KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH học p1

CHƯƠNG V - KIỂM NGHIỆM THUỐC BẰNG PHƯƠNG PHÁP SINH HỌC (2 giờ) Trường Đại học Duy Tân Khoa Dược Bộ mơn Phân tích – Kiểm nghiệm – Độc chất Giảng viên: Phan Thị Thu Trang Email: phantttrang47@gmail.com SĐT: 0702396147 Mục tiêu học Nêu vai trò PP sinh học KN chất kháng sinh, TB thử nghiệm ĐL chất KS PP khuếch tán TB mục đích, nguyên tắc, PP thử vô khuẩn đếm SL VSV g(1ml) DP Biết KT làm môi trường nuôi cấy VSV nêu PP tiệt trùng Nắm đđ hình thái, tính chất ni cấy VK, vi nấm để áp dụng thử nghiệm VSV Nội dung học I Mở đầu II Kiểm nghiệm thuốc phương pháp thử động vật III Kiểm nghiệm thuốc phương pháp thử vi sinh vật Đại cương vi sinh vật Môi trường nuôi cấy vi sinh vật Thử vô khuẩn Thử giới hạn vi sinh vật Xác định hoạt lực kháng sinh phương pháp thử vi sinh vật I Mở đầu 1.1 Nguyên tắc phương pháp sinh học: - So sánh hiệu lực tác dụng đặc tính riêng chất thử với chất chuẩn tương ứng điều kiện thời gian thí nghiệm - Trong KN thuốc: + KN thuốc phương pháp thử động vật + KN thuốc thử nghiệm vi sinh vật I Mở đầu 1.2 Chất chuẩn: - Chất chuẩn gốc - Chất chuẩn thứ cấp Đánh giá kết quả: - Đánh giá tốn thống kê - Độ xác phép thử thể giới hạn tin cậy II Kiểm nghiệm thuốc phương pháp thử động vật 2.1 Nguyên tắc: - Dựa đáp ứng động vật thí nghiệm chế phẩm đưa vào thể (liều lượng theo quy định thí nghiệm) để đánh giá chất lượng chế phẩm cần thử 2.2 Động vật thí nghiệm: - Phải đồng đều, khiết nòi giống - Khoẻ mạnh, khơng nhiễm bệnh - Khơng có thai - Được nuôi dưỡng đầy đủ II Kiểm nghiệm thuốc phương pháp thử động vật 2.3 Thử in vivo in vitro: - Thử in vitro: tiến hành quan cô lập động vật, tim, tử cung, ruột, máu… - Thử in vivo: thực thể động vật sống, dựa vào kết thông số để đánh giá tác dụng chất lượng thuốc 2.4 Liều: - Là lượng chế phẩm thử đưa vào thể động vật lần cho mục đích thí nghiệm II Kiểm nghiệm thuốc phương pháp thử động vật 2.5 Các thử nghiệm ĐV áp dụng KNT: - Thử độc tính bất thường - Thử chất hạ huyết áp - Thử chất gây sốt - Định lượng hormon: gonadorelin, corticotrophin,insulin, oxytocin, menotrophin - Kiểm tra tính an toàn vaccin sinh phẩm - Xác định hiệu lực vaccin antitoxin III Kiểm nghiệm thuốc phương pháp thử vi sinh vật 3.1 Đại cương vi sinh vật Vi sinh vật 10 3.4 Thử giới hạn vi sinh vật ❑ Chuẩn bị mẫu thử: - Rắn: hòa tan trực tiếp nghiền mịn với dung môi - Lỏng (dung dịch thực, nhũ dịch nước, chất rắn hòa tan dễ dàng nước ): dùng đệm phosphat pH 7,2 dung dịch natri clorid 0,9 % để hịa lỗng - Lỏng khơng hịa lẫn nước (dầu, kem, sáp): thêm chất nhũ hóa, khuấy trộn học làm nóng nhẹ 45 °C → tạo nhũ dịch - Dạng khí dung - lỏng: Làm lạnh bình để khí hóa lỏng,mở nắp lấy lượng thích hợp để thử 37 Thử giới hạn vi sinh vật ❑ Đếm số lượng VSV ➢ Phương pháp thử: - Phương pháp đĩa thạch - Phương pháp pha loãng ống nghiệm - Phương pháp màng lọc 38 Thử giới hạn vi sinh vật ➢ Tiến hành (Phương pháp đĩa thạch): 1ml chất thử (