học của enzyme diastaza theo chức năng liên quan đến những biến điều chỉnh và để phù hợp với một phương trình hồi quy tập trung mô tả nồng độ của HMF và các hoạt động khác của diasta[r]
(1)THIẾT LẬP NỒNG ĐỘ HMF VÀ HOẠT ĐỘ ENZYME DIASTAZA
TRONG HOA HƯỚNG DƯƠNG
PHƯƠNG PHÁP
(2)PHẢN ỨNG BỀ MẶT
Nhiệt độ
Thời gian
PH
(3)Hydroxymethyfurfural ( HMF )
Hydroxymethyfurfural ( HMF )
Sự tập trung HMF nhận biết:
Nhiệt độ: 47,5
0C
Thời gian: 9,5 phút
pH: 5,2
Kiểm chứng liệu thực nghiệm
(4)Enzyme diastaza
Enzyme diastaza
Gồm loại:
•
α- Amylase
ã
ò- Amylase
Hot ng tt nht:
ã
Nhit độ: 55
0C
(5)VẬT LIỆU VÀ PHƯƠNG PHÁP
Cân khoảng 10g mật ong hòa tan
trong 50ml nước cất
Cân khoảng 10g mật ong hòa tan
trong 50ml nước cất
Phấn hoa có
trong 1mm
Phấn hoa có
trong 1mm
Số phấn hoa tính = 8
(6)XỬ LÍ NHIỆT
(7)THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM
Nghiên cứu dựa giả thuyết đặc HMF hóa
học enzyme diastaza theo chức liên quan đến biến điều chỉnh để phù hợp với phương trình hồi quy tập trung mơ tả nồng độ HMF hoạt động khác diastaza
Việc thiết kế phụ thuộc lựa chọn đối xứng biến tăng
về thành phần trung tâm Các cấp độ biến thể chọn để trong phạm vi hợp lý bước lựa chọn cẩn thận.
(8)THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM
Bảng giá trị cấp độ mã phương trình liên hệ giá trị thực xi và mã Xi aX
1 = ( x1 – 50 )/5, bX2 (x2 – 5.3 )/0.5, cX3 ( x3 – 10 )/5
Các biến xác định
Biểu tượng Cấp độ
Mẫu Thực -1.682 -1 +1 +1.682
Nhiệt độ ( 0C )
X1a X
1 41.59 45 50 55 58.41
pH X2b X
2 4.46 4.8 5.3 5.8 6.14
Thời gian ( phút )
X3c X
(9)THIẾT KẾ THÍ NGHIỆM
Bảng 2: Thí nghiệm ngẫu nhiên để giảm thiểu tác
động biến đổi khơng giải thích quan sát thấy phản ứng yếu tố không liên quan.
Phương trình độ đa thức thứ hai:
Bảng 2: Thí nghiệm ngẫu nhiên để giảm thiểu tác
động biến đổi không giải thích quan sát thấy phản ứng yếu tố khơng liên quan.
Phương trình độ đa thức thứ hai:
Y
k= b
KO+
b
KiX
i+
b
KiiX
0 (10)Bảng 2: Trung tâm hỗn hợp thiết kế cách bố trí đặc trưng khác
Thí nghiệm Cấp độ biến Các đặc trưng
X1 X2 X3 HMF Số lượng diastaza
(11)PHÂN TÍCH DỮ LIỆU
Số lần thực tăng lên cách đột ngột giảm tối
thiểu phù hợp với đa thức.
Trang thiết bị thực kỹ thuật số:
Khách quan
Chính xác
Phần mềm Quattro Pro ( Borland, Mỹ )
Các phản ứng trang bị Stat để tiện cho việc sử dụng phần
(12)KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
KẾT QUẢ VÀ THẢO LUẬN
Mật ong hoa hướng dương chứa
80.000 phấn
hoa
của amus Helianthus 10g mật.
Phần cố định mật ong hướng dương nghèo
unifloaral.
(13)KIỂM TRA PHÉP CHUẨN SAI SỐ CỦA MẪU THÍCH HỢP
Mối quan hệ nồng độ HMF hoạt động enzyme
diataza mức mã biến.
Các mẫu phát triển sau:
Hydroxymethylfurfural
( Y1 ) = 11.18 +1.36X1 + 0.66X2 +3.45X3 – 0.32 - 0.15 + 0.30X1 X2 – 0.35X1X3
( df = 9, R2 =0.989 )
Hoạt động enzyme diastaza
( Y2 ) = + 21.99 – 2.55X1 – 2.62X2 – 4.17X3 – 0.90 - 3.17 + 0.37 - 1.31X1X2 + 1.25X1X3
(14)Bảng 3: Đánh giá ăn khớp cùa hệ số phương trình bậc hai các phản ứng khác dựa t - thống kê ( *P < 0.0001; df = 9)
Hệ số Đánh giá hệ số
HMF Số lượng men diastaza
X0 11.18 21.99
X1 1.36* -2.55*
X2 0.66* -2.62*
X3 3.45* -4.17*
X2
1 -0.32* -0.90*
X2
2 -0.15 -3.17*
X2
3 -0.88* 0.37*
X12 0.30* -1.31*
X13 -0.35* 1.25*
X23 -6.250E-0.03 1.12*
(15)Bảng : Phân tích giá trị trung bình hàm F-value
*P < 0.0001 ; df ( 9, 10 )
Phản ứng Nguồn gốc biến thiên
df Tổng bình phương
Trung bình bình
phương
F- value
HMF Hồi quy 9 207.25 23.04 167.58*
Kết tủa 10 1.37 0.14
Tổng 19 208.62
Hoạt động của enzyme diastaza
Hồi quy 9 613.31 68.15 34.98*
Kết tủa 10 19.48 1.95
(16)BIỂU ĐỒ CÁC NHÂN TỐ ẢNH HƯỞNG
Ảnh hưởng
Các thơng số
đến
hoạt tính
của
HMF
Ảnh hưởng
Các thông số
đến
(17)(18)(19)BIỂU ĐỒ CÁC NHÂN TỐ ẢNH HƯỞNG
(20)ĐIỀU KIỆN ĐỂ ĐẠT GIÁ TRỊ TỐI ƯU
Bảng 5: Giá trị trình biến đổi thông số đường cong thể điều kiện tối thích
HMF ( 3-10.21mg/kg ) hoạt động enzyme diastaza ( 9-23.090G ) sau đường viền
HMF hoạt động enzyme diastaza xếp lên
Quá trình biến đổi thông số Các cấp độ đặc trưng tối ưu Giá trị thực Giá trị mã
Nhiệt độ ( 0C ) 47.5 ± 10C -1 ± 0.6
pH 5.2 ± 0.15 -0.2 ± 0.1
(21)