ch n công th c ñ t tiêu chu n cao nh t Công th c 5A 5B: K t qu cho th y có s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F > Fα) Theo k t qu b ng 3.30 hàm lư ng Carboplatin công th c 5A (99,405%, th i gian pha ch gi ) cao công th c 5B (98,0217%, th i gian pha ch gi ); Công th c 5A 4A: K t qu cho th y khơng có s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F < Fα) Đi u cho th y ñ n ñ nh c a s n th i gian pha ch gi gi khác ý nghĩa Tuy nhiên theo k t qu b ng 3.18 hàm lư ng Carboplatin công th c 5A (99,405%) cao công th c 4A (99,3%) K t lu n: S n ph m ñư c pha ch th i gian gi ñ nh pha ch gi n 3.2.6 Bao bì cho s n ph m * Bao bì u ki n b o qu n: Thành ph n tá dư c nghiên c u ch n bao bì cho s n ph m Carboplatin 50mg/l công th c xem b ng 2.6, tiêu chu n ñánh giá theo 2.2.2 * K t qu hàm lư ng: Ti n hành ñ nh lư ng s n ph m c a công th c 6A, 5A theo cách xác ñ nh m u sau tu n b o qu n 2.2.2 sau đơng khơ u ki n lão hóa c p t c Công th c 6A, 5A sau tu n b o qu n t c s đư c kí hi u 5A-CT, 6A-CT ñi u ki n lão hóa c p 24 B ng 3.20 K t qu hàm lư ng công th c 5A, 6A 5A-CT, 6A-CT Sau đơng khơ Tiêu chu n Sau tu n b o qu n Nhi t ñ : 40 ± 20C 5A 6A 5A-CT 6A-CT 99,71 99,34 99,31 98,46 99,37 99,25 99,05 99,03 Hàm lư ng 98,92 99,47 99,16 98,37 (%) 99,34 98,82 98,76 98,61 99,61 98,91 98,91 99,10 99,48 99,08 99,15 98,28 Trung bình 99,4050 99,1450 99,0567 98,6417 SD 0,2762 0,2529 0,1965 0,3463 RSD % 0,2778 0,2551 0,1984 0,3510 Gi ng s phân tích k t qu hàm lư ng hàm lư ng ñ t ñư c s ñ ng ñ u 3.2.2 cho ta bi t c b n công th c B ng 3.21 K t qu x lý s li u hàm lư ng c a công th c 5A 6A; 5A–CT 6A–CT Công th c K t qu 5A 6A F = 2,8926; Fα = 4,9646 6A-CT 5A-CT F = 6,5186; Fα = 4,9646 D a vào k t qu b ng 3.21 ta so sánh ch n cơng th c đ t tiêu chu n cao nh t 25 - Công th c 5A 6A: K t qu cho th y s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F = < Fα) nên s khác bi t v hàm lư ng hai lo i chai - Công th c 6A-CT 5A-CT: K t qu cho th y có s khác bi t v hàm lư ng gi a công th c v i m c ý nghĩa α = 0,05 (F = < Fα) Đi u cho th y có s khác bi t v h m lư ng gi a hai công th c, sau tu n b o qu n ñi u ki n nhi t ñ 40oC Theo k t qu b ng 3.34 hàm lư ng Carboplatin công th c 5A-CT (99,0567%) cao công th c 6A-CT (98,6417%) Ta ch n công th c 5A-CT K t lu n: Dùng chai nâu 20 ml có đư ng kính đáy kho ng 2,8 cm đ ch a s n ph m đơng khô Carboplatin 50 mg 26 K T LU N VÀ KI N NGH K t lu n Thành ph n cơng th c thu c tiêm đơng khơ Carboplatin 50mg/l dùng ñi u tr b nh ung thư sau: Tá dư c ñ n t o khung 50 mg Manitol; Dung mơi thích h p nh t nư c dùng ñ pha ch dung d ch Carboplatin 50 mg/5ml; Tá dư c ch ng oxi hóa dùng EDTA v i n ng đ s d ng dung d ch đem đơng khơ 0,05% (g/ml) ti n hành s c khí Nitơ dung d ch trư c hịa tan Carboplatin đ n n ng ñ oxy dung d ch