Luận án Nghiên cứu tác dụng điều trị của thuốc HT trên thực nghiệm và bệnh nhân đái tháo đường Typ 2 được thực hiện với các mục tiêu: nghiên cứu độc tính và đánh giá tác dụng hạ glucose huyết của thuốc HT trên động vật thực nghiệm, nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của thuốc HT trên lâm sàng, so sánh với một thuốc tân dược. Mời các bạn cùng tham khảo.
BỘ GIÁO DỤC VÀ ĐÀO TẠO BỘ QUỐC PHÒNG VIỆN Y HỌC CỔ TRUYỀN QUÂN ĐỘI LÊ HỒNG TUYẾN NGHIÊN CỨU TÁC DỤNG ĐIỀU TRỊ CỦA THUỐC HT TRÊN THỰC NGHIỆM VÀ BỆNH NHÂN ĐÁI THÁO ĐƯỜNG TYP 2 Chuyên ngành : Y học cổ truyền Mã số : 62720201 TĨM TẮT LUẬN ÁN TIẾN SĨ Y HỌC HÀ NỘI 2016 CƠNG TRÌNH ĐƯỢC HỒN THÀNH TẠI: VIỆN Y HỌC CỔ TRUYỀN QN ĐỘI Người hướng dẫn khoa học: 1. PGS.TS. NGUYỄN MINH HÀ 2. TS. ĐỖ THỊ MINH THÌN Phản biện 1: PGS TS Đỗ Thị Phương Phản biện 2: PGS TS Hồng Trung Vinh Phản biện 3: PGS TS Nguyễn Trọng Thơng Luận án được bảo vệ trước Hội đồng chấm luận án cấp Viện Vào hồi giờ ngày tháng năm 2016 Có thể tìm hiểu luận án tại Thư viện Viện Y học Cổ truyền Qn Đội Thư viện Quốc gia Thư viện thơng tin Y học Trung ương Phần A: GIỚI THIỆU LUẬN ÁN 1. ĐẶT VẤN ĐỀ Đái tháo đường (ĐTĐ) là một bệnh nội tiết, ngày càng gia tăng trên thế giới cũng như ở Việt Nam, tỷ lệ tử vong đứng hàng thứ 3 sau bệnh lý ung thư và tim mạch. Năm 2011, liên đồn ĐTĐ Quốc tế (IDF) đã thơng báo thế giới có 366 triệu người, dự báo đến năm 2030 có thể lên tới 552 triệu người. Nghiên cứu dịch tễ của Bệnh viện Nội tiết (năm 2014, Hà Nội) tỷ lệ ĐTĐ ở người trưởng thành tăng gấp 5 6 lần so với trước đây (5,42%) Trong hồn cảnh nước ta hiện nay, hầu hết các thuốc điều trị ĐTĐ phải nhập ngoại đắt tiền, việc điều trị ĐTĐ phải suốt đời nên rất khó khăn với người bệnh. Việc tìm kiếm một loại thuốc điều trị có hiệu quả, ít độc hại, sẵn ngun liệu trong nước là cần thiết và ý nghĩa thực tiễn cao Từ kết quả xây dựng mơ hình ĐTĐ trên thực nghiệm, kết hợp với việc nghiên cứu, lựa chọn bài thuốc từ các tài liệu y văn và kinh nghiệm điều trị trên lâm sàng, bài thuốc HT được xây dựng. Để có đủ sở khoa học khẳng định hiệu quả của bài thuốc, chúng tơi tiến hành đề tài: “Nghiên cứu tác dụng điều trị của thuốc HT trên thực nghiệm và bệnh nhân đái tháo đường typ 2”, 2. MỤC TIÊU CỦA ĐỀ TÀI 1. Nghiên cứu độc tính và đánh giá tác dụng hạ glucose huyết của thuốc HT trên động vật thực nghiệm 2. Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết của thuốc HT trên lâm sàng, so sánh với một thuốc tân dược Ý NGHĨA THỰC TIỄN VÀ ĐĨNG GĨP MỚI CỦA LUẬN ÁN Luận án nghiên cứu là cơng trình khoa học tiến hành một cách hệ thống một sản phẩm thuốc YHCT từ tiền lâm sàng đến lâm sàng ứng dụng điều trị ĐTĐ typ 2. Kết quả nghiên cứu cho thấy: thuốc HT có tính an tồn cao, có tác dụng hạ glucose huyết, điều chỉnh rối loạn lipid máu trên thực nghiệm và trên bệnh nhân ĐTĐ typ 2 mức độ nhẹ và trung bình, chưa thấy tác dụng khơng mong muốn trên lâm sàng. Việc nghiên cứu ứng dụng thuốc HT trong điều trị bệnh ĐTĐ typ 2, góp phần làm sáng tỏ lý luận YHCT và từng bước hiện đại hóa YHCT là việc làm có ý nghĩa khoa học, thực tiễn. Đặc biệt ở nước ta là một nước có bề dầy truyền thống trong sử dụng YHCT để chăm sóc sức khoẻ cộng đồng thì kết quả của đề tài luận án là những đóng góp mới và hết sức thiết thực. Cấu trúc của luận án: Ngồi phần đặt vấn đề và kết luận, luận án có 4 chương: Chương 1: Tổng quan tài liệu 39 trang Chương 2: Đối tượng và phương pháp nghiên cứu 20 trang Chương 3: Kết quả nghiên cứu 36trang Chương 4: Bàn luận 29 trang Luận án có: 56 bảng, 4 biểu đồ, 14 hình, 2 sơ đồ, 3 phụ lục, 146 tài liệu tham khảo (tiếng Việt 52, tiếng Anh 66, tiếng Trung Quốc 28) Phần B: NỘI DUNG LUẬN ÁN CHƯƠNG 1: TỔNG QUAN 1.1 ĐỊNH NGHĨA, CƠ CHẾ BỆNH SINH, TIÊU CHUẨN CHẨN ĐỐN VÀ ĐIỀU TRỊ ĐTĐ TYP 2 THEO YHHĐ * Định nghĩa và phân loại đái tháo đường Theo định nghĩa của Uỷ ban chẩn đốn và phân loại bệnh đái tháo đường Hoa Kỳ: “Đái tháo đường là một bệnh rối loạn chuyển hố có đặc điểm là tăng glucose huyết, hậu quả của sự thiếu hụt tiết insulin; khiếm khuyết trong hoạt động của insulin; hoặc cả hai. Tăng glucose huyết mạn tính thường kết hợp với huỷ hoại, rối loạn và suy yếu chức năng của nhiều cơ quan đặc biệt là mắt, thận, thần kinh, tim và mạch máu”. * Cơ chế bệnh sinh của đái tháo đường typ 2 Cơ chế bệnh sinh ĐTĐ typ 2 liên quan đến sự thiếu hụt insulin tương đối, chủ yếu là do rối loạn tiết insulin và hiện tượng kháng insulin. Trong đó rối loạn tiết insulin và kháng insulin có liên quan mật thiết với nhau và đều xảy ra trước khi xuất hiện các biểu hiện lâm sàng của ĐTĐ (giai đoạn tiền ĐTĐ). Ở bệnh nhân ĐTĐ typ 2 khơng thừa cân biểu hiện giảm insulin là chính, ngược lại bệnh nhân ĐTĐ typ 2 có kèm béo phì tình trạng kháng insulin lại là chính * Điều trị ĐTĐ typ 2 Các biện pháp điều trị bao gồm điều chỉnh lối sống (chế độ ăn và luyện tập) và dùng thuốc. Các thuốc điều trị ĐTĐ typ 2 hiện nay tập trung vào các nhóm: thuốc kích thích bài tiết insulin (sulfonylurea, meglitinid), thuốc làm tăng nhạy cảm của tế bào đích với insulin (dẫn xuất biguanid, nhóm thiazolidinedion), thuốc ức chế enzym α glucosidase, thuốc ức chế chất đồng vận chuyển Na+/glucose ở ống thận (SGLT2). 1.2. NGUYÊN NHÂN, CƠ CHẾ BỆNH SINH, TRIỆU CHỨNG VÀ NGUYÊN TẮC ĐIỀU TRỊ ĐÁI THÁO ĐƯỜNG TYP 2 THEO YHCT Y học cổ truyền (YHCT) khơng có bệnh danh ĐTĐ, các biểu hiện triệu chứng của chúng thuộc phạm trù chứng “Tiêu khát”, do rất nhiều ngun nhân gây ra, trên lâm sàng lấy các triệu chứng như uống nhiều, ăn nhiều, đái nhiều, gầy sút, mệt mỏi hoặc nước tiểu có vị ngọt là triệu chứng chính của bệnh. Ngun nhân phát sinh chứng tiêu khát có liên quan đến tiên thiên bất túc, ngũ tạng hư nhược, tinh thần kích thích, tình chí khơng điều hòa, hoặc ăn q nhiều đồ béo ngọt, cơ thể béo phì. Bản chất của chứng tiêu khát là âm hư táo nhiệt, ảnh hưởng trực tiếp tới các tạng phủ là phế, tỳ, vị, thận. Pháp điều trị thường dùng là: thanh nhuận phế nhiệt – dưỡng âm thanh vị – tư bổ thận âm – sinh tân chỉ khát 1.3. THUỐC HT Thành phần bài thuốc HT TT Tên dược liệu Hàm lượng Nhân sâm (Radix ginseng) 0,80 g Mạch mơn (Radix Ophiopogonis japonici) 1,70 g Ngũ vị tử (Fructus Schisandrae) 0,35 g Trần bì (Pericarpium Citri reticulatae) 0,45 g Cát căn (Radix Puerariae Thomsonii) 1,70 g Tác dụng: tư âm, sinh tân, chỉ khát, kiện tỳ, trừ đàm Các kết quả nghiên cứu hiện đại đã cho thấy các vị thuốc cấu tạo nên bài thuốc HT đều chứa các thành phần hóa học có tác dụng hạ glucose huyết trên thực nghiệm Bài thuốc đã được ứng dụng điều trị bệnh nhân tiêu khát (ĐTĐ) trên lâm sàng bước đầu có tác dụng hạ glucose huyết và cải thiện một số triệu chứng lâm sàng như ăn nhiều, uống nhiều, đái nhiều, mệt mỏi. CHƯƠNG 2 CHẤT LIỆU ĐỐI TƯỢNG VÀ PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.1. CHẤT LIỆU NGHIÊN CỨU Thuốc dùng nghiên cứu Thuốc bào chế và đóng gói tại khoa Dược Viện Y học cổ truyền Quân đội, đạt tiêu chuẩn cơ sở đã được kiểm nghiệm tại Viện kiểm nghiệm thuốc Trung ương. Thuốc tán mịn đóng trong túi thiếc 5g/gói, 20 gói/hộp 2.2. ĐỐI TƯỢNG NGHIÊN CỨU 2.2.1. Nghiên cứu trên động vật thực nghiệm Chuột nhắt trắng chủng Swiss, 60 con, hai giống, khoẻ mạnh, trọng lượng 20 22g do Viện Vệ sinh dịch tễ Trung ương cung cấp. Chuột cống trắng chủng Wistar 80 con, tồn đực, trọng lượng trung bình 200 ± 20g do Ban Chăn ni (Học viện Qn y) cung cấp. Thỏ chủng Newzealand White, 30 con, lơng trắng, trọng lượng 1,82,2kg do Trung tâm nghiên cứu Dê và Thỏ Sơn Tây cung c ấ p 2.2.2. Nghiên cứu trên lâm sàng 120 bệnh nhân được chẩn đốn xác định đái tháo đường typ 2 mức độ nhẹ và trung bình, tình ngun tham gia nghiên cứu tuổi trưởng thành (> 18 tuổi), theo tiểu chuẩn chẩn đốn ĐTĐ của WHO (2002) và phân loại mức độ bệnh theo Thái Hồng Quang 2001. Bệnh nhân được điều trị nội trú tại Viện Y học cổ truyền Qn đội * Tiêu chuẩn chọn bệnh nhân nghiên cứu: Theo YHHĐ: Trong nghiên cứu này, bệnh nhân lựa chọn ở cả hai giới, được chẩn đoán xác định là ĐTĐ typ 2 theo tiểu chuẩn chẩn đoán ĐTĐ của WHO (2002) và phân loại mức độ bệnh theo Thái Hồng Quang 2001. Theo YHCT: Dựa vào thang điểm đánh giá mức độ triệu chứng bệnh tiêu khát và thông qua tứ chẩn: vọng, văn, vấn, thiết chia thành các thể bệnh (thượng tiêu, trung tiêu, hạ tiêu) * Tiêu chuẩn loại trừ ra khỏi diện nghiên cứu: Theo YHHĐ: ĐTĐ typ 2 mức độ nặng BN dùng thêm các thuốc điều trị ĐTĐ khác BN đang có biến chứng cấp tính như: hơn mê nhiễm toan ceton, hơn mê tăng áp lực thẩm thấu, các nhiễm trùng cấp tính (nhiễm khuẩn tiết ni ệu, viêm phổi, ) và đang có các bệnh khác phối hợp như đái máu đại thể Suy gan, suy thận, suy tim, hoại tử chi Tiền sử có NMCT, đột quỵ não THA kháng trị ĐTĐ có các bệnh lý nội tiết kèm theo (Basedow, Hội chứng Cushing ) ĐTĐ có các bệnh nặng, phụ nữ có thai và cho con bú, q mẫn với Glimepirid, sulgonylurea khác Khơng tn thủ điều trị theo phác đồ Theo YHCT: Thể âm dương lưỡng hư 2.3. PHƯƠNG PHÁP NGHIÊN CỨU 2.3.1. Nghiên cứu độc tính cấp, bán trường diễn và tác dụng hạ đường huyết của thuốc HT trên động vật thực nghiệm * Nghiên cứu độc tính cấp và độc tính bán trường diễn Độc tính cấp thuốc HT được xác định trên chuột nhắt trắng theo đường uống bằng phương pháp Litchfield – Wilcoxon. Chuột uống thuốc HT (sau nhịn ăn 12 giờ) theo liều tăng dần từ 10,0g/kg đến 50,0g/kg Theo dõi tình trạng chung số lượng chuột chết ở mỗi lơ trong 72 giờ. Thử độc tính bán trường diễn: tiến hành trên thỏ với liều 1,2 g/kg/ngày (tương đương liều dùng trên người, tính theo hệ số 3) và liều 3,6 g/kg/ngày (gấp 3 lần liều dùng trên người) trong thời gian thử nghiệm 4 tuần. Theo dõi cân nặng, ăn, ngủ, hoạt động, tiêu hóa, huyết học, hóa sinh chức năng gan, thận, mơ bệnh học gan và thận. So sánh với chứng uống nước cất * Nghiên cứu tác dụng hạ glucose huyết và lipid máu của thuốc HT trên thực nghiệm Chuột cống trắng được gây mơ hình đái tháo đường typ 2 bằng phương pháp ni chế độ ăn giàu chất béo và tiêm STZ Chuột cống chia thành 5 lơ nghiên cứu (mỗi lơ 10 con): một lơ khơng tiêm STZ và 4 lơ tiêm STZ có uống thuốc nghiên cứu: Lơ 1: chứng mơ hình (khơng tiêm STZ) Lơ 2 (chứng âm): uống nước muối sinh lý Lơ 3 (chứng dương): uống Amaryl liều 0,56 mg/kg Lơ 4 (nghiên cứu 1): uống thuốc HT liều 2,8g/kg (liều tương đương liều lâm sàng) Lơ 5 (nghiên cứu 2): uống thuốc HT liều 8,4g/kg (liều gấp 3 lần liều lâm sàng) Ngày thứ 10 sau khi uống thuốc 1h thì xét nghiệm glucose huyết của tất cả các lơ nghiên cứu. Đánh giá các chỉ số glucose huyết, mơ bệnh học đảo tụy, triglycerid, HDLc, LDLc, cholesterol so sánh các thời điểm và giữa các lơ nghiên cứu 2.3.2. Nghiên cứu trên lâm sàng Thử nghiệm lâm sàng tiến cứu ngẫu nhiên có đối chứng. 120 bệnh nhân đủ tiêu chuẩn nghiên cứu chia làm 2 nhóm uống thuốc nghiên cứu. Nhóm (nhóm NC) 80 bệnh nhân: thuốc HT 10g/lần x 2 lần/ngày. Uống sau khi ăn 30 phút Nhóm 2 (nhóm chứng) 40 bệnh nhân: Amaryl 4mg x 02 viên/ ngày. Uống sáng, chiều trước ăn 30 phút Các bệnh lý kết hợp bệnh nhân nghiên cứu THA, RLLPM…vẫn kê thuốc tây y để điều trị. Thời gian uống thuốc liên tục trong 4 tuần. Sau mỗi tuần điều trị làm lại các xét nghiệm glucose huyết lúc đói, sau ăn 2 giờ và đánh giá kết quả điều trị sau 4 tuần. * Các chỉ tiêu đánh giá kết quả Theo Y học hiện đại: Bảng 2.7. Mục tiêu kiểm soát các chỉ số ở bệnh nhân ĐTĐ typ 2 của Hội Nội tiết Đáo tháo đường Việt Nam năm 2011 Chỉ số Đơn vị Tốt Chấp nhận Kém Glucose huyết lúc đói mmol/l 4,4 6,1 6,2 7,0 > 7,0 Glucose huyết sau ăn mmol/l 15 2h HbA1c % 7,5 Huyết áp mmHg 140/90 BMI kg/m2 18,5 23 18,5 23 ≥ 23 Cholesterol TP mmol/l 1,1 ≥ 0,9 20% so với trước điều trị 3.2.2.Sự thay đổi các chỉ tiêu lâm sàng trước và sau điều trị 3.2.2.1.Sự thay đổi các triệu chứng cơ năng Bảng 3.34. Thay đổi triệu chứng lâm sàng tại các thời điểm theo dõi Nhóm Nghiên cứu1 Nhóm Chứng2 Thời điểm Bình n thường % n Nhẹ Tuần % n Vừa % n Nặng % n Tốt % n Khá Tuần % Trung n bình % n Kém % (n=80) Thượng Trung tiêu tiêu 15 12 18,75 15,0 10 8,75 8,75 10,0 0 0 22 15 27,5 18,75 6,25 8,75 3,75 6,25 0 0 Hạ tiêu 10,0 10,0 8,75 0 10 12,5 7,5 8,75 0 (n=40) Thượng Trung tiêu tiêu 17,5 15,0 10,0 7,5 4 10,0 10 0 0 12,5 10 3 7,5 7,5 17,5 15,0 0 0 Hạ tiêu 10,0 12,5 7,5 0 7,5 5,0 17,5 0 p12 > 0,05 0,05). Sau 4 tuần điều trị tỉ lệ bệnh nhân trở về loại tốt và khá ở thể hạ tiêu thấp hơn so với thể trung tiêu và thượng tiêu. Triệu chứng cơ năng của nhóm nghiên cứu giảm tốt hơn nhóm chứng có ý nghĩa thống kê (p 0,05 p11'> 0,05 p22> 0,05 p11'> 0,05 p22'> 0,05 p11'> 0,05 p22'> 0,05 (*p 0,05 p22'> 0,05 p33'> 0,05 Glucose p > 0,05 13,74± 12,19 ± 12,09 ± 13,38 ± 12,15 ± 12,07 ± 11' huyết sau p22'> 0,05 1,49 1,47 1,30 1,95 0,82 0,45 ăn 2h p33'> 0,05 p11'> 0,05 Glucose 8,21 ± 8,03 ± 7,25 ± 8,22 ± 7,58 ± 7,08 ± p22'> 0,05 huyết đói 1,43* 1,37* 1,44* 1,83* 1,62* 0,84* p33'> 0,05 Glucose p > 0,05 12,03 ± 11,81 ± 10,17 ± 12,53 ± 11,83 ± 10,79 ± 11' huyết sau p22'> 0,05 2,15* 1,64* 2,17* 1,64* 0,54* 0,70* ăn 2h p33'> 0,05 7,50 ± p11'> 0,05 Glucose 7,43 ± 6,73 ± 7,45 ± 7,12 ± 6,44 ± 1,27 p22'> 0,05 huyết đói 1,39* 1,24* 0,87* 0,72* 0,61* * p33'> 0,05 Glucose p > 0,05 10,83 ± 10,76 ± 9,87 ± 11,60 ± 10,71 ± 10,33± 11' huyết sau p22'> 0,05 1,64* 1,34* 1,33* 1,40* 0,66* 0,57* ăn 2h p33'> 0,05 Glucose 6,74 ± 6,53 ± 6,16 ± 6,53 ± 6,16 ± 6,09 ± p11'> 0,05 huyết đói 0,59* 1,13* 0,77* 0,46* 0,49* 0,60* p22'> 0,05 p33'> 0,05 Glucose huyết đói 9,21 ± 2,10 8,63 ± 2,36 7,98 ± 1,89 9,29 ± 1,40 8,30 ± 2,64 7,97 ± 1,59 Glucose 10,07 ± huyết sau 0,99* ăn 2h 9,93 ± 0,79* 9,33 ± 0,79* 10,57 ± 10,32 ± 0,82* 0,44* 9,77± 0,57* p11'> 0,05 p22'> 0,05 p33'> 0,05 (*p0,05). Kết quảđiều trị glucose huyết bắt đầu giảm từ tuần thứ 2 tốt nhất là thể thượng tiêu, rồi đến thể trung tiêu và kém nhất là thể hạ tiêu. Sau điều trị 4 tuần ở cả 2 nhóm và các thể glucose huyết đói và sau ăn 2h giảm có ý nghĩa thống kê (p 0,05). Kết quả của chúng tơi cũng phù hợp với các giả khác: Mai Thế Trạch (1982) nghiên cứu thấy nhóm tuổi từ 5560 chiếm tỷ lệ cao nhất là 48,3%. Lê Văn Bách, Trần Hữu Dàng (1993) nghiên cứu trên 72 bệnh nhân ĐTĐ typ 2 thấy tuổi mắc bệnh thấp nhất là 40 tuổi, cao nhất là 79 tuổi. Theo Bùi Thị Hồng Thuý (1998) nghiên cứu trên 60 bệnh nhân ĐTĐ typ 2: tuổi mắc bệnh thấp nhất là 42 tuổi, cao nhất là 79 tuổi; nhóm tuổi từ 4059 chiếm tỷ lệ cao nhất là 66,66%. Phân bố bệnh nhân theo giới: Trong nghiên cứu có 78 bệnh nhân nam chiếm 65%, 42 bệnh nhân nữ chiếm 35% có ý nghĩa thống kê trong tổng số bệnh nhân (p 0,05 KẾT LUẬN 1. Thuốc HT dùng đường uống có tính an tồn cao, có tác dụng hạ glucose huyết và điều chỉnh lipid máu trên thực nghiệm: Chưa xác định được liều chết 50% số chuột thí nghiệm (LD50) thuốc HT đường uống theo phương pháp Litchfield Wilcoxon. Thuốc HT liều 50g/kg thể trọng (liều cao nhất cho chuột uống) không gây chết chuột Thực nghiệm thỏ thuốc HT liều 1,2g/kg/ngày 3,6g/kg/ngày, uống liên tục trong 4 tuần chưa thấy biến đổi các chỉ số huyết học, hóa sinh máu và mơ bệnh học của gan, thận thỏ Trên mơ hình động vật gây ĐTĐ typ 2 (gây bằng chế độ ni giàu chất béo và STZ liều 30 mg/kg): thuốc HT có tác dụng hạ glucose huyết với liều 2,8 g/kg/ngày (tương đương liều lâm sàng) giảm 28%, liều 8,4g/kg/ngày (tương đương gấp 3 liều lâm sàng) giảm 20,3% điều trị trong 10 ngày. Thuốc HT có xu hướng hạ Cholesterol, LDLC, Triglycerid tăng HDLC (so với trước nghiên cứu khác biệt khơng có ý nghĩa thống kê). Thuốc HT có tác dụng hạ glucose huyết đói và sau ăn trên bệnh nhân đái tháo đường typ 2: Thuốc HT có tác dụng hạ glucose huyết trên lâm sàng từ tuần thứ Sau điều trị 4 tuần glucose huyết giảm có ý nghĩa (p