Mục tiêu nghiên cứu chính của luận án là: Đánh giá khả năng gây độc tế bào và chết tế bào theo chương trình (apoptosis) của phối hợp virus vaccine sởi và quai bị trên dòng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 in vitro. Đánh giá hiệu quả kháng u của phối hợp virus vaccine sởi và quai bị trên mô hình chuột thiếu hụt miễn dịch (chuột nude) mang khối u dòng tế bào ung thư đại trực tràng người HT-29. Mời các bạn tham khảo!
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y LÊ DUY CƯƠNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ ĐẠI TRÀNG NGƯỜI CỦA VIRUS VACCINE SỞI VÀ QUAI BỊ TRÊN THỰC NGHIỆM LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC HÀ NỘI, NĂM 2019 BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y LÊ DUY CƯƠNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ ĐẠI TRÀNG NGƯỜI CỦA VIRUS VACCINE SỞI VÀ QUAI BỊ TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Khoa học y sinh Mã số: 9720101 LUẬN ÁN TIẾN SỸ Y HỌC NGƯỜI HƯỚNG DẪN KHOA HỌC: PGS TS Nguyễn Lĩnh Toàn PGS.TS Hồ Anh Sơn HÀ NỘI, NĂM 2019 LỜI CẢM ƠN Với lịng kính trọng biết ơn sâu sắc! Tơi xin chân thành cảm ơn Đảng ủy, Ban Giám đốc Học Viện, Bộ môn Sinh lý bệnh, Viện nghiên cứu Y-Dược học quân sự, Phòng Sau đại học, Học viện Quân y tạo điều kiện, giúp đỡ q trình học tập nghiên cứu Tơi xin chân thành cảm ơn Bộ môn Sinh học tế bào, khoa Sinh học Phịng Thí nghiệm Trọng điểm cơng nghệ Enzym Protein (KLEPT), Trường Đại học Khoa học Tự nhiên, Đại học Quốc gia Hà Nội tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tơi xin chân thành cảm ơn Khoa Hình thái, Viện 69, Bộ Tư Lệnh Lăng Chủ Tịch Hồ Chí Minh tạo điều kiện thuận lợi, giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn đến PGS.TS Nguyễn Lĩnh Toàn, PGS.TS Hồ Anh Sơn, người thầy tận tình trực tiếp dạy dỗ, dìu dắt, hướng dẫn tạo điều kiện cho tơi suốt q trình nghiên cứu hồn thành luận án Tơi xin bày tỏ lịng biết ơn kính trọng đến thầy hội đồng chấm luận án dành nhiều thời gian công sức bảo, giúp đỡ tơi hồn thành luận án Tôi xin chân thành cảm ơn động viên, giúp đỡ vơ tư, tận tình anh chị trước, đồng nghiệp, bạn bè trình học tập Cuối cùng, tơi xin tỏ lịng biết ơn tới công ơn nuôi dạy cha mẹ tôi, quan tâm giúp đỡ, động viên vợ, con, anh, chị, em bạn bè thân thiết để tơi có ngày hôm Hà Nội, ngày tháng năm 2019 Lê Duy Cương LỜI CAM ĐOAN Tôi xin cam đoan số liệu đề tài luận án phần số liệu đề tài nghiên cứu có tên: “Nghiên cứu ứng dụng virus vaccine sởi quai bị gây ly giải tế bào điều trị ung thu gan đại trực tràng thực nghiệm” Kết đề tài thành nghiên cứu tập thể mà tơi thành viên Tơi Chủ nhiệm đề tài toàn thành viên nhóm nghiên cứu đồng ý cho phép sử dụng đề tài vào luận án để bảo vệ lấy tiến sĩ Các số liệu, kết nêu luận án trung thực chưa cơng bố cơng trình khác Tác giả luận án Lê Duy Cương MỤC LỤC TRANG PHỤ BÌA LỜI CẢM ƠN LỜI CAM ĐOAN MỤC LỤC DANH MỤC CÁC CHỮ, KÝ HIỆU VIẾT TẮT DANH MỤC CÁC BẢNG DANH MỤC CÁC BIỂU ĐỒ DANH MỤC CÁC HÌNH ĐẶT VẤN ĐỀ CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN TÀI LIỆU 1.1 Giới thiệu chung 1.2 Ung thư đại trực tràng 1.2.1 Tình hình ung thư đại trực tràng 1.2.2 Nguyên nhân ung thư đại trực tràng 1.2.3 Cơ chế bệnh sinh ung thư đại trực tràng 1.3 Liệu pháp virus vaccine sởi quai bị điều trị ung thư đại trực tràng người 22 1.3.1 Sinh học virus sởi quai bị 22 1.3.2 Virus vaccine sởi quai bị lây nhiễm đặc hiệu tế bào ung thư đại trực tràng 24 1.3.3 Các chế virus vaccine sởi quai bị ly giải tế bào ung thư đại trực tràng 27 1.4 Các nghiên cứu virus vaccine sởi quai bị điều trị ung thư lâm sàng 35 CHƯƠNG 2: ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 38 2.1 Đối tượng nghiên cứu 38 2.1.1 Động vật 38 2.1.2 Chất liệu nghiên cứu 38 2.1.3 Trang thiết bị sử dụng cho nghiên cứu 38 2.2 Phương pháp nghiên cứu 40 2.2.1 Phương pháp ni cấy tăng sinh dịng tế bào 40 2.2.2 Phương pháp tăng sinh chuẩn độ virus vaccine sởi quai bị từ nguồn virus vaccine 42 2.2.3 Phương pháp đánh giá virus vavccine sởi quai bị ly giải tế bào thử nghiệm 3- (4,5-Dimethylthiazol-2-yl) -2,5 diphenyl tetrazolium bromide 45 2.2.4 Chuẩn bị mẫu tế bào HT-29 nhiễm virus vaccine sởi quai bị đánh giá tỉ lệ tế bào chết theo chương trình tế bào hoại tử phương pháp dòng chảy 48 2.2.5 Đánh giá tỉ lệ tế bào ung thư đại tràng người HT-29 chết theo chương trình hoại tử phương pháp phân tích tế bào dòng chảy 51 2.2.6 Phương pháp nuôi chuột thiếu hụt miễn dịch (chuột nude) 54 2.2.7 Phương pháp tạo khối u dòng tế bào ung thư đại tràng người HT29 dùi chuột thiếu hụt miễn dịch tính kích thước khối u 55 2.2.8 Phương pháp điều trị chuột nude virus vaccine sởi quai bị 56 2.2.9 Phương pháp đánh giá đáp ứng điều trị virus vaccine sởi quai bị chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối u tế bào HT-29 56 2.2.10 Phương pháp phẫu tích lấy mơ u lách chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối u tế bào HT-29 sau điều trị virus vaccine sởi quai bị 57 2.2.11 Đánh giá tỉ lệ tế bào miễn dịch lách chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối u tế bào HT-29 sau điều trị virus vaccine sởi quai bị phương pháp phân tích tế bào dịng chảy 59 2.2.12 Phương pháp phân tích siêu cấu trúc tế bào u HT-29 sau điều trị virus vaccine sởi quai bị 61 2.2.13 Phương pháp phân tích kết 62 SƠ ĐỒ NGHIÊN CỨU 64 CHƯƠNG 3: KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU 65 3.1 Tăng sinh dòng tế bào HT-29, Vero, virus vaccine sởi quai bị 65 3.1.1 Tăng sinh dòng tế bào HT-29 Vero 65 3.1.2 Tăng sinh virus vaccine sởi quai bị từ nguồn virus vaccine 66 3.2 Chuẩn độ virus vaccine sởi quai bị theo phương pháp TCID50 67 3.3 Virus vaccine sởi quai bị ly giải trực tiếp dòng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 in vitro 68 3.3.1 Tế bào HT-29 nhiễm virus vaccine sởi quai bị tạo hợp bào in vitro 68 3.3.2 Kết đánh giá hiệu ly giải tế bào ung thư đại tràng người HT-29 virus vaccine sởi quai bị nghiệm pháp 3- (4,5Dimethylthiazol-2-yl) -2,5 diphenyl tetrazolium bromide 69 3.3.3 Đánh giá tỉ lệ tế bào ung thư đại tràng người HT-29 chết theo chương trình hoại tử sau nhiễm virus vaccine sởi quai bị in vitro.73 3.4 Virus vaccine sởi quai bị kháng u dòng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 cấy ghép chuột thiếu hụt miễn dịch 90 3.4.1 Kết ghép u dòng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 90 3.4.2 Kết điều trị chuột nude mang khối u tế bào ung thư đại tràng người HT-29 virus vaccine sởi quai bị 91 3.4.3 Tỉ lệ tế bào miễn dịch lách chuột thiếu hụt miễn dịch nhóm nghiên cứu sau điều trị virus vaccine sởi quai bị 96 3.4.4 Hình ảnh siêu cấu trúc tế bào u đại tràng người HT-29 sau điều trị virus vaccine sởi quai bị 99 CHƯƠNG 4: BÀN LUẬN 101 4.1 Tăng sinh dòng tế bào Vero tế bào ung thư đại tràng người HT-29 in vitro 101 4.1.1 Tăng sinh dòng tế bào Vero 101 4.1.2 Ni cấy, tăng sinh dịng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 102 4.2 Tăng sing virus vaccine sởi, quai bị Chuẩn độ TCID50 103 4.3 Virus vaccine sởi quai bị ly giải tế bào ung thư đại tràng người HT-29 in vitro 107 4.3.1 Virus vaccine sởi quai bị ly giải trực tiếp tế bào ung thư đại tràng người HT-29 cách tạo hợp bào in vitro 107 4.3.2 Đánh giá khả ly giải tế bào HT-29 virus vaccine sởi quai bị nghiệm pháp - (4,5-Dimethylthiazol-2-yl) - 2,5 diphenyl tetrazolium bromide 109 4.3.3 Virus vaccine sởi quai bị ly giải tế bào HT-29 thông qua kích hoạt đường tế bào chết theo chương trình in vitro 112 4.4 Virus vaccine sởi quai bị kháng u tế bào ung thư đại tràng người HT-29 chuột thiếu hụt miễn dịch 123 4.4.1 Đánh giá độc tính virus vaccine sởi quai bị chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối u tế bào ung thư đại tràng người HT-29 123 4.4.2 Virus vaccine sởi quai bị kháng u tế bào ung thư đại tràng người HT-29 chuột thiếu hụt miễn dịch 125 4.4.3 Virus vaccine sởi quai bị kích thích miễn dịch đặc hiệu kháng u tế bào ung thư đại tràng người HT-29 chuột thiếu hụt miễn dịch.128 4.4.4 Kết siêu cấu trúc tế bào u đại tràng người HT-29 ghép chuột thiếu hụt miễn dịch sau điều trị virus vaccine sởi quai bị 134 KẾT LUẬN 140 Phối hợp virus vaccine sởi quai bị có hiệu ly giải trực tiếp kích hoạt đường chết tế bào apoptosis in vitro dòng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 140 Phối hợp virus vaccine sởi quai bị có hiệu kháng u dịng tế bào ung thư đại tràng người HT-29 cấy ghép chuột nude 139 KHUYẾN NGHỊ 142 DANH MỤC CÁC CƠNG TRÌNH CƠNG BỐ KẾT QUẢ NGHIÊN CỨU CỦA ĐỀ TÀI, LUẬN ÁN 143 TÀI LIỆU THAM KHẢO 144 DANH MỤC CÁC CHỮ, KÝ HIỆU VIẾT TẮT APC Adenomatous polyposis coli (Coli polyp tuyến) AIF Apoptosis inducing factor (yếu tố tạo chết tế bào theo chương trình) CEA Carcinoembryonic Antigen (kháng ngun ung thư biểu mơ phơi) CIMP CpG island methylator phenotype (kiểu hình methyl hóa đảo CpG) CPE Cytopathic effect (hiệu ứng gây độc tế bào) CpG Cytosine – Guanine nucleotide CRC Colorectal Cancer (ung thư đại trực tràng) DAMP Damage-Associated Molecular Pattern (kiểu phân tử liên quan đến tổn thương) DC Dedritic Cell (tế bào gai) DNA Deoxyribonucleic acid F Fusion (hịa màng) HN Hemagglutinin neuraminidase H Hemagglutinin HNPCC Hereditary nonpolyposis colorectal cancer (ung thư đại trực tràng di truyền không Polyp) IFN Interferon IL Interleukin LINE-1 (Long interspersed nuclear elements-1) yếu tố nhân kích thước dài rải rác LLC Lewis Lung Cancer (ung thư phổi chuột) MeV Mealse vaccine virus (virus vaccine sởi) MHC Major Histocompatibility Complex (phức hợp tương hợp mơ chính) MMR Mismatch Repair (sửa chữa ghép đôi không xứng) MOI Multiplicity of infection MSI Microsatellite Instability (bất ổn trình tự lặp ngắn DNA) MTT 3-[4,5-dimethylthiazole-2-yl]-2,5-diphenyl tetrazolium bromide MuV Mumps vaccine virus (virus vaccine quai bị) NIS Sodium-Iodine Symporter (chất mang iod natri) NK Natural Killer (giết tự nhiên) OV Oncolytic Virus (virus ly giải tế bào ung thư) PAMP Pathogen-Associated Molecular Pattern (kiểu phân tử liên quan đến tác nhân gây bệnh) PBS Phosphate buffered saline (dung dịch muối đệm phosphat) PCR Polymerase Chain Reaction (phản ứng chuỗi polymerase) PFU Plaque forming units (Số hạt virus nhiễm vào tế bào) RNA Ribonucleic acid ROS Reactive Oxygen Species (các gốc tự chứa oxy hoạt động) TCID Tissue Culture Infectious Dose (liều nhiễm mô nuôi cấy) TGFβ Transforming Growth Factor β (yếu tố tăng trưởng chuyển dạng β) TNF Tumor necrotic factor (yếu tố hoại tử khối u) Wnt Wingless-related integration (tên đường truyền tín hiệu vào nội bào thơng qua thụ thể bề mặt tế bào) 145 11 Jemal A., Bray F., Center M.M., et al (2011), Global cancer statistics CA cancer journal of clinicians, 61(2):69-90 12 Doubeni C.A., Major J.M, Laiyemo A.O., et al (2012) Contribution of behavioral risk factors and obesity to socioeconomic differences in colorectal cancer incidence Journal national cancer institute, 104:13531362 13 Rashtak S., Rrego R., Sweetser S.R., et al (2017) Sessile serrated polyps and colon cancer prevention Cancer prevention research, 1-33 14 Goldstein N.S (2006) Serrated pathway and APC (conventional)-type colorectal polyps: Molecular-morphologic pathways, and implications for classification correlations, genetic American journal of clinical pathology, 125:146-153 15 Santos P.J.M., Muñoz G.S (2016) Biomarkers of colorectal cancer: A genome-wide perspective Cancer translational medicine., 2(6):182-188 16 Nosho K., Irahara N., Shima K., et al (2008) Comprehensive biostatistical analysis of CpG island methylator phenotype in colorectal cancer using a large population-based sample PLoS One, 3(11):1-12 17 Motoyama K., Inoue H., Takatsuno Y., et al (2009) Over- and underexpressed microRNAs in human colorectal cancer International journal of oncology, 34:1069-1075 18 Mima K., Nishihara R., Yang J., et al (2016) MicroRNA MIR21 (miR21) and PTGS2 expression in colorectal cancer and patient survival Clinical cancer research, 22(15):3841-3848 19 Wang C.J., Zhou Z.G., Wang L., et al (2009) Clinicopathological significance of micro-RNA-31, -143 and -145 expression in colorectal cancer Disease markers, 26:27-34 146 20 EKO N., Tsang W.P., Ng S.S.M., et al (2009) Micro RNA-143 targets DNA methyltransferases 3a in coloractal cancer British journal of cancer, 101:699-706 21 Suzuki H.I., Yamagata K., Sugimoto K., et al (2009) Modulation of microRNA processing by p53 Nature, 460:529-533 22 Bandres E., Agirre X., Bitarte N., et al (2009) Epigenetic regulation of microRNA expression in colorectal cancer International journal of cancer, 125:2737-2743 23 Knudson A.G (1971) Mutation and cancer: Statistical study of retinoblastoma Proceedings of the national academy of sciences of the United States of America, 68(4):820-823 24 Robertson K.D., Uzvolgyi E., Liang G., et al (1999) The human DNA methyltransferases (DNMTs) 1, 3a and 3b: Coordinate mRNA expression in normal tissues and overexpression in tumors Nucleic acids research, 27(11):2291-2298 25 Parry L., Clarke, A.R (2011) The roles of the methyl-CpG binding proteins in cancer Genes and cancer, 2(6):618-630 26 Hampel H., Frankel W., Panescu J., et al (2006) Screening for Lynch syndrome (hereditary nonpolyposis colorectal cancer) among endometrial cancer patients Cancer research, 66(15):7810-7817 27 Ligtenberg M.J., Kuiper R.P., Chan T.L., et al (2009) Heritable somatic methylation and inactivation of MSH2 in families with Lynch syndrome due to deletion of the 3' exons of TACSTD1 Nature genetics, 41(1):112-117 28 Fukuhara S., Chang I., Mitsui Y., et al (2014) DNA mismatch repair gene MLH1 induces apoptosis in prostate cancer cells Oncotarget, 5(22):11297-11307 147 29 Shen L., Toyota M., Kondo Y., et al (2007) Integrated genetic and epigenetic analysis identifies three different subclasses of colon cancer Proceeding of the national academy sciences, 104(47):18654-18659 30 Akhtar Z.B., Cowper S.L.R., Corradin O., et al (2012) Epigenomic enhancer profiling defines a signature of colon cancer Science, 336(6082):736-739 31 Swets M., Zaalberg A., Boot A., et al (2017) Tumor LINE-1 methylation level in association with survival of patients with stage II colon cancer International journal molecular sciences, 18(36):1-12 32 Antelo M., Balaguer F., Shia J., et al (2012) A high degree of LINE-1 hypomethylation is a unique feature of early-onset colorectal cancer PLOS One, 7:1-12 33 Ogino S., Nishihara R., Lochhead P., et al (2013) Prospective study of family history and colorectal cancer risk by tumor LINE-1 methylation level Journal of the national cancer institute, 105:130-140 34 Kouzarides T (2007) Chromatin modification and their funtion Cells, 128:693-705 35 Weichert W., Roske A., Niesporek S., et al (2008) Class I histone deacetylase expression has independent prognostic impact in human colorectal cancer: Specific role of class I histone deacetylases in vitro and in vivo Clinical cancer research, 14(6):1669-1677 36 Ashktorab H., Belgrave K., Hosseinkhah F., et al (2010) Global histone H4 acetylation and HDAC2 expression in colon adenoma and carcinoma Digestive diseases and sciences, 54(10):2109-2117 37 Nosho K., Shima K., Irahara N., et al (2010) SIRT1 histone deacetylase expression is associated with microsatellite instability and CpG island methylator phenotype in colorectal cancer Modern pathology, 22(7):922-932 148 38 Barski A., Cuddapah S., Cui K., et al (2007) High-resolution profiling of histone methylations in the human genome Cell, 129:823-837 39 Chi P.C., Allis D., Wang G.G (2010), Covalent histone modifications: miswritten, misinterpreted, and miserased in human cancers, Nature review cancer, 10(7):457-469 40 Kang M.Y., Lee B.B., Kim Y.H., et al (2007) Association of the SUV39H1 histone methyltransferase with the DNA methyltransferase at mRNA expression level in primary colorectal cancer International journal of cancer, 121:2192-2197 41 Matveeva O.V., Guo Z.S., Senin V.M., et al (2015) Oncolysis by paramyxoviruses: Preclinical and clinical studies Molecular therapy oncolytics, 2:1-14 42 Kubota M., Takeuchi K., Watanabe S (2016) Trisaccharide containing α2,3-linked sialic acid is a receptor for mumps virus Proceedings of the national academy sciences, 113(41):11579-11584 43 Lin L.T., Richardson C.D (2016) The host cell receptors for measles virus and their interaction with the viral hemagglutinin (H) protein Viruses, 8(250):1-29 44 Cattaneo R (2010) Paramyxovirus entry and targeted vectors for cancer therapy PLOS pathogens, 6:1-4 45 Matveeva O.V., Guo Z.S., Shabalina S.A., et al (2015) Oncolysis by paramyxoviruses: multiple mechanisms contribute to therapeutic efficiency Moleculer therapy oncolytics, 2:1-11 46 Cuddington B.P., Mossman K.L., (2014) Permissiveness of human cancer cells to oncolytic bovine herpesvirus is mediated in part by KRAS activity Journal of virology, 88(12):6885–6895 149 47 Arulanandam R., Batenchuk C., Angarita F.A., et al (2015) VEGFmediated induction of PRD1-BF1/ Blimp1 expression sensitizes tumor vasculature to oncolytic virus infection Cancer cell, 28(2):210-224 48 Bateman A.R., Harrington K.J., Kottke T., et al (2002) Viral fusogenic membrane glycoproteins kill solid tumor cells by nonapoptotic mechanisms that promote cross presentation of tumor antigens by dendritic cells Cancer research, 62:6566-6578 49 Zamarin D., Holmgaard R.B., Subudhi S.K., et al (2014) Localized oncolytic virotherapy overcomes systemic tumor resistance to immune checkpoint blockade immunotherapy Science translocation medicine, 6(226):1-20 50 Guo Z.S., Liu Z., Bartlett D.L (2014) Oncolytic immunotherapy: Dying the right way is a key to eliciting potent antitumor immunity Frontiers in oncology, 4:1-11 51 Inoue H., Tani K (2014) Multimodal immunogenic cancer cell death as a consequence of anticancer cytotoxic treatments Cell death and differentiation, 21:39-49 52 Guillerme J.B., Marc G., Tangy F., et al (2013) Antitumor virotherapy by attenuated measles virus Biology, 2:587-602 53 Rozières A., Viret C., Faure M (2017) Autophagy in measles virus infection Viruses, 9:1-13 54 Delpeut S., Rudd P.A., Labonte P., et al (2012) Membrane fusionmediated autophagy induction enhances morbillivirus cell-to-cell spread Journal of virology, 86(16):8527-8535 55 Gotoh B., Komatsu T., Takeuchi K., et al (2001) Paramyxovirus accessory proteins as interferon antagonists Microbiol Immunol, 45(12):787-800 150 56 Takeuchi K., Kadota S.I., Takeda M., et al (2003) Measles virus V protein blocks interferon (IFN)-alpha/beta but not IFN-gamma signaling by inhibiting STAT1 and STAT2 phosphorylation Federation of european biochemical societies letters, 545:177-182 57 Takayama I., Sato H., Watanabe A., et al (2012) The nucleocapsid protein of measles virus blocks host interferon response Virology, 424:45–55 58 Shaffer J.A., Bellini W.J., Rota P.A (2003) The C protein of measles virus inhibits the type I interferon response Virology, 315:389-397 59 Haus O (2000) The Genes of interferons and interferon-related factors: Localization and relationships with chromosome aberrations in cancer Archivum immunologiae et therapiae experimentalis, 48:95-100 60 Donnelly O.G., Errington-Mais F., Steele L., et al (2013) Measles virus causes immunogenic cell death in human melanoma Gene therapy, 20(1):7-15 61 Angel K.T., Dewhurst S., Perry S.W., et al (1995) Tumor necrosis factor alpha-induced apoptosis in human neuronal cells: Protection by the antioxidant N-acetylcysteine and the genes bcl-2 and crmA Moleculer and cellular biology, 15(5):2359-2366 62 Vivier E., Raulet D.H., Moretta A., et al (2011) Innate or adaptive immunity? The example of natural killer cells Science, 331(6013): 44-49 63 Arnon T.I., Achdout H., Lieberman N., et al (2004), The mechanisms controlling the recognition of tumor- and virus-infected cells by NKp46 Blood, 103(2):664-672 64 Chinnery F., King C.A., Elliott T., et al (2012) Viral antigen mediated NKp46 activation of NK cells results in tumor rejection via NK-DC crosstalk Oncoimmunology, 1(6):874-883 151 65 Komaru A., Ueda Y., Furuya A., et al (2009) Sustained and NK/CD4+ T cell-dependent efficient prevention of lung metastasis induced by dendritic cells harboring recombinant Sendai virus Journal of immunology, 1-9 66 Kato T., Ueda Y., Kinoh H., et al (2010) RIG-I helicase-independent pathway in sendai virus-activated dendritic cells is critical for preventing lung metastasis of AT6.3 prostate cancer Neoplasia, 12(11):906-914 67 Komminoth P., Roth J., Lackie P.M., et al (1991) Polysialic acid of the neural cell adhesion molecule distinguishes small cell lung carcinoma from carcinoids American journal of pathology, 139(2):297-304 68 Vierbuchen M.J., Fruechtnicht W., Brackrock S., et al (1995) Quantitative lectinhistochemical and immunohistochemical studies on the occurrence of alpha (2,3)- and alpha (2,6)-linked sialic acid residues in colorectal carcinomas Cancer, 76(5):727-735 69 Ammerman N.C., Beier-Sexton M., Azad A.F (2008) Growth and maintenance of Vero cell lines Curr protocol microbiol, 1-10 70 Martínez-Maqueda D., Miralles B., Recio I (2015) HT29 cell line The Impact of food bioactives on gut health, 113-124 71 Grigorov B., Rabilloud J., Lawrence P., et al (2011) Rapid titration of measles and other viruses: Optimization with determination of replication cycle length PlOS One, 6:1-12 72 Pourianfar H.R., Javadi A., Grollo L (2012) A Colorimetric-based accurate method for the determination of enterovirus 71 titer Indian journal virological, 23(3):303-310 73 Zhang L.F., Tan D.Q.C., Jeyasekharan A.D., et al (2014) Combination of vaccine-strain measles and mumps virus synergistically kills a wide range of human hematological cancer cells: Special focus on acute myeloid leukemia Cancer letters, 1-9 152 74 Myers R., Greiner S., Harvey M., et al (2005) Oncolytic activities of approved mumps and measles vaccines for therapy of ovarian cancer Cancer gene therapy, 12:593-599 75 Ohtsuji M., Lin Q., Okazaki H., et al (2018) Anti-CD11b antibody treatment suppresses the osteoclast generation, inflammatory cell infiltration, and autoantibody production in arthritis-prone FcγRIIBdeficient mice Arthritis research & therapy, 20(25):1-11 76 Stenström M., Sköld M., Ericsson A., et al (2004) Surface receptors identify mouse NK1.1+ T cell subsets distinguished by function and T cell receptor type Euro journal immunology, 34:56-65 77 Holst K., Guseva D., Schindler S., et al (2015) The serotonin receptor 5-HT7R regulates the morphology and migratory properties of dendritic cells Journal of cell science, 128:2866-2880 78 Boisgerault N., Guillerme J.B., Pouliquen D., et al (2013) Natural oncolytic activity of live-attenuated measles virus against human lung and colorectal adenocarcinomas Biology medicine research et (1957) international, 1-11 79 Fox J.P., Koprowski H., Conwell D.P., al Study of antirabies immunization of man: Observations with HEP flury and other vaccines, with and without hyperimmune serum, in primary and recall immunizations Bull World Health Organization, 17(6):869–904 80 Enders J.F., Weller T.H., Robbins F.C (1949) Cultivation of the lansing strain of poliomyelitis virus in cultures of various human embryonic tissues Science, 109(2822):85-87 81 Barrett P.N., Mundt W., Kistner O., et al (2009) Vero cell flatform in vaccine production: moving towards cell cuture-based viral vaccine Expert reviews vaccine, 8(5):607-618 153 82 Reed L.J., Muench H (1938) A simple method of estimating fifty percent endpoints American journal of epidemiology, 27(3):493-497 83 LaBarre D.D., Lowy R.J (2001) Improvements in methods for calculating virus titer estimates from TCID50 and plaque assays Journal virological methods, 96:107-126 84 Smither S.J., Lear R.C., Biggins J., et al (2013) Comparison of the plaque assay and 50% tissue culture infectious dose assay as methods for measuring filovirus infectivity Journal of virological methods, 193:565571 85 Cattaneo R (2010) Paramyxovirus entry and targeted vectors for cancer therapy PLOS pathogens, 6:1-4 86 Peng K.W., Ten E.C.J., Galanis E., et al (2002) Intraperitoneal therapy of ovarian cancer using an engineered measles virus Cancer research, 62:4656-4662 87 Zhao D., Chen P., Yang H., et at (2013) Live attenuated measles virus vaccine induces apoptosis and promotes tumor regression in lung cancer Oncology reports, 29:199-204 88 Yan Y., Liang B., Zhang J., et al (2015) Apoptotic induction of lung adenocarcinoma A549 cells infected by recombinant RVG Newcastle disease virus (rL‑RVG) in vitro Molecular medicine reports, 11:317-326 89 Salimi V., Tavakoli Y.M., Mahmoodi M., et al (2013) The Oncolytic effect of respiratory syncytial Virus (RSV) in human skin cancer cell line, A431 Iranian red crescent medical journal, 15(1):62-67 90 Okunaga S., Takasu A., Meshii N., at el (2015) Entry of oncolytic Herpes Simplex virus into human squamous cell carcinoma cells by ultrasound Viruses, 7:5610-5618 154 91 Kerr J.F.R., Wyllie A.H., Currie A.R (1972) Apoptosis: A basic biological phenomenon with wide-ranging implications in tissue kinetics Britain journal cancer, 26:239-257 92 Nichols W.W., Levan A., Aura P., et al (1965) Chromosome damage associated with the measles virus in vitro Hereditas, 54(6):101-118 93 Robbins S.J (1983) Progressive invasion of cell nuclei by measles virus in persistently infected human cells Journal gene viralogy, 64:23352338 94 Johnson V.L., Ko S.C.W., Holmstrom T.H., et al (2000) Effector caspases are dispensable for the early nuclear morphological changes during chemical-induced apoptosis Journal cell science, 113:2941-2953 95 Ziegler U., Groscurth P (2004) Morphological features of cell death News physiological science, 19:124-128 96 Lim Y.J., Choi J.A., Choi H.H., et al (2011) Endoplasmic reticulum stress pathway mediated apoptosis in macrophages contributes to the survival of mycobacterium tuberculosis PLOS One, 6(12):1-10 97 Prasad A., Lu M., Lukac D.M., et al (2012) An alternative Kaposi's sarcoma-associated Herpes virus replication program triggered by host cell apoptosis Journal of virology, 1-55 98 Obregón H.A., Duque C.M.A., Rojas M., et al (2012) Stable extracellular RNA fragments of mycobacterium tuberculosis induce early apoptosis in human monocytes via a caspase-8 dependent mechanism PLOS One, 7(1):1-11 99 Nakagawaa T., Yuana J (2000) Cross-talk between two cysteine protease families: Activation of caspase-12 by calpain in apoptosis The journal of cell biology, 150(4):887-894 155 100 Herbein G., Brien W.A.O (2000) Tumor necrosis factor (TNF)-alpha and TNF receptors in viral pathogenesis Proceedings of the society for experimental biology and medicine, 223:241-257 101 Bhaskar A., Bala J., Varshney A., et al (2011) Expression of measles virus nucleoprotein induces apoptosis and modulates diverse functional proteins in cultured mammalian cells PLOS One, 6(4):1-12 102 Esolen L.M., Park S.W., Hardwick J.M., Griffin D.E (1995) Apoptosis as a cause of death in measles virus-infected cells Journal of virology, 69(6): 3955-3958 103 Zhou S., Li Y., Huang F., et al (2012) Live-attenuated measles virus vaccine confers cell contact loss and apoptosis of ovarian cancer cells via ROS induced silencing of E-cadherin by methylation Cancer letters, 318(1):14-25 104 Miki S., Yamada H., Orita T., et al (1991) Suicide process of renal cell carcinoma cells encountering mumps virus Federation of European biochemical societies letters, 278(2):179-182 105 Ulane C.M., Rodriguez J.J., Parisien J-P., et al (2003) STAT3 ubiquitylation and degradation by mumps virus Suppress cytokine and oncogene signaling Journal of virology, 77(11):6385-6393 106 Boisgerault N., Guillerme J.B., Pouliquen D., et al (2013) Natural oncolytic activity of live-attenuated measles virus against human lung and colorectal adenocarcinomas Bio-medicine research international, 1-12 107 Phuong L.K., Allen C., Peng K.W., et al (2003) Use of a vaccine strain of measles virus genetically engineered to produce carcinoembryonic antigen as a novel therapeutic agent against glioblastoma multiforme Cancer research, 63(10):2462-2469 156 108 Liu C., Sarkaria J.N., Petell C.A., et al (2007) Combination of measles virus virotherapy and radiation therapy has synergistic activity in the treatment of glioblastoma multiforme Clinical cancer research, 13(23):7155-7165 109 Richetta C., Gregoire I.P., Verlhac P., et al (2013) Sustained autophagy contributes to measles virus infectivity PLOS pathogens, 9(9):1-15 110 Xia M., Meng G., Jiang A., et al (2014) Mitophagy switches cell death from apoptosis to necrosis in NSCLC cells treated with oncolytic measles virus Oncotarget, 5(11):1-15 111 Msaouel P., Iankov I.D., Dispenzieri A., Galanis E (2012) Attenuated oncolytic Measles Virus strains as cancer therapeutics Curr pharmaceutical biotechnology, 13(9):1732-1741 112 Heinzerling L., Kunzi V., Oberholzer P.A., et al (2005) Oncolytic measles virus in cutaneous t-cell lymphomas mounts antitumor immune responses in vivo and targets interferon-resistant tumor cells Blood, 106(7):2287-2294 113 Galanis E., Hartmann, L.C., Cliby W.A., et al (2010) Phase I trial of intraperitoneal administration of an oncolytic measles virus strain engineered to express carcinoembryonic antigen for recurrent ovarian cancer Cancer research, 70(3):875-882 114 Asada T (1974) Treatment of human cancer with mumps virus Cancer, 34: 1907-1928 115 Ammayappan A., Russell S.J., Federspiel M.J (2016) Recombinant mumps virus as a cancer therapeutic agent Molecular therapyOncolytics, 3:1-10 116 Boisgerault N., Tangy F., Gregoire M (2010) New perspectives in cancer virotherapy: bringing Immunotherapy, 2(2):185-199 the immune system into play 157 117 Chiocca E.A., Rabkin S.D (2014) Oncolytic Viruses and Their Application to Cancer Immunotherapy Cancer immunol research, 2(4):295-300 118 Ferlazzo G., Thomas D., Lin S.L., et al (2004) The abundant NK Cells in human secondary lymphoid tissues require activation to express killer cell Ig-like receptors and become cytolytic Journal of immunology, 172: 1455-1462 119 Michel T., Poli A., Domingues O., et al (2012) Mouse lung and spleen natural killer cells have phenotypic and functional differences, in part influenced by macrophages PLOS One, 7(12):1-7 120 Teng L.M.W., Swann J.B., Koebel C.M., et al (2008) Immunemediated dormancy: an equilibrium with cancer Journal of leukocyte biology, 84:988-993 121 Caro D.G., Marchesi F., Laghi L., et al (2013) Immune cells: plastic players along colorectal cancer progression Journal of cellular and molecular medicine, 17(9):1088-1095 122 Dunn G.P., Old L.J., Schreiber R.D (2004) The three Es of cancer immunoediting Annual review of immunology, 22:329-360 123 Ahn G.O., Martin Brown J (2008) Matrix metalloproteinase-9 is required for tumor vasculogenesis but not for angiogenesis: Role of bone marrowderived myelomonocytic cells Cancer cell, 13(3):193-205 124 Grote D., Cattaneo R., Fielding A.K (2003) Neutrophils contribute to the measles virus-induced antitumor effect: Enhancement by granulocyte macrophage colony-stimulating factor expression Cancer research, 63:6463-6468 125 Palucka K., Banchereau J (2013) Cancer immunotherapy via dendritic cells Nature reviews cancer, 12(4):265-277 158 126 Lakomy D., Janikashvili N., Fraszczak J., et al (2018) Cytotoxic dendritic cells generated from cancer patients The journal of immunology, 1-8 127 Guillerme J.B., Boisgerault N., Roulois D (2013) Measles virus vaccine-infected tumor cells induce tumor antigen cross-presentation by human plasmacytoid dendritic cells Clinical cancer research, 1-31 128 Bras M.L., Rouy I., Brenner C (2006) The modulation of interorganelle cross-talk to control apoptosis Medicinal chemistry, 2:1-12 129 Sevrioukova I.F (2011) Apoptosis-inducing factor: Structure, function, and redox regulation Comprehensive invited review, 14(12):2545-2579 130 Santin G., Scietti L., Veneroni P., et al (2012) Effects of cisplatin in neuroblastoma rat cells: damage to cellular organelles Inernational journal of cell biology, 1-6 131 Bastian A.M., Yogesh T.L., Kumaraswamy K.L (2018) Various methods available for detection of apoptotic cells-A review Indian journal of cancer, 50(3):274-283 132 Liu X., Li P., Widlak P., (1998) The 40kDa subunit of DNA fragmentation factor induces DNA fragmentation and chromatin condensation during apoptosis Proceedings of the national academy of sciences USA, 95:8461-8466 133 Núñez R., Sancho-Martníez S.M., Novoa J.M., et al (2010) Apoptotic volume decreases as a geometric determinant for cell dismantling into apoptotic bodies Cell death differentiation, 17:1665-1671 134 Soldani C., Croce A.C., Bottone M.G., et al (2007) Apoptosis in tumour cells photosensitized with Rose Bengal acetate is induced by multiple organelle photodamage Histochemistry and cell biology, 128:485–495 135 Grimm S (2012) The ER-mitochondria interface: the social network of cell death Biochimica et biophysica acta, 1823:327-334 159 136 Bottone M.G., Santin G., Aredia F., et al (2013) Morphological features of organelles during apoptosis: An overview Cells, 2:294-305 137 Johansson A.C., Appelqvist H., Nilsson C., et al (2010) Regulation of apoptosis-associated lysosomal membrane permeabilization Apoptosis, 15:527-540 138 Kroemer G., Petit P., Zamzami N., et al (1995) The biochemistry of programmed cell death Federation of American societies for experimental biology journal, 9:1277-1287 139 Candé C., Cecconi F., Dessen P., et al (2002) Apoptosis-inducing factor (AIF): key to the conserved caspase-independent pathways of cell death Journal of cell science, 115:4727-4734 140 Yang L., Liu Y., Wang M., et al (2016) Quercetin-induced apoptosis of HT-29 colon cancer cells via inhibition of the Akt-CSN6-Myc signaling axis Molecular medicine reports, 1-8 141 Waziri P.M., Abdullah R., Yeap S.K., et al (2016) Clausenidin induces caspase-dependent apoptosis in colon cancer Biomedicine central complementary and alternative medicine, 16:1-12 ... GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG HỌC VIỆN QUÂN Y LÊ DUY CƯƠNG NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG KHÁNG UNG THƯ ĐẠI TRÀNG NGƯỜI CỦA VIRUS VACCINE SỞI VÀ QUAI BỊ TRÊN THỰC NGHIỆM Chuyên ngành: Khoa học y sinh... người thực nghệm mở đầu cho việc sâu nghiên cứu, áp dụng phương pháp điều trị ung thư đại tràng người Vì v? ?y, chúng tơi tiến hành đề tài ? ?nghiên cứu tác dụng kháng ung thư đại tràng người virus vaccine. .. Đánh giá độc tính virus vaccine sởi quai bị chuột thiếu hụt miễn dịch mang khối u tế bào ung thư đại tràng người HT-29 123 4.4.2 Virus vaccine sởi quai bị kháng u tế bào ung thư đại tràng người