Đánh giá tồn lưu tế bào ác tính bằng kỹ thuật RQ PCR của TSX gen ig TCR trên bệnh nhân bạch cầu cấp dòng lympho

LỜI CAM ĐOAN

MỤC LỤC

DANH MỤC HÌNH

DANH MUC BẢNG

DANH MỤC BIỂU ĐỒ

DANH MUC CÁC KÍ HIỆU VÀ CHỮ VIẾT TẮT

ĐẶT VẤN ĐỀ

MỤC TIÊU NGHIÊN CỨU

CHƯƠNG 1. TỔNG QUAN TÀI LIỆU

1.1. ĐỊNH NGHĨA
1.2. DỊCH TỄ HỌC:
1.3. YẾU TỐ NGUY CƠ
- 1.3.1. Yếu tố môi trường:
- 1.3.2. Yếu tố di truyền
1.4. BIỂU HIỆN LÂM SÀNG CỦA BCCDL Ở TRẺ EM:
- 1.4.1. Triệu chứng toàn thể:
- 1.4.2. Triệu chứng xâm nhập tủy xương:
- 1.4.3. Biểu hiện xâm nhập các cơ quan ngoài tủy
1.5. TRIỆU CHỨNG SINH HỌC:
- 1.5.1. Huyết đồ:
- 1.5.2. Sinh hóa máu
- 1.5.3. Đông máu
- 1.5.4. Dịch não tủy
- 1.5.5. Tủy đồ
- 1.5.6. Dấu ấn miễn dịch:
- 1.5.7. Các bất thường nhiễm sắc thể (NST) trong BCCDL:
1.6. CHẨN ĐOÁN:
1.7. ĐIỀU TRỊ:
- 1.7.1. Hóa trị liệu bệnh bạch cầu cấp dòng Lympho
- 1.7.2. Điều trị và phòng ngừa tổn thương hệ thần kinh trung ương
- 1.7.3. Ghép tế bào gốc:
1.8. THEO DÕI BỆNH TỒN LƯU TỐI THIỂU CỦA BCCDL
- 1.8.1. BTLTT sau điều trị 1 hoặc 2 tuần: ý nghĩa của đánh giá đáp ứng sớm.
- 1.8.2. Thông tin tiên lượng dựa trên BTLTT sau khi kết thúc điều trị:
- 1.8.3. BTLTT sau lui bệnh và việc giám sát ở những thời điểm sau đó
1.9. CÁC PHƯƠNG PHÁP ĐÁNH GIÁ TỒN LƯU TẾ BÀO ÁC TÍNH
- 1.9.1. Kỹ thuật tế bào dòng chảy:
- 1.9.2. KỸ THUẬT PCR XÁC ĐỊNH CÁC TỔ HỢP GEN BẤT THƯỜNG
1.10. SỰ TÁI SẮP XẾP GEN Ig/TCR
- 1.10.1. Sự tái sắp xếp Immunoglobulin
- 1.10.2. T-cell receptor

CHƯƠNG 2. ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP CHỌN MẪU

2.1. THIẾT KẾ NGHIÊN CỨU
2.2. DÂN SỐ NGHIÊN CỨU
2.3. PHƯƠNG PHÁP CHỌN MẪU
- 2.3.1. Cỡ mẫu nghiên cứu:
- 2.3.2. Tiêu chuẩn chọn bệnh: thỏa mãn các tiêu chuẩn sau:
- 2.3.3. Tiêu chuẩn loại trừ:
2.4. CÁC BƯỚC THỰC HIỆN
- 2.4.1. Thu thập mẫu
- 2.4.2. Phản ứng PCR
- 2.4.3. Giải trình tự gen Ig/TCR
- 2.4.4. Phương pháp Real-time PCR
2.5. Phương pháp thu thập và xử lý số liệu:
- 2.5.1. Nguồn số liệu:
- 2.5.2. Thu thập số liệu:
- 2.5.3. Định nghĩa các biến số nghiên cứu
- 2.5.4. Xử lý số liệu:
2.6. TÍNH KHẢ THI
2.7. VẤN ĐỀ Y ĐỨC.

CHƯƠNG 3. KẾT QUẢ :

3.1. ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦA CÁC BỆNH NHI TRONG NGHIÊN CỨU
- 3.1.1. Đặc điểm dịch tễ:
- 3.1.2. Đặc điểm về lâm sàng của BN lúc nhập viện:
- 3.1.3. Đặc điểm sinh học của BN:
- 3.1.4. Đặc điểm về tủy đồ, dấu ấn miễn dịch, sinh học phân tử:
3.2. XÁC ĐỊNH SỰ TĂNG BIỂU HIỆN CỦA TSX GEN IG/TCR CỦA TỪNG BN BCCDL VÀ XÁC ĐỊNH CHÍNH XÁC VÙNG NỐI BẰNG GIẢI TRÌNH TỰ GEN
- 3.2.1. Xác định sự tăng biểu hiện của TSX gen Ig/TCR của từng BN BCCDL
Trong nghiên cứu của chúng tôi, chúng tôi khảo sát 19 vùng nối cho 50 BN. Kết quả thu được như sau:
- 3.2.2. Tỉ lệ bệnh nhân có biểu hiện mạnh trên 19 vùng nối
- 3.2.3. Tỉ lệ bệnh nhân có 1 kiểu TSX , 2 kiểu TSX, 3 kiểu TSX, kiểu TSX không có biểu hiện mạnh
- 3.2.4. Tái sắp xếp Ig/TCR trong BCCDL-B(n=49)
- 3.2.5. Tái sắp xếp Ig/TCR trong BCCDL-T
- 3.2.6. Trình tự vùng nối của TSX gen khi bệnh nhân có một kiểu TSX có biểu hiện mạnh
- 3.2.7. Trình tự vùng nối của TSX gen khi BN 2 kiểu TSX có biểu hiện mạnh
- 3.2.8. Trình tự vùng nối của TSX gen khi BN 3 vùng nối có biểu hiện mạnh
3.3. Định lượng số copy lúc chẩn đoán và giai đoạn tấn công sau ngày 35:
- 3.3.1. Kết quả định lượng số copy của RQ-PCR của TSX Ig/TCR và dấu ấn miễn dịch của bệnh nhân trước chẩn đoán và giai đoạn tấn công sau ngày 35
- Bảng 3.6.So sánh định lượng số copy RQ-PCR của TSX Ig/TCR và dấu ấn miễn dịch của bệnh nhân trước chẩn đoán và giai đoạn tấn công sau ngày 35
- 3.3.2. Độ nhạy của phản ứng RQ-PCR của TSX gen Ig/TCR
- 3.3.3. Tỷ lệ BTLTT <10-2 và BTLTT ≥10-2 giai đoạn tấn công sau ngày 35
- 3.3.4. Tỷ lệ BTLTT dương tính (BTLTT≥0,01%) và BTLTT âm tính (BTLTT < 0.01%)
3.4. So sánh kết quả BTLTT của RQ-PCR của TSX gen Ig/TCR và dấu ấn miễn dịch.

CHƯƠNG 4. BÀN LUẬN

4.1. ĐẶC ĐIỂM CHUNG CỦA BỆNH NHI TRONG NGHIÊN CỨU
- 4.1.1. Đặc điểm dịch tễ
- 4.1.2. Đăc điểm lâm sàng.
- 4.1.3. Đặc điểm sinh học:
- 4.1.4. Đặc điểm về tủy đồ, dấu ấn miễn dịch, sinh học phân tử:
4.2. XÁC ĐỊNH SỰ BIỂU HIỆN MẠNH CỦA TÁI SẮP XẾP GEN IG/TCR BẰNG PHẢN ỨNG PCR VÀ TRÌNH TỰ GEN VÙNG NỐI IG/TCR:
- 4.2.1. Xác định sự biểu hiện mạnh của tái sắp xếp gen Ig/TCR bằng phản ứng PCR
- 4.2.2. Trình tự vùng nối Ig/TCR
4.3. ĐỊNH LƯỢNG SỐ COPY TẠI THỜI ĐIỂM CHẨN ĐOÁN VÀ GIAI ĐOẠN TẤN CÔNG SAU NGÀY 35 .
- 4.3.1. Độ nhạy của phản ứng RQ-PCR của TSX Ig/TCR
- 4.3.2. Tỉ lệ BTLTT <10-2, BTLTT≥10-2
- 4.3.3. Tỉ lệ BTLTT <10-4, BTLTT≥10-4
4.4. SO SÁNH KẾT QUẢ BTLTT CỦA RQ-PCR CỦA TSX GEN IG/TCR VÀ FC:
4.5. GIỚI HẠN CỦA ĐỀ TÀI

KẾT LUẬN

KIẾN NGHỊ:

TÀI LIỆU KHAM KHẢO